Фенілетаноїдні глікозиди цистанхе на моделі менопаузального синдрому у мишей

Контакти:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ShuoTian, ​​Mingsan Miao, MingBai, Zhenzhen Wei

Факультет фармакології Хенанського університету китайської медицини, Чженчжоу 450008, Китай. Доступно онлайн 10 травня 2017 р.

Анотація

Цистанхе - це традиційна та дорогоцінна китайська трава, яка має двохтисячолітню історію використання в Китаї. Він тонізує нирки, є сильним доповненням до печінки та нирок, а також відновлює есенцію та кров, відомий як «женьшень пустелі». Тут ми дослідили механізмФенілетаноїдні глікозиди цистанхеї(PGC) до моделі мишейклімактеричний синдром, а також терапевтичний ефект і характеристики ПГК доклімактеричний синдром. У цьому дослідженні миші КМ були відтворені шляхом повної резекції яєчників з обох боків спини, щоб створити модель мишейклімактеричний синдром(MPS), і отримували дистильовану воду або препарати відповідно. Модельні миші отримували дистильовану воду. Миші отримували високі дози 200 мг/(кг на день).Фенілетаноїдні глікозиди цистанхеї(HPGC), 100 мг/(кг добу) середні дозиФенілетаноїдні глікозиди цистанхеї(MPGC), і 50 мг/(кг день) низькі дозиФенілетаноїдні глікозиди цистанхеї(LPGC). Через 21 день він міг визначити кількість незалежних дій і кількість стоянь, латентний період першого входу в темну кімнату та електричне число. Також розраховували вісцеральний індекс матки, тимуса, селезінки, вимірювали рівні естрадіолу (Е2), тестостерону (Т), лютеїнізуючого гормону (ЛГ) і фолікулостимулюючого гормону (ФСГ) у сироватці крові. Крім того, він спостерігав патологічні зміни матки, тимуса, селезінки та гіпофіза мишей. Результати показали, що поведінкові показники: Порівняно з модельною групою (MG), HPGC, MPGC, LPGC могли збільшити незалежну діяльність (P < 0.01);="" hpgc,="" mpgc="" можуть="" збільшити="" кількість="" стоянь,="" латентний="" період="" першого="" входу="" в="" темну="" кімнату="" та="" зменшити="" електричне="" число="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" може="" збільшити="" кількість="" стоячих="" (p="">< 0.05);="" індекс="" внутрішніх="" органів:="" порівняно="" з="" mg,="" hpgc,="" mpgc="" може="" збільшити="" індекс="" внутрішніх="" органів="" матки,="" тимуса,="" селезінки="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" міг="" збільшити="" індекс="" внутрішніх="" органів="" матки="" (p=""><0,05); сироватковий="" індекс:="" у="" порівнянні="" з="" mg,="" усі="" групи="" могли="" знизити="" рівень="" лг="" у="" сироватці="" (p=""><0,01); hpgc,="" mpgc="" можуть="" покращити="" рівні="" e2,="" t="" і="" знизити="" рівні="" lh,="" fsh="" у="" сироватці="" (p=""><0,01); lpgc="" може="" підвищити="" рівень="" e2="" і="" знизити="" рівень="" fsh="" у="" сироватці="" крові="" (p=""><0,05). у="" той="" же="" час="" спостерігалася="" тенденція="" до="" підвищення="" рівня="" т="" в="" сироватці="" крові.="" патологічні="" зміни:="" порівняно="" з="" mg,="" hpgc="" може="" значно="" покращити="" патологічні="" зміни="" матки,="" тимуса,="" селезінки="" та="" гіпофіза="" мишей;="" певний="" вплив="" мають="" і="" інші="" групи.="" результати="" показали,="" що="" pgc="" може="" покращити="" розлад="" статевих="" гормонів="" mps="" і="" відновити="" функцію="" матки,="" тимуса="" та="" селезінки="" з="" кращим="" терапевтичним="" ефектом="" на="">

