Ефекти лікування пародонту у пацієнтів з пародонтитом і нирковою недостатністю: пілотне дослідження Ⅰ
Jun 25, 2024
Анотація:Пародонтит іхронічні захворювання нирокобидвахронічні запальні захворюванняі поділіться деякими загальними факторами ризику. Це 3-місячне пілотне дослідження мало на меті з’ясувати, чи ефективна нехірургічна пародонтологія при клінічних, біохімічних і мікробіологічних станах у пацієнтів із пародонтитом і нирковою недостатністю.Ниркова недостатністьПацієнти з пародонтитом середнього та важкого ступеня були набрані з двох лікарень. Група лікування отримувала нехірургічну пародонтологічну терапію, а контрольна група отримувала лише інструктаж щодо гігієни порожнини рота. Оцінку результатів проводили через 1 і 3 місяці після лікування. Для аналізу даних на рівні пацієнта використовувалися непараметричні тести. Оцінки на рівні пародонту аналізували за t-критерієм Стьюдента та парним t-критерієм. Статистична значущість була встановлена на р-значенні < 0.05. Загалом 11 учасників завершили дослідження. Не було істотної різниці між групами щодо смертності від усіх причин,серцево-судинні події, події інфекції, системні параметри та біомаркери сироватки. Порівняно з контрольною групою клінічні пародонтальні параметри, рівень інтерлейкіну-1 (IL-1) ясенної ямкової рідини та пародонтальні патогени продемонстрували значне покращення в групі лікування. Нехірургічне пародонтальне лікування не змінило системних результатів у пацієнтів з нирковою недостатністю, але змінило місцеве мікрооточення.
НОВІ ТРАВИ ДЛЯПАРОДОНТИТ ТА ХРОНІЧНА ХВОРОБА НИРОК
Ключові слова: нехірургічне лікування пародонту; нирковий діаліз; ниркова недостатність
1. Вступ
Пародонтит – це хронічне запальне захворювання, яке спричиняє втрату тканин пародонту бактеріальною інфекцією [1]. Патогени пародонту, такі як Porphyromonas gingi valis (P. gingivalis), Treponema denticola (T. denticola) і Tannerella forsythia (T. forsythia), накопичуючись на поверхні зубів, можуть викликати не лише місцеву, але й системну запальну реакцію [2,3]. Викликання продукування системних прозапальних цитокінів, що походять з періодонтальної області, також може посилити тяжкість системних захворювань, включаючи серцево-судинні захворювання (ССЗ), діабет, хронічну хворобу нирок (ХНН), ревматоїдний артрит, хронічне обструктивне захворювання легень (ХОЗЛ) тощо. [4].
ХХН характеризується порушенням функції нирок і супутніми ускладненнями [5]. Термінальна стадія ниркової недостатності (ТНН), найважча форма ХХН, визначається як пацієнти з орієнтовною швидкістю клубочкової фільтрації (ШКФ) < 15 мл/хв на 1,73 м2 і потребою в регулярному діалізі [5,6]. Висока поширеність ХХН обтяжує фінансові витрати та систему охорони здоров’я на Тайвані та в усьому світі [7]. ХХН пов’язана зі стійким і хронічним системним запаленням, що підвищує ризик серцево-судинних захворювань, особливо у пацієнтів з діабетом [8]. Водночас ССЗ є найпоширенішою причиною смертності хворих на ХХН.
Протягом останнього десятиліття повідомлялося про зв’язок між пародонтитом і ХХН [9,10]. Обидва захворювання мають хронічні запальні характеристики та мають спільні фактори ризику [10]. Підвищення системних запальних цитокінів, таких як інтерлейкін-1 (IL-1 ), інтерлейкін-6 (IL-6), С-реактивний білок (CRP) і фактор некрозу пухлин- (TNF-), пов’язані з пародонтитом, були задокументовані попередніми дослідженнями [11,12]. Це може спричинити дисфункцію ендотелію судин і подальші серцево-судинні події [13,14]. Недавній консенсусний звіт свідчить про те, що пародонтальне лікування може зменшити системну запальну відповідь і частоту серцево-судинних подій [13].
