Частина II: Характеристики розподілу кишкової флори у пацієнтів із дефіцитом Янг селезінки та нирки після радикальної резекції стадії II (високий ризик)/стадії III раку товстої кишки Ⅷ

1 Передумови дослідження

Є Тяньші запропонував у «Клінічному посібнику з медичних випадків», що «шість ци завдають шкоди людям, і вони змінюються залежно від людини. Люди з дефіцитом Інь мають сильний вогонь, і зло частіше повертається до табору; люди з дефіцитом Ян мають сильна вогкість, і зло частіше шкодить ци». Тобто, люди з дефіцитом Інь або сильним вогнем легко захоплюються теплим і гарячим злим Ци, тоді як люди здефіцит ян або сильний інь і холодлегко піддаються впливу холодної та вогкої злої ци, яка є так званим «однакова ци притягує одна одну».Хіміотерапевтичні препарати можуть легко пошкодити селезінку та нирки людського організму, що призводить до пригнічення кісткового мозку; виходячи з цього, можна зробити висновок, що для людей з дефіцитом селезінки та нирок хіміотерапевтичні препарати можуть бути більш імовірнимиураження селезінки і нирок, що призводить до пригнічення кісткового мозку.

Відповідно до теорії про те, що «те, що всередині, має відображатися назовні» («Даньсі Сіньчуань»), різні синдроми одного і того ж захворювання повинні мати певні спільні риси та відмінності на макро- та мікрорівнях. Ця різниця була підтверджена в дослідженні кишкової флори пацієнтів з хронічним гепатитом B [синдром вологості та тепла селезінки та шлунка, депресія печінки та синдром дефіциту селезінки],гіпертензія Синдром Інь і Ян[2], діабетична нефропатія, синдром вологого тепла та синдром невологого тепла [3], виразковий коліт товстого кишечника, синдром вологого тепла та селезінки тасиндром ниркової недостатності Ян[4]. Кишкова флора не тільки тісно пов’язана з виникненням і розвитком колоректального раку [5-7], але також може брати участь у опосередкуванні пошкодження слизової оболонки шлунково-кишкового тракту, спричиненого лікуванням пухлини [8-111 та пригніченням кісткового мозку [12] . Отже, чи існують певні характеристики кишкової флори пацієнтів із дефіцитом ян селезінки та нирки після радикальної резекції раку товстої кишки?

Ця частина базується на клінічному дослідженні «Дослідження синергічного ефекту та механізму послідовного призначення зміцнювальних засобів селезінки та нирок при ад’ювантній хіміотерапії раку товстої кишки», яке виконує команда викладачів. Пацієнти, які збираються отримати ад’ювантну хіміотерапію після радикальної резекції раку товстої кишки, використовуються як об’єкти дослідження для вивчення подібності та відмінностей у кишковій флорі між пацієнтами з дефіцитом ян селезінки та нирки після радикальної резекції раку товстої кишки та пацієнтами без дефіциту ян селезінки та нирки , і спробуйте виявити мікроскопічні відмінності між дефіцитом Ян селезінки та нирки після радикальної резекції раку товстої кишки та тими, хто не має дефіциту Ян селезінки та нирки, з точки зору кишкової флори.

НОВІ ТРАВИ ПРИ ДЕФІЦИТІ ІНЬ ТА ЯН У НИРКАХПРОТЯГОМХІМІОТЕРАПІЯ

Натисніть, щоб дізнатися більше

Служба підтримки Wecistanche - найбільшого експортера cistanche в Китаї:

Електронна адреса:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Тел.:+86 15292862950

2 Клінічні дані та методи дослідження

2.1 Дизайн дослідження

У дослідженні використовується метод перехресного дослідження для збору загальних даних та інформації про синдром TCM пацієнтів іздефіцит ян селезінки та нирокі пацієнтів без дефіциту Ян селезінки та нирки після радикальної резекції раку II стадії (високого ризику)/III стадії раку товстої кишки; Технологія високопродуктивного секвенування 16s rDNA використовується для аналізу характеристик розподілу кишкової флори у пацієнтів із дефіцитом ян селезінки та нирки після радикальної резекції раку товстої кишки.