Графічний анотація

Ключові слова: PGC;Клімактеричний синдром; миші

Скорочення

MPSклімактеричний синдромPGCПоліетиленглікозиди цистанхиHPG Високі дозиФенілетаноїдні глікозиди цистанхеїMPGCсередні дози фенілетаноїдних глікозидів CistancheLPGCнизькі дозиФенілетаноїдні глікозиди цистанхеїTтестостеронE2ЕстрадіолLHлютеїнізуючі гормони фолікулостимулюючий гормон

Фенілетаноїдні глікозиди Cistanche на менопаузальний синдром

1. Введення

Цистанхе, висушені м’ясисті стебла з лускатим листям Cistanche deserticola YC Ma та C. tubulosa (Schrenk) Wight (Chen та ін., 2013), є відомим лікарським засобом, який широко використовується протягом тисяч років. Він походить від «Трав’яної класики Шень Нонга» (Liu et al., 2013), солоний на смак і теплий за своєю природою. Він має ефект тонізування нирок, сильних добавок до печінки та нирок, поповнення есенції та крові, зволоження кишечника для полегшення запорів та іншу ефективність. Він в основному використовується для лікування дефіциту нирок-ян (що призводить до імпотенції), проспермії, холодної сперми та безпліддя внаслідок холоду в матці, запорів, енурезу, частого сечовипускання та інших захворювань. Сучасні дослідження показують, що він може підвищити людський імунітет, пам’ять і здатність до навчання за допомогою антистаріння, протизапального ефекту, проти втоми та інших ефектів (Li et al., 2010, Rashid et al., 2017).

МПС – синдром дисфункції вегетативної нервової системи, спричинений порушенням секреції естрогенів і супроводжується нервово-психічними симптомами. Він має різні ступені припливів, дратівливості, запаморочення, шуму у вухах, серцебиття, безсоння тощо з видимим остеопорозом, втратою пам’яті, когнітивними порушеннями, серцево-судинними та цереброваскулярними захворюваннями у пізньому періоді. Основною причиною є поступове зниження та зникнення функції яєчників (Ia, 2016). В даний час основне використання замісної гормональної терапії (ЗГТ) для лікування MPS, прямі добавки естрогену, довгострокова ЗГТ може спричинити вагінальну кровотечу, чутливість грудей, рак ендометрія, рак молочної залози та інші побічні ефекти. Крім того, ефект ще не викликає задоволення — доза естрогену на імунну систему все ще має пригнічений ефект (Ma та ін., 2016, Nawaz та ін., 2017). Особливо нещодавнє відкриття показує, що це може збільшити ризик серцево-судинних і цереброваскулярних захворювань та інших серйозних побічних ефектів, що значно обмежує клінічне застосування. Через нагальний ринковий попит традиційна китайська (ТКМ) медицина приділяє все більше уваги пошуку препаратів для лікування MPS (Halim and Phang, 2017, Mustafa et al., 2017). TCM лікує MPS з довгою історією (Zhang and Miao, 2011), регулюючи вісь гіпоталамус-гіпофіз-яєчники (HPOA), відновлення функції яєчників і затримку старіння яєчників. Встановлено, що більшість препаратів ниркового ян мають кращий терапевтичний ефект на MPS (Wei and Miao, 2013).

Цистанхеє найвищою частотою препаратів, що поповнюють нирковий ян за минулі династії (Tu et al., 2011). Основні ефективні компонентиЦистанхеє фенілетаноїдними глікозидами з андрогенною дією. Це втілення сучасної медицини нирок ян (Zhao and Pan, 2013), з найвищою кількістю активних інгредієнтів у Cistanche (Yan et al., 2012). Це в основному через два способи функціонування (Wumaierjiang and Yao, 2016). По-перше, він має функцію зміцнення функції гіпоталамуса-гіпофіза-надниркових залоз і сприяє вивільненню нейромедіаторів і гормонів в організмі; по-друге, він має функцію боротьби з втомою, покращуючи роботу організму. Ефект цистанхеї, що відновлює нирки, відрізняється від загальних препаратів для нирок, таких як Epimedium brevicornum Maxim, Morinda officinalis How.Цистанхене шкодить інь, але поповнює нирки. Він не проявляється при справедливості, сухості в роті та інших симптомах при тривалому застосуванні.