Дотепер не було опубліковано обмежені рандомізовані контрольовані клінічні дослідження (РКД), які порівнювали результати у пацієнтів із ESRD після нехірургічного пародонтального лікування або без нього [15,16]. Досі існує велика невизначеність у зв’язку між втручанням пародонтиту та ризиком ускладнень ХХН. Тому в цьому дослідженні ми мали на меті дослідити клінічні, біохімічні та мікробіологічні ефекти нехірургічного лікування пародонту у пацієнтів з пародонтитом і ESRD.
2. Матеріали та методи
2.1. Дизайн дослідження
Це 3-місячне пілотне дослідження, проведене в лікарні Тайбейського медичного університету (TMUH) і лікарні Шуанг-Хо (TMU-SHH), афілійованій з TMU, з вересня 2017 року по грудень 2019 року. Для розподілу учасників було досягнуто рандомізації за комп’ютерним списком. Лише клініцисти та члени дослідницького персоналу знали про розподіл груп, тобто групу лікування чи контрольну групу. Етичне схвалення було отримано від TMU-JIRB Медичного університету Тайбея (N201604007). Дослідження проводилося відповідно до Гельсінської декларації відповідно до вказівок CONSORT.
2.2. Пародонтолог Учасники
У якості попереднього дослідження всі пацієнти на гемодіалізі, які були добре поінформовані та підписали свою інформовану згоду у відділенні гемодіалізу двох лікарень, були направлені на стоматологічний скринінг для визначення відповідності вимогам. Критерії включення були такі: підтримковий гемодіаліз тричі на тиждень протягом щонайменше 3 місяців [17]; у віці 20 і більше 20 років; не менше 5 природних зубів, які можна зняти; та генералізований помірний або тяжкий пародонтит відповідно до критеріїв AAP/CDC [18]. Критеріями виключення були: активна інфекція під час лікування антибіотиками протягом останніх 4 тижнів для запобігання впливу антибіотиків на вихідний стан [19]; неможливо отримати лікування зубів або завершити весь курс дослідження. Пацієнти з іншими системними захворюваннями, такими як діабет або серцево-судинні захворювання, не були виключені з цього дослідження. Ми зібрали демографічну та медичну інформацію з електронних записів у двох лікарнях. Медична інформація включала початковий рівень артеріального тиску, індекс маси тіла (ІМТ), тривалість діалізу, минулу історію хвороби, паління та лабораторні результати.
2.3. Пародонтологічний огляд
Учасники пройшли повне пародонтальне обстеження на початку та через 3 місяці. Додаткове пародонтальне обстеження в групі лікування було проведено через 4-6 тижнів після лікування. Були зібрані наступні 5 пародонтальних параметрів: індекс зубного нальоту, глибина зондування пародонту (PD), глибина рецесії ясен (REC), клінічна втрата прикріплення (CAL) і кровотеча під час зондування (BOP). Було зареєстровано шість точок вимірювання зубного нальоту, PD, REC, CAL і BOP. Пародонтальний зонд (PQ-W, Hu-Friedy, Чикаго, Іллінойс, США) використовувався для пародонтального обстеження двома досвідченими пародонтологами.
2.4. Пародонтальне втручання
Суб’єкти в обох групах отримували збір даних та інструктаж щодо гігієни порожнини рота на початку та через 3 місяці. Амоксицилін (2 г) для профілактики інфекцій призначали перед оглядом пародонта та призначенням лікування [20]. У групі лікування суб’єкти отримували стандартну нехірургічну пародонтологічну терапію для видалення над’ясенної та під’ясенної біоплівки та зубного каменю сертифікованими пародонтологами. Повторну оцінку стану пародонту проводили через 4-6 тижнів після лікування. У спробі викорінити або зменшити рівень етіопатогенних бактерій у глибоких кишенях, що залишилися, було проведено підясене введення міноциклінового гелю (Sun Star, Осака, Японія) у місцях глибини пародонтальних кишень, що залишалася більше або дорівнює 5 мм [21].