2.2 Джерело предметів

Пацієнти, які перенесли радикальну резекцію раку товстої кишки та були діагностовані як стадія II (високий ризик)/стадія та збиралися пройти першу ад’ювантну хіміотерапію в підрозділі, що виконує проект (лікарня Сіюань, Китайська академія медичних наук Китаю) та

у філіальних центрах з жовтня 2018 р. по грудень 2020 р. Станом на 31 грудня 2020 р. інформацію про випадок було введено в систему керування даними клінічних випробувань лікарських засобів (електричний збір даних, EDC) лікарні Сіюань Китайської академії медичних наук Китаю.

2.3 Етична інформація

Це дослідження було розглянуто та схвалено Комітетом з медичної етики підрозділу (номер схвалення: Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences 2018XLA048-2). Суб’єкти розуміли та були обізнані про зміст і план дослідження та добровільно підписали форму інформованої згоди на участь у цьому дослідженні.

2.4 Критерії діагностики захворювання

Діагноз раку товстої кишки відноситься до діагностичних критеріїв «Китайських загальних стандартів діагностики та лікування злоякісних пухлин» Департаменту медичного управління Міністерства охорони здоров’я Китайської Народної Республіки. Клінічне визначення стадії приймає міжнародно визнану систему визначення стадії TNM (Американський об’єднаний комітет з раку, AJCC, 8-е видання).

2.5 Критерії діагностики синдрому ТКМ

Діагностика синдрому TCM відноситься до ключової спеціальності Національного управління традиційної китайської медицини "Одинадцятий п'ятирічний план" - клінічна діагностика та план лікування ключових пухлинних захворювань. Поширеними типами синдрому колоректального раку є п’ять типів дефіциту: дисгармонія печінки та селезінки, дефіцит селезінки та застій ци, дефіцит ян між селезінкою та нирками, дефіцит інь печінки та нирок, а також дефіцит ци та крові [13], а саме:

(1) Синдром дисгармонії печінки та селезінки: розтягнення та біль у ребрах, здуття живота та втрата апетиту, депресія, рідкий стілець або біль у животі та м’який стілець, біль, що зменшується після діареї, та тягнучий пульс.

(2) Дефіцит селезінки та синдром застою ци: розтягнення та біль у шлунку та ребрах, відрижка, гикавка, кислотна відрижка, депресія, втрата апетиту, тонкий жовтий наліт на язиці та тягучий пульс.

(3) Дефіцит ян селезінки та нирок: страх холоду, холодні кінцівки, блідий колір обличчя, біль у спині, холодний біль у животі, хронічна діарея або нетравлення, або набряки та олігурія, блідий та жирний язик з білим та слизьким нальотом, глибокий та слабкий пульс.

(4) Дефіцит інь у печінці та нирках: запаморочення та шум у вухах, дратівливість, важка голова та легкі ноги, біль у спині, часті сновидіння та сперматорея, червоний язик з невеликим нальотом, тонкий та тонкий пульс.

(5) Дефіцит Ци та крові: втома, задишка та лінь, блідий або блідий колір обличчя, запаморочення, бліді губи та нігті, серцебиття та безсоння, несформований стілець або анальний пролапс, блідий язик та слабкий пульс.

2.6 Критерії включення та виключення

2.6.1 Критерії включення

(1) Пацієнти з чітким патологічним діагнозом раку товстої кишки; патологічні краї резекції негативні.

(2) TNM стадії III (високий ризик) і IIIIII.

(3) Пацієнти, які збираються отримати хіміотерапію CapeOX протягом 6 тижнів після радикальної резекції раку товстої кишки.

(4) Відсутність участі в інших терапевтичних клінічних дослідженнях протягом 30 днів до рандомізації.

(5) Вік 18-75 років, стать не обмежена; Оцінка ECOG становить 0-1; вагітні, жінки в період лактації та жінки дітородного віку не підлягають включенню. Жінки дітородного віку не мають права, якщо вони не мають адекватної контрацепції.

(6) Жодних злоякісних пухлин в інших частинах тіла не було (за винятком повністю вилікуваної карциноми шийки матки in situ, базально- або плоскоклітинної карциноми шкіри або інших пухлин, які були вилікувані хірургічним шляхом і не рецидивували принаймні 5 років років).