2. Матеріал і методи

2.1. Матеріал і реактиви

Цистанхе(Партія № 20130501) було придбано в компанії Anhui, Dechang Pharmaceutical Pieces Co., Ltd. Зразки були ідентифіковані професором Чень Суйціном (Хенаньський університет китайської медицини, ідентифікація китайської лікарської дисципліни) як висушені м’ясисті стебла з лускатим листямЦистанхеdeserticolaY. C. Ma, а також висушені м’ясисті стебла з лускатим листям C. tubulosa (Schrenk) Wight відповідно. GC (партія № 120303) був поставлений компанією Shanxi star Pharmaceutical Co., Ltd.; Референтну речовину ехінакозид (№ партії.111670-200503) було поставлено Національним інститутом контролю фармацевтичних і біологічних продуктів; Макропориста абсорбуюча смола AB-8 (партія № 20130618) була поставлена ​​Тяньцзіньським Гуанфу Інституту надтонкої хімічної промисловості; Натрій карбоксиметилцелюлоза (партія № 20120418, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Co., Ltd.), бензилпеніцилін натрію для ін’єкцій (партія № c1206807, North China Pharmaceutical Co., Ltd., специфікація: 4 мільйони одиниць), 0,9% натрію Хлорид для ін’єкцій (партія № 1301265303, Chen Xin Pharmaceutical Co., Ltd; характеристики: 250 мл), хлоралгідрат (партія № 20120827, Тяньцзінський інститут тонкої хімічної промисловості), набір для аналізу E2 ELISA (партія № 20131001A, R&D Systems) Китай), набір для аналізу T ELISA (партія № 20131001A, R&D Systems Китай), набір для аналізу LH ELISA (партія № 20131001A, R&D Systems Китай), набір для аналізу FSH ELISA (партія № 20131001A, R&D Systems Китай).

2.2. Пробопідготовка

2.2.1. Способи приготування

Процедура підготовки зразка була наступною: за літературними методами (Gu et al., 2011) ми були під керівництвом Feng Suxiang (дисципліна курсу фармацевтичного аналізу, Хенанський університет китайської медицини). TheЦистанхеподрібнених до шроту, методами дефлегмації екстрагувати 2 рази кількістю етилового спирту (вміст етилового спирту 70%). Час екстрагування із зворотним холодильником становив 1,5 години на один раз, а потім 2 рази об'єднували спиртову екстракційну рідину. Екстракційну рідину декомпресували та збагачували без спиртового аромату, а дистильовану воду використовували для диспергування (концентрація 0,5 г/мл, як розчин зразка. Розчин зразка встановлювали в смолу AB-8 з потоком (співвідношення розчину зразка до смоли становило 1:10), після витримування протягом 5 годин до повної адсорбції розчину зразка. Потім, спочатку 10-кратним об’ємом колонки дистильованою водою, щоб промити АВ{{12} } смоли з розчином зразка, він був залишений у воді; По-друге, з 10-кратним об’ємом колонки етилового спирту (вміст етилового спирту становить 10 відсотків) домішки були видалені; По-третє, з 7-кратним об’ємом колонки об’єм колонки етилового спирту (вміст етилового спирту становив 60 відсотків) до елюювання, ми зібрали елюат і висушили елюат, тобто порошокФенілетаноїдні глікозиди цистанхеї.