2.5. Біохімічне обстеження
Відібрано зразки крові для біохімічного аналізу. Запальні біомаркери, включаючи високочутливий CRP (hs-CRP), TNF-, IL-1, IL-6 та пентраксин 3 (PTX3) у сироватці крові та ясенній кревикулярній рідині (GCF) вимірювали на початковому рівні та 3-місячні відвідування [22,23]. Зразки GCF збирали за допомогою смужок Periopaper (HARCO Electronics, Irvine, CA, США) з найглибшої пародонтальної кишені. Згідно з методикою наших попередніх досліджень [24], перед відбором досліджувану ділянку висушували на повітрі та ізолювали марлею. Першу паперову смужку вставляли в ясенну кишеню на 1 мм під ясенем на 5 секунд і негайно викидали, щоб уникнути забруднення слиною. Другу паперову смужку вставляли у вибране місце ще на 30 секунд. Паперову смужку, що залишилася, занурили в контейнер із сольовим розчином із фосфатним буфером 200- мкл і зберігали при –80 ◦C. Звичайні біохімічні аналізи крові аналізувала центральна лабораторія в лікарні. Рівні цитокінів аналізували методом ELISA з використанням комерційно доступних наборів (R&D Systems, Міннеаполіс, Міннесота, США).
2.6. Мікробіологічний аналіз
Зразки під’ясенної біоплівки брали з 3 найглибших ділянок пародонту за допомогою стерильної пародонтальної кюретки на початковому етапі та 3-місячних візитах для обох груп. Зразки підясневої біоплівки потім суспендували в буфері TE, перемішували та обробляли ультразвуком. ДНК була виділена із зразків підясневої біоплівки. Зразки підясневої біоплівки змішували з буфером RDD і бензоназою та інкубували при 37 ◦C протягом 30 хвилин, потім розщеплювали протеїназою K та інкубували протягом 30 хвилин при 56 ◦C [25,26]. Потім їх гомогенізували в буфері для лізису. Очищення ДНК проводили за допомогою QIAamp DNA Microbiome Kit (Qiagen) відповідно до інструкцій виробника. Далі ампліфікацію гена 16S рРНК і конструювання бібліотеки виконували згідно з протоколами, наданими Illumina. Набір Nextera XT Index використовувався для додавання адаптерів секвенування Illumina та штрих-кодів із подвійним індексом до мішеней ампліконів. Кількісну оцінку та якість бібліотек секвенування перевіряли за допомогою аналізатора QSep100 (BiOptic Inc., Новий Тайбей, Тайвань). Нарешті, бібліотеки були нормалізовані та об’єднані в еквімолярному співвідношенні та секвеновані за допомогою платформи Illumina Miseq з хімією V3.
2.7. 16. Аналіз послідовності генів S рРНК
Попередня обробка необроблених зчитувань включає видалення універсальних праймерів і низькоякісних баз за допомогою cutadapt (v1.18) [27]. Потім парні зчитування були оброблені та проаналізовані за допомогою робочого процесу DADA2/phyloseq у середовищі R. Призначення таксономії виявлених варіантів послідовності ампліконів (ASV) було виконано з використанням довідкової бази даних SILVA (v132) з мінімальною впевненістю початкового завантаження 80 [28]. Множинне вирівнювання послідовностей ASV було виконано за допомогою DECIPHER (v2.8.1), а філогенетичне дерево було побудовано за допомогою RAxML (v8.2.11) [29,30]. Таблиця частот, таксономія та інформація про філогенетичне дерево були використані для створення об’єкта phyloseq для аналізу бактеріального співтовариства нижче за течією за допомогою phyloseq (v1.24.2) [31]. Індекси різноманіття були розраховані за допомогою оцінки функції багатства з пакету phyloseq. R-пакет GUniFrac використовувався для розрахунку різних версій відстаней UniFrac шляхом визначення спільнотних відмінностей між групами (-diversity) [32]. Аналіз збагачення мікробіоти проводили за допомогою методу розміру ефекту лінійного дискримінантного аналізу (LDA) і візуалізували у вигляді кладограми за допомогою GraPhlAn [33,34].
Нашими основними результатами були смертність від усіх причин, серцево-судинні (СС) події та інфекційні події. Попередньо визначені вторинні результати включали гемоглобін A1c (HbA1c), серцеву функцію та оцінку периферичних судин. Крім того, були зібрані пародонтальні параметри, запальні біомаркери сироватки/GCF та підясенні мікроби.