(7) Лабораторні дані: звичайний аналіз крові: WBC більше або дорівнює 3,5 × 109/л; NEUT Більше або дорівнює 1,5 × 109 / л; PLT Більше або дорівнює 100 × 109 / л; HGB Більше або дорівнює 90 г/л; функції печінки та нирок: TBIL менше або дорівнює 1,5 × ВМН; АСТ, АЛТ Менше або дорівнює 2,5 × ВМН; Scr Менше або дорівнює 1,5 × ВМН; CEA: 0-5.

(8) Підписана інформована згода.

(9) Диференціація синдрому ТКМ включає дефіцит ян селезінки та нирок, дисгармонію печінки та селезінки, дефіцит селезінки та застій ци, дефіцит інь печінки та нирок, а також дефіцит ци та крові. Дисгармонія печінки та селезінки, дефіцит селезінки та застій ци, дефіцит інь печінки та нирок, а також дефіцит ци та крові класифікуються як дефіцит ян без селезінки та нирок.

2.6.2 Критерії виключення

(1) Пацієнти, для яких дослідники або лікарі визначили, що не потребують хіміотерапії CapeOX.

(2) Пацієнти з тяжкими серцево-судинними ускладненнями, цереброваскулярними ускладненнями, активним гепатитом і тяжкою дисфункцією печінки та нирок.

(3) Будь-які нестабільні стани або стани, які можуть поставити під загрозу безпеку пацієнтів і їхню згоду з дослідженням, такі як шизофренія та інші важкі психічні захворювання.

(4) Пацієнти з колостомою.

2.7 Збір та тестування зразків

2.7.1 Збір зразків

Перед початком ад’ювантної хіміотерапії дослідники ознайомлять суб’єктів зі значенням дослідження, підпишуть форму інформованої згоди та роздадуть спеціальний набір для збору зразків калу MGIEasy. За 1-2 днів до початку першої ад’ювантної хіміотерапії суб’єкти відібрали зразки згідно з інструкціями щодо відбору зразків і вчасно передали зразки калу дослідникам.

Дослідники взяли зразки, перевірили та підтвердили імена суб’єктів, присвоїли зразкам номери та перевезли їх до Shanghai Meiji Biomedical Technology Co., Ltd. для тестування.

2.7.2 Процес секвенування 16s рДНК кишкової флори

(1) Екстракція ДНК і ПЛР-ампліфікація

① Використовуйте набір для ґрунту EZNAQ (Omega Bio-tek, Norcross, GA, US), щоб витягнути загальну ДНК; Електрофорез у NanoDrop2000 та 1% агарозному гелі використовували для визначення концентрації та чистоти ДНК та якості екстракції ДНК відповідно.

② Використовуйте праймери 338F (5'-ACTCTACGGGAGGCAGCAG-3') і 806R (5'- GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3') для ПЛР-ампліфікації варіабельної області V3-V4. Конкретна процедура така:

a. Попередня денатурація 95 градусів протягом 3 хвилин, 27 циклів (денатурація 95 градусів → відпал 55 градусів → розширення під кутом 72 градуси)

b. Розширення на 72 градуси протягом 10 хвилин (прилад ПЛР: ABI GeneAmpR9700).

Серед них система ампліфікації включає: 20 мкл, 4 мкл5*буфер FastPfu, 2 мкл 2,5 мМ dNTP, 0.8 мкл праймера (5 мкМ), 0,4 мкл полімерази FastPfu та 10 нг матриці ДНК .

(2) Секвенування Illumina Miseq

① Використовуйте 2% агарозний гель для відновлення продуктів ПЛР, використовуйте AxyPrep DNA Gel Extraction Kit (Axygen Biosciences, Юніон-Сіті, Каліфорнія, США) для очищення, елюції Tris-HC1 і 2% електрофорезного виявлення в агарозі;

② Використовуйте QuantiFluorTM-ST (Promega, США) для виявлення та кількісного визначення;

③ Зверніться до стандартних операційних процедур платформи Illumina MiSeq (Illumina, Сан-Дієго, США), щоб створити бібліотеку PE 2*300 очищених ампліфікованих фрагментів.