Фенілетаноїдні глікозиди Cistanche на менопаузальний синдром

2.2.2. Вибір визначальної довжини хвилі

Виберіть {{0}}.5 мл розчину контрольного продукту та додайте 5% розчин нітриту натрію 1 мл до контрольного продукту. Потім струсіть і поставте в спокійне місце на 6 хвилин. Після цього додайте до вищевказаної суміші 10-процентний розчин нітрату алюмінію. Потім струсіть і поставте в спокійне місце на 6 хвилин. Додайте 10% гідроксиду натрію 10 мл до вищевказаної суміші, об’єм суміші довели до 25 мл водою. Струсніть і поставте в спокійне місце на 18 хв, як контрольний розчин продукту. Виберіть 0,5 млФенілетаноїдні глікозиди цистанхеїрішення, як наведена вище конфігурація методу, як тестове рішення. Пустий зразок був порожнім розчином, за винятком розчину контрольного продукту та розчину зразка, як у наведеній вище конфігурації методу. В УФ-спектрофотометрі з діапазоном довжин хвиль 200–800 нм повна довжина хвилі використовувалася для сканування вищевказаних 3 розчинів. Розчин контрольного продукту та розчин зразка мали максимальний пік поглинання при 507 нм, тому довжину хвилі 507 нм було визначено як довжину хвилі поглинання.

ПісляФенілетаноїдні глікозиди цистанхеїрозчину (1) та еталонної речовини ехінакозиду (2) (суперпозиційний контраст), з’явився колір (див. наступний малюнок)

2.2.3. Метод виявлення контенту

Точні зважте 1 мл, очікуючи визначення розчину, додайте 1 мл 5% розчину нітриту натрію до контрольного продукту, струсіть і поставте в спокійне місце на 6 хвилин. А потім до вищевказаної суміші додайте 10-процентний розчин нітрату алюмінію. Струсіть і спокійно поставте на 6 хв. Додайте 10 мл 10% гідроксиду натрію до вищевказаної суміші, і об’єм суміші довели до 25 мл водою. Струсніть і поставте в спокійне місце на 18 хвилин; холостий розчин готували таким же методом з холостим зразком без розчину зразка. При УФ спектрофотометрії визначати при спектрофотометрії 507 нм.

2.2.4. Перевірка методології

2.2.4.1. Приготування контрольного розчину та розчину проби

Приготування контрольного розчину: точне зважування 3.06 мг ехінакозиду з висушуванням до постійної маси в якості еталонної речовини та поміщення в мірну колбу на 25 мл. Потім використовуйте 70-відсотковий розчин етанолу, розведений до шкали, і збовтайте суміш як контрольний розчин. Вміст контрольного розчину становив 0,1224 мг/мл.

Приготування розчину зразка: точна вага 5 мгФенілетаноїдні глікозиди цистанхеїі помістити в мірну колбу на 10 мл. Потім використовуйте 70-відсотковий розчин етанолу, розведений до шкали, і збовтайте суміш як розчин зразка.

2.2.4.2. Підготовка стандартної кривої

Точно намалюйте контрольний розчин {{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10 }}, 5.0 і 6,0 мл, відповідно до «Вибору визначальної довжини хвилі», і виміряли абсорбцію. Рівняння регресії було отримано за допомогою співвідношення концентрації до абсорбції: Y=20.296X − 0.0015 (r=0.9994), а лінійний діапазон становив 4.90–29.4 мкг/мл.

2.2.4.3. Тест на точність

Паралельно 6 разів визначали абсорбцію розчину зразка згідно пункту «Метод визначення вмісту». Після обчислення відносного стандартного відхилення поглинання оптична щільність становила 0.299, 0.299, 0.298, 0.297, 0 0,297 і 0.297, а середнє поглинання становило 0.298, з RSD=0.330 відсотків (n=6).

2.2.4.4. Тест на стабільність

Визначте абсорбцію розчину зразка після того, як розчин був повністю забарвлений протягом {{0}}, 15, 30, 50 і 60 хвилин відповідно до пункт «Метод виявлення контенту». Після розрахунку відносного стандартного відхилення абсорбції абсорбція становила 0.300, 0.296, 0.295 та 0.295, а середня абсорбція становила 0.299, з RSD=1.362 відсотка (n {{17 }}).

Фенілетаноїдні глікозиди Cistanche на менопаузальний синдром

2.2.4.5. Повторне тестування

Приготуйте 6 розчинів проби відповідно до пункту «Приготування розчину проби» та розрахуйте абсорбцію та вміст відповідно до пункту «Метод визначення вмісту». Вміст становив 65,2 відсотка, 65,6 відсотка, 66,7 відсотка, 67,2 відсотка та 66,5 відсотка відповідно, а середній вміст становив 66,2 відсотка, з RSD=1.142 відсотка (n=6).