Етапи створення бібліотеки:

a. Підключіть «Y»-подібні перехідники;

b. Використовуйте магнітні кульки для екранування та видалення самозчеплених фрагментів адаптера;

в. Використовуйте ПЛР-ампліфікацію для збагачення шаблону бібліотеки; d. Денатуруйте гідроксидом натрію для отримання одноланцюгових фрагментів ДНК.

Використовуйте платформу Miseq PE300 від IIlumina для секвенування та завантажуйте необроблені дані в базу даних NCBI.

(3) Обробка даних

Початкову послідовність секвенування перевіряли за допомогою програмного забезпечення Trimmomatic і зрощували за допомогою програмного забезпечення FLASH таким чином:

① Встановіть вікно 50 bp. Якщо середнє значення якості у вікні менше 20, відріжте передню частину вікна.

Видаліть усі послідовності після основи, а потім видаліть послідовності довжиною менше 50 bp після контролю якості;

② З’єднайте послідовності на обох кінцях відповідно до накладених основ. Максимальний рівень невідповідності між перекриттями під час зрощування становить 0.2, а довжина має бути більшою за 10 bp.

③ Розділіть послідовності на кожен зразок відповідно до штрих-кодів і праймерів на обох кінцях послідовності. Використовуйте програмне забезпечення UPARSE (версія 7.1), щоб згрупувати послідовності в OTU (оперативні таксономічні одиниці) зі схожістю 97% [14] і видалити окремі послідовності та химери під час процесу кластеризації. Використовуйте RDPclassifier (http://rdp.cme.msu.edu/), щоб анотувати класифікацію видів для кожної послідовності.

2.8 Статистичний аналіз

(1) SPSS26.0 використовувався для статистичного аналізу базових даних. Кількісні дані виражали як середнє ± стандартне відхилення (x ± s). Для порівняння між групами використовували t-тест для нормально розподілених даних; для ненормально розподілених даних використовувався непараметричний тест; і тест хі-квадрат використовувався для підрахунку даних. П<0.05 was considered statistically significant.

(2) Біоінформаційний аналіз: Основна біотехнологічна хмарна платформа https://cloud.majorbio.com використовувалася для анотації та оцінки видів, аналізу видового складу, аналізу порівняння зразків, аналізу відмінностей видів тощо.

3 Результати

3.1 Основні відомості

A total of 32 subjects were included in the study for analysis, including 11 patients with spleen and kidney yang deficiency and 21 patients without spleen and kidney yang deficiency. The specific age, gender and primary site of the disease are shown in Tables 2-1, 2-2 and 2-3. There was no statistical difference between the two groups in terms of age, gender composition and distribution of primary sites of colon cancer (P> 0.05).

Таблиця 2-1 Віковий розподіл пацієнтів у двох групах (x±s) (роки)

3.2 Результати аналізу біоінформації

3.2.1 Аналіз альфа-різноманіття

Sobs index, ace index, chao index, shannon index, simpson index, etc. are commonly used measurement indicators of Alpha diversity. Among them, the first three are used to evaluate species richness (richness), the Shannon index evaluates species diversity (diversity), and the Simpson index is used to evaluate the evenness of species in the environment (evenness). This study used the Wilcoxon Rank Sum test to perform statistical analysis on the sobs index between groups. The results showed that there was no significant difference in species richness, diversity and evenness between spleen and kidney yang deficiency syndrome and non-spleen and kidney yang deficiency syndrome (P>0.05). (Таблиця 2-4, Малюнок 2-1)

Рисунок 2-1 Відмінності в індексі ридання між групами

(2) Аналіз складу спільноти між групами

На рівні групи кишкова флора пацієнтів із синдромом дефіциту селезінки та нирок включала: Bacteroidota 50.44%, Firmicutes 34.51%, Proteobacteria 10.81%, Actinobacteriota 1.51%, Verrucomicrobia 1.78%, інші 0.94%;

Кишкова флора пацієнтів без синдрому дефіциту селезінки та нирок включала: Bacteroidota 45,25%, Firmicutes 40,24%, Proteobacteria 7.86%, Actinobacteriota 3,05%, Verrucomicrobia 2,48%, інші 1,13%. Можна побачити, що на рівні типу бактеріальна флора як у групі синдрому дефіциту Янь селезінки та нирки, так і в групі синдрому дефіциту Янь не селезінки та нирки переважали Bacteroidetes та Firmicutes, що становило близько 85% від загальної кількості бактерій. . (Малюнок 2-3, Малюнок 2-4)

Малюнок 2-3 Гістограма рівня кишкової флори у двох групах пацієнтів

Рисунок 2-4 Кругова діаграма складу кишкової флори двох груп пацієнтів на рівні типу

На сімейному рівні було проаналізовано склад кишкової флори пацієнтів із синдромом дефіциту Ян селезінки та нирки (D) і без синдрому дефіциту Ян селезінки та нирки (N). До 5 найпопулярніших видів бактерій у групі синдрому дефіциту селезінки та нирок Янь належать: Bacteroidaceae 37,93%, Lachnospiraceae 12,13%, Ruminococcaceae 6,93%, Prevotellaceae 6,02%, Enterobacteriaceae 7,18%; 5 найпопулярніших видів бактерій у групі синдрому дефіциту Янь без селезінки та нирок включають: Bacteroidaceae 34,38%, Lachnospiraceae 19,27%, Ruminococcaceae 5,15%, Prevotellaceae 5,71%, Sutterellaceae 4,18%. (Малюнок 2-5, Малюнок 2-6)

Рисунок 2-5 Гістограма складу кишкової флори двох груп пацієнтів на рівні сім’ї

Рисунок 2-6 Кругова діаграма складу кишкової флори двох груп пацієнтів на рівні сім’ї

Рисунок 2-7 Аналіз NMDS двох груп спільнот на видовому рівні

3.2.4 Багаторівневий дискримінантний аналіз різниць видів Lefse

Для подальшого вивчення видів із відмінностями у кількості видів між групами Lefse (Linear

Дискримінантний аналіз (ефект розміру) аналіз може бути використаний для виявлення видових відмінностей між групами. Етапи аналізу Lefse такі:

(1) Використовуйте критерій суми рангів Крускала-Уолліса (KW), щоб виявити всі характерні види та отримати істотно відмінні види на основі відмінностей у чисельності видів між групами.

(2) Критерій суми рангів Вілкоксона використовується для подальшого тестування суттєво відмінних видів, отриманих на етапі (1), щоб визначити, чи всі підвиди сходяться до одного рівня класифікації.

(3) Використовуйте лінійний дискримінантний аналіз (LDA), щоб отримати кінцевий диференціальний вид.

Як показано на малюнках 2-8 і 2-9, Clostridia (o_Clostridia_UCG_014), Clostridiaceae (f_norank o Clostridia{ {6}}UCG_014), Clostridium (g_norank f norank o Clostridia_UCG_014), Flavobacteriales (o_Flavobacteriales), Flavobacteriaceae (f_Flavobacteriaceae), Flavobacteria (g_norank Flavobacteriaceac) тощо є групами бактерій із підвищеною чисельністю в кишечнику пацієнтів із синдромом дефіциту селезінки та нирок Ян. Ця флора може бути основною флорою, відповідальною за відмінності між пацієнтами з синдромом дефіциту Ян селезінка-нирка та пацієнтами без синдрому дефіциту Ян селезінка-нирка.