2.2.4.6. Тест на швидкість відновлення вибірки

Точність зваження 9 шматочків зразка розчину, щоб вміст був відомий, і кожен шматочок був 0.5 мл. Додайте 200, 250 і 300 мкл стандартного розчину в розчин зразка відповідно. Обчисліть коефіцієнт відновлення та відносне стандартне відхиленняФенілетаноїдні глікозиди цистанхеї, а коефіцієнти відновлення становили 101,45 відсотка , 99,26 відсотка , 98,94 відсотка , 101,83 відсотка , 99,05 відсотка , 99,47 відсотка , 98,72 відсотка , 99,17 відсотка та 100,64 відсотка . Середній рівень відновлення склав 99,84 відсотка, з RSD=1.164 відсотка (n=9).

2.2.5. Визначення вмісту проби

Приготуйте 3 розчини зразків відповідно до пункту «Приготування розчину зразків». Потім розраховують абсорбцію за пунктом «Метод визначення вмісту» при спектрофотометрії 507 нм і розраховують вміст. Таблиця 1 показує результати.

Таблиця 1. РезультатФенілетаноїдні глікозиди цистанхеївміст.

2.3. Піддослідні тварини

Самки мишей КМ (20–25 г) були придбані в Уханьському інституті біологічних продуктів. Номер дозволу на тварин: 42000400000611, сертифікат лабораторії № SYXK (Хенань) 2010-001.

2.4. Експериментальний інструмент

Високошвидкісна настільна центрифуга, Шанхайська фабрика наукових приладів Anting, модель: TGL-168; Ваги електронні аналітичні, Ohaus (Шанхай), модель: AR1140/C; Прилад для тестування вегетативної діяльності мишей, Chengdu Taming Science and Technology Limited Company, модель: ZZ-6; Mouse dark instrument, Chengdu Taming Technology Co., Ltd., модель: BA-200; Enzyme mark instrument, США BIO-RAD, модель: 680; Електричний мікроскоп японської компанії OLYMPUS, модель: BX61.

2.5. Експериментальна модель тварин

100 мишей КМ (23–25 г) зважували та внутрішньоочеревинно вводили 10% гідрату хлоральдегіду (0,03 мл/10 г), черевну фіксацію після анестезії. 12 мишей були випадковим чином обрані як контрольна група (BC) з фіктивною операцією; інші були проведені за допомогою моделі MPS. Під задньою частиною останнього ребра миші зріжте волосся на перетині середньої пахвової лінії та на відстані приблизно 1 см від бічної ості. Після дезінфекції, розкривши шкіру та м’яз спини приблизно на 0,5–1 см, ми виявили молочно-білу жирову масу в полі зору розрізу, а яєчник був закладений у жир. Обережно витягніть пінцетом жир із розрізу та відокремте жир, можна виявити тонку нитку неправильної жовто-червоної форми. Спочатку яєчники під матковою трубою (включаючи жир) перев'язали тонким дротом, а потім видаляли яєчники. Після операції матку знову ввели в черевну порожнину. Зшивають м'язи і шкіру, таким же методом видаляють двосторонні яєчники. Ретельне годування після операції, внутрішньом'язове введення пеніциліну 200 тис. ОД/кг, при зараженні 1 раз на добу протягом 3 днів. Після операції протягом 5 днів вагінальні мазки мишей досліджували один раз на день протягом 5 днів, щоб визначити, чи повністю видалено яєчники.

2.6. Експериментальне групування

Миші мали період тічки після того, як вагінальні мазки були скасовані, і 72 миші з повною кастрацією були випадковим чином розділені на п’ять груп (n=12 на групу), а саме модельну групу (MG), GC, HPGC, MPGC та LPGC.

2.7. Спосіб дозування

{{0}}.5% CMC: натрієва сіль карбоксиметилцелюлоза 4 г, дистильована вода 800 мл. Доза препарату HPGC, MPGC і LPGC становила 200, 100 і 50 мг/кг відповідно (об’єм дозування: 0,1 мл/10 г). Зважують PGC 2000 мг, 1000 мг і 500 мг, розчинені невеликою кількістю 0,5% CMC. Потім довести об'єм до 100 мл і перемішати суспензію. Доза препарату GC становила 675 мг/кг, з 9 таблетками GC, розчиненими з невеликою кількістю 0,5% CMC. Потім встановлюють об'єм до 40 мл і перемішують суспензію.

2.8. Введення препарату

Тваринам кожної групи на 10-й день після операції вводили відповідні препарати. Групі GC вводили суспензію GC у дозі 675 мг/кг, а групам HPGC, MPGC і LPGC вводили суспензію HPGC, MPGC, LPGC у дозі 200 мг/кг, 100 мг/кг і 50 мг/кг. Групам BC і MG вводили однаковий об’єм 0,5% розчину CMC один раз на день протягом 21 дня.

2.9. Визначення самостійної діяльності та кількості стояння

Мишей у кожній групі, яким вводили протягом 18 днів, поміщали в інструмент незалежної активності, адаптували до середовища протягом 1 хв. Потім визначають кількість самостійних дій і стояння протягом 5 хв.

2.10. Визначення латентного періоду першого входу в темну кімнату та електричного числа

Мишам у кожній групі вводили протягом 19 днів, повертаючи мишачий хвіст обличчям до маленьких дверей, які ведуть у темну кімнату в ящик для визначення. Через 24 години (введення протягом 20 днів) визначте латентний період першого входу в темну кімнату та електричне число протягом 5 хвилин.

2.11. Розрахунок вісцерального індексу

Мишам після останнього введення через 2 год (натщесерце протягом 12 год). Після взяття крові мишей умертвляли і розсікали. Видаліть тимус, селезінку та матку та зважте сиру вагу органу. Потім обчисліть індекс нутрощів (індекс нутрощів=волога маса органу, мг/маса тіла, г).

2.12. Вимірювання вмісту Е2, Т, ЛГ, ФСГ

Мишей після останнього введення протягом 2 годин (натщесерце протягом 12 годин) зважували, а потім брали кров. Відокремте сироватку та визначте вміст Е2, Т, ЛГ та ФСГ у сироватці як специфікацію.

2.13. Спостереження за морфологічними змінами матки

Відповідно до змін у дослідних мишей ендометрію, залоз і м’язового шару використовували напівкількісні критерії для вимірювання матки. Морфологію патологічної організації можна розділити на чотири рівні: рівень «−» означав, що епітеліальні клітини ендометрію, залози та м’язовий шар були нормальними; рівень «плюс» невелика частина епітеліальних клітин ендометрію і залоз були атрофовані, а м'язовий шар був нормальним; рівень «плюс плюс» означав, що частина епітеліальних клітин і залоз ендометрію атрофована, а м’язовий шар трохи атрофований; рівень «плюс плюс плюс» означав, що епітеліальні клітини та залози ендометрію значно атрофувалися, а м’язовий шар атрофувався.

2.14. Вимірювання товщини кори тимуса

Середню товщину кори тимуса вимірювали мікрометром у мишей.

2.15. Вимірювання товщини селезінкового вузла

Товщину селезінкового вузлика з обох сторін вимірювали мікрометром із центральною артерією як центром. Потім обчисліть середнє значення як товщину селезінкового вузла.

2.16. Підрахунок кількості базофільних клітин і передньої частки гіпофіза

Обчисліть кількість базофільних клітин і клітин передньої долі гіпофіза в площі 10,000 мкм2 квадратних прямокутних рамок під великим полем зору.

2.17. Статистичний аналіз

Усі дані були проаналізовані за допомогою статистичного пакету SPSS 17.0 для статистичного аналізу медичних даних. Дані вимірювання використовували як додавання та віднімання середнього стандартного відхилення. (^-x± s). Групи порівнювали за допомогою однофакторного дисперсійного аналізу (ANOVA), а для однорідності дисперсії використовували методи аналізу LSD, неоднорідності дисперсії використовували Games-Howell, а дату для даних оцінки використовували тест Ridit .