Малюнок 2-8 Багаторівневе дерево ієрархії видів LEfSe

Малюнок 2-9 дискримінантна гістограма LDA

4 Обговорення

Кишкова флора тісно пов’язана з імунітетом господаря [16,17] і засвоєнням поживних речовин [18,19]. Традиційна китайська медицина вважає, що «селезінка керує транспортуванням і трансформацією», «селезінка керує підйомом ясного» і «охоронцем є люта ци води та зерна». Функції селезінки охоплюють багато аспектів травлення, всмоктування, виділення та стійкості до зовнішніх патогенів. Тому селезінка і шлунок найбільш тісно пов’язані з кишковою флорою. При багатьох захворюваннях підтверджено кореляцію між синдромом дефіциту селезінки та патологічними продуктами, пов’язаними з дефіцитом селезінки, такими як сире тепло, холодна вогкість, помутніння мокротиння та ін., дисбактеріоз. 121-231; селезінкова земля тісно пов'язана з деревиною печінки. У книзі Хуан Юанью «Чотири джерела священного серця» сказано: «... Коли земля слабка і не може досягти деревини, ци деревини блокується...» В останні роки дослідження кореляції між синдромом пригнічення печінки та кишковою флорою є розвивається енергійно. 124251; є також відповідні звіти про взаємозв’язок між синдромом дефіциту нирок Ян1261 та кишковою флорою. Дослідженням кореляції між синдромом TCM і кишковою флорою приділяється все більше уваги. У цьому дослідженні об’єктами дослідження були пацієнти, які перенесли радикальну операцію з приводу раку товстої кишки та планували пройти післяопераційну ад’ювантну хіміотерапію. Пацієнти були розділені на дві групи: синдром дефіциту Янь селезінки та нирки та синдром дефіциту Янь селезінки та нирки, а також досліджувалися характеристики розподілу кишкової флори у пацієнтів із синдромом дефіциту Янь селезінки та нирки.

Результати показали, що не було статистичної різниці між пацієнтами з синдромом дефіциту Янь селезінки та нирки та синдромом дефіциту Янь селезінки та нирки за індексом SOBs, індексом АПФ, індексом Чао, індексом Шеннона, індексом Сімпсона тощо. Видове багатство , різноманітність та однорідність кишкової флори двох груп пацієнтів були в основному однаковими.

На рівні групи кишкова флора пацієнтів у групі синдрому дефіциту селезінки та нирки Ян і в групі без синдрому дефіциту селезінки та нирки Ян включала Bacteroidetes, Firmicutes, Proteobacteria, Actinobacteria тощо, які були близькі до домінуючої кишкової флори. здорових людей [27,28]. Однак існувала різниця у співвідношенні Firmicutes до Bacteroidetes (FBR), причому FBR групи синдрому дефіциту Ян селезінки та нирки становив 0.68, а FBR без селезінки та синдрому дефіциту Ян нирки група 0.89. Дослідження виявили, що зміни FBR пов’язані з ожирінням [29], гіпертонією [27], діабетом [30], синдромом подразненого кишечника [31] тощо. FBR може бути пов’язано із запальним станом організму. Різниця в FBR між групою синдрому дефіциту Ян селезінки та нирки та групою синдрому дефіциту Ян селезінки та нирки може вказувати на те, що організм має різні запальні стани.

На сімейному рівні домінуюча флора обох груп пацієнтів включала Bacteroidetes, Lachnospiraceae, Verrucomicrobiaceae і Prevotellaceae. Крім того, кількість бактерій Enterobacteriaceae у кишковому тракті пацієнтів із синдромом дефіциту Янь нирок та нирок була вищою, тоді як кількість бактерій Sutterellaceae у групі пацієнтів із синдромом дефіциту Янь нирок без селезінки та нирок була вищою. Enterobacteriaceae належать до типу Proteobacteria і широко представлені в організмі людини та різних тварин. У той же час Enterobacteriaceae можуть бути умовно-патогенними мікроорганізмами, а збільшення кількості бактерій у них може бути пов’язане з метаболічними захворюваннями, імунною дисфункцією та іншими захворюваннями [32,33]. Sutterellaceae також є умовно-патогенним мікроорганізмом [34]. У пацієнтів з аутизмом [35], синдромом подразненого кишечника [36] та діареєю [37] було значно збільшено кількість бактерій Sutterellaceae у кишечнику.

Крім того, багаторівневий аналіз різниць видів Lefse виявив, що велика кількість Flavobacterium і Clostridium у кишечнику пацієнтів із синдромом дефіциту селезінки та нирки Ян зросла, і різниця була статистично значущою. Flavobacterium переважно існує в природному середовищі і також є умовним збудником. Пацієнти зі зниженим імунітетом сприйнятливі до інфекції Flavobacterium [38]. Таким чином, це звичайна бактерія, яка викликає госпітальні інфекції [39]. Дослідження показали, що кількість бактерій Flavobacterium у кишечнику пацієнтів із синдромом подразненого кишечника зменшується. Clostridium бере участь у метаболізмі жовчних кислот у кишечнику [40]. Зміни його кількості можуть бути пов’язані з депресією [411], синдромом подразненого кишечника [42] та побічними реакціями на хіміотерапію [43].