3. Результати

3.1. Вплив самостійної діяльності та кількості стояння у мишей

На рис. 1, рис. 2 наведено дані самостійної діяльності та кількість стояння. Це демонструє, що миші MG надзвичайно зменшені порівняно з BC (P < 0.01),="" що="" відображає="" цікавість="" до="" свіжого="" середовища.="" миші="" в="" gc,="" hpgc,="" mpgc="" і="" lpgc="" можуть="" значно="" покращити="" незалежну="" діяльність="" порівняно="" з="" mg="" (p="">< 0.01);="" ті,="" хто="" в="" gc,="" hpgc="" і="" mpgc="" можуть="" покращити="" незалежну="" діяльність="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><0,01); ті,="" хто="" в="" lpgc,="" можуть="" трохи="" покращити="" кількість="" стоянь="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><>

Рис. 1. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на незалежну діяльність у мишей. Незалежні дії записуються як середнє ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

Рис. 2. Вплив GC, HPGC, MPGC і LPGC на кількість стоянь у мишей. Кількість стоянь записується як середнє ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

3.2. Вплив латентного періоду першого входу в темну кімнату та електричного номера

Як показано на рис. 3, рис. 4, дані латентного періоду першого входу в темну кімнату та електричне число продемонстрували, що кількість мишей MG помітно зменшена порівняно з мишами BC (P < 0.{{4="" }}1),="" що="" відображає="" погіршення="" пам’яті="" у="" мишей="" mps.="" миші="" в="" gc,="" hpgc="" та="" mpgc="" можуть="" помітно="" збільшити="" латентний="" період="" першого="" входу="" в="" темну="" кімнату="" та="" зменшити="" електричне="" число="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><0,01), а="" також="" покращити="" пам’ять.3.2.="" вплив="" латентного="" періоду="" першого="" входу="" в="" темну="" кімнату="" та="" електричного="">

Як показано на рис. 3, рис. 4, дані латентного періоду першого входу в темну кімнату та електричне число продемонстрували, що кількість мишей MG помітно зменшена порівняно з мишами BC (P < 0.{{4="" }}1),="" що="" відображає="" погіршення="" пам’яті="" у="" мишей="" mps.="" миші="" в="" gc,="" hpgc="" і="" mpgc="" можуть="" значно="" збільшити="" латентний="" період="" першого="" входу="" в="" темну="" кімнату="" та="" зменшити="" електричне="" число="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><0,01), а="" також="" покращити="">

Рис. 3. Вплив GC, HPGC, MPGC і LPGC на латентний період першого входу в темну кімнату у мишей. Латентний період першого входу в темну кімнату реєструється як середнє ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

Рис. 4. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на електричне число у мишей. Електричне число повідомляється як середнє ± SE Для кожної групи,^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01 порівняно з модельною групою, використовуючи ANOVA з аналізом LSD.

3.3. Вплив вісцерального індексу

Як показано на рис. 5, дані вісцерального індексу матки, тимуса та селезінки демонструють, що MG мишей значно зменшено порівняно з BC (P < 0.01),="" що="" відображає="" матку="" і="" імунний="" орган="" mps="" мишей="" атрофований.="" миші="" в="" gc,="" hpgc="" і="" mpgc="" можуть="" значно="" покращити="" індекс="" внутрішніх="" органів="" матки,="" тимуса="" та="" селезінки="" порівняно="" з="" mg="" (p="">< 0.01).="" у="" мишей="" у="" lpgc="" дещо="" покращився="" вісцеральний="" індекс="" матки="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><>

Рис. 5. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на індекс внутрішніх органів у мишей. Індекси внутрішніх органів записують як середнє значення ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