5 Підсумок

(1) Після радикальної резекції раку товстої кишки немає суттєвої різниці в кількості кишкової флори між пацієнтами з синдромом дефіциту Ян селезінки та нирки та пацієнтами без синдрому дефіциту Ян селезінки та нирки.

(2) Можуть бути відмінності в кишковому FBR між пацієнтами з синдромом дефіциту селезінки та нирки Ян і пацієнтами без синдрому дефіциту селезінки та нирки Ян, і розмір вибірки потрібно додатково розширити для перевірки.

(3) На рівні відділень кількість бактерій Enterobacteriaceae у кишечнику пацієнтів із синдромом дефіциту селезінки та нирки Ян була вищою, тоді як кількість бактерій Enterobacteriaceae у групі без синдрому дефіциту селезінки та нирки Ян була вищою. Чисельність кишкових бактерій роду Flavobacterium і Clostridium була підвищена у пацієнтів із синдромом дефіциту селезінки та нирки Ян.

Попередні дослідження не виявили кореляції між Enterobacteriaceae, Sarteobacteriaceae, Flavobacterium і Clostridium і мієлосупресією; розмір вибірки, включеної в це дослідження, обмежений, і клінічний суб’єкт, на якому базується дослідження, ще не був розкритий. Неможливо оцінити, чи існує неминучий зв'язок між синдромом дефіциту ян селезінки та нирки та пригніченням кісткового мозку, викликаним ад'ювантною хіміотерапією. Взаємозв'язок між пригніченням кісткового мозку, синдромом дефіциту Янь селезінки та нирок і кишковою флорою ще належить виявити в наступних дослідженнях.

Список літератури

[1] Сюй Юлі. Зміни кишкової флори у пацієнтів із хронічним гепатитом В із синдромом вологості та тепла в селезінці та шлунку, депресією печінки та синдромом дефіциту селезінки та їх зв’язок із білками, пов’язаними з метилюванням [D]. Університет традиційної китайської медицини Ченду, 2019.

[2] Чен Юн. Кореляція між синдромом Інь-Ян гіпертензії та характеристиками кишкової флори [D]. Фуцзянський університет традиційної китайської медицини, 2019.

[3] Чжао Ціхан. Відмінності в кишковій флорі між діабетичною нефропатією з синдромом вологого тепла та синдромом невологого тепла [D]. Пекінський університет традиційної китайської медицини, 2020.

[4] Чан Бінлун. Відмінності кишкової флори у пацієнтів із синдромом вологості й тепла товстої кишки та синдромом дефіциту селезінки та нирки Ян при виразковому коліті [D]. Пекінський університет традиційної китайської медицини, 2020.

[5] Marzano M, Fosso B, Piancone E та ін. Порушення стовбурових клітин на інтерфейсі господаря-мікробіоти при колоректальному раку [J]. Раки (Базель), 2021, 13(5).

[6] Liu W, Zhang X, Xu H та ін. Гетерогенність мікробної спільноти в колоректальній неоплазії та її кореляція з колоректальним канцерогенезом [J]. Gastroenterology, 2021 [7] Heo G, Lee Y, Im E. Взаємодія між кишечником мікробіота та медіатори запалення у розвитку колоректального раку [J]. Cancers (Basel), 2021, 13 (4). [8] Wang C, Yang S, Gao L та ін. Carboxymethyl pachyman (cmp) зменшує кишковий мукозит і регулює кишкову мікрофлору в 5-фторурацил-оброблених мишах із пухлиною ct26[J].Food Funct, 2018 ,9(5):2695-2704. [9] Хенаро С. К., Ліма де Соуза Рейс Л. С., Рейс С. К. та ін. Пробіотичні добавки послаблюють агресивність хімічно індукованої колоректальної пухлини у щурів [J]. Life Sci, 2019, 237(116895. [10] Голкхалхалі Б, Раджандрам Р, Паліані А. С. та ін. Специфічний пробіотик (підготовка мікробних клітин) і омега-3 жирна кислота в модулюванні якості життя та маркерів запалення у пацієнтів з колоректальним раком: рандомізована контрольована