3.4. Вплив вмісту Е2, Т, ЛГ і ФСГ

Як показано на рис. 6, дані рівня E2 і T демонструють, що MG мишей помітно знижені, а дані рівня LH і FSH демонструють, що MG мишей значно підвищені порівняно з BC (P < 0.01),="" це="" відображало="" порушення="" рівня="" статевих="" гормонів="" у="" сироватці="" мишей="" mps.="" у="" всіх="" групах="" мишей="" значно="" знижувався="" рівень="" лг="" у="" сироватці="" порівняно="" з="" бк="" (p="">< 0.01).="" миші="" в="" gc,="" hpgc="" і="" mpgc="" можуть="" помітно="" покращити="" e2,="" t="" і="" знизити="" рівень="" lh,="" fsh="" у="" сироватці="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><0,01). миші="" в="" lpgc="" можуть="" трохи="" покращити="" e2="" і="" знизити="" рівень="" fsh="" у="" сироватці="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><>

Рис. 6. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на E2, T, LH, FSH у мишей. Рівні E2, T, LH і FSH записуються як середнє ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

3.5. Спостереження за патологоморфологічними змінами матки

Як показано на рис. 7, рис. 8, у мікрометричному масштабі морфологічні зміни матки демонструють, що миші MG мають значні патологічні зміни в матці порівняно з мишами BC (P < 0.0="" 1).="" миші="" в="" gc,="" hpgc="" можуть="" значно="" покращити="" патологічні="" морфологічні="" зміни="" порівняно="" з="" mg="" (p="">< 0.01).="" миші="" в="" mpgc="" можуть="" покращити="" патологічні="" морфологічні="" зміни="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><>

Рис. 7. Вплив ГХ, ГПГК, МПГК та ЛПГК на патологічні морфологічні зміни матки у мишей. Зміни патологічної морфології представлені у вигляді фотографій для кожної групи.

Рис. 8. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на патологічні морфологічні зміни у мишей. Зміни патологічної морфології повідомляються як напівкількісні критерії для вимірювання матки, а морфологію патологічної організації можна розділити на чотири рівні для кожної групи та обчислити кількість мишей.

Зміни патологічної морфології повідомляються як напівкількісні критерії для вимірювання матки, а морфологію патологічної організації можна розділити на чотири рівні для кожної групи та обчислити кількість мишей.

3.6. Вимірювання товщини кори тимуса

Як показано на рис. 9, рис. 10, з мікрометричною шкалою, дата товщини кори тимуса демонструє, що миші MG значно зменшені порівняно з мишами BC (P < 0.="" 01),="" що="" вказує="" на="" те,="" що="" об’єм="" тимуса="" зменшився="" після="" створення="" мишей="" моделі="" mps.="" миші="" в="" hpgc="" можуть="" значно="" збільшити="" товщину="" кори="" тимуса="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><0,01). миші="" в="" mpgc="" можуть="" збільшити="" товщину="" кори="" тимуса="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><>

Рис. 9. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на патологічні морфологічні зміни тимуса у мишей. Зміни патологічної морфології представлені у вигляді фотографій для кожної групи.

Рис. 10. Вплив GC, HPGC, MPGC і LPGC на товщину кори тимуса у мишей. Товщина кори тимуса записується як середнє значення ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

3.7. Вимірювання товщини селезінкового вузла

Як показано на рис. 11, рис. 12, за мікрометричною шкалою дата товщини селезінкового вузлика демонструє, що миші MG значно зменшені порівняно з BC (P < 0.01="" ),="" що="" вказує="" на="" те,="" що="" об'єм="" селезінки="" зменшується="" після="" встановлення="" мишей="" моделі="" mps.="" миші="" в="" hpgc="" можуть="" значно="" збільшити="" товщину="" селезінкового="" вузла="" порівняно="" з="" mg="" (p="">< 0.01).="" миші="" в="" mpgc="" можуть="" збільшити="" товщину="" селезінкового="" вузла="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><>

Рис. 11. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на патологічні морфологічні зміни селезінки у мишей. Зміни патологічної морфології представлені у вигляді фотографій для кожної групи.

Рис. 12. Вплив GC, HPGC, MPGC і LPGC на товщину селезінкових вузликів у мишей. Товщина селезінкового вузла записується як середнє ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

3.8. Підрахунок кількості базофільних клітин і передньої частки гіпофіза

Як показано на рис. 13, рис. 14, дата кількості базофільних клітин і клітин передньої долі гіпофіза демонструє, що миші MG значно знижені порівняно з BC (P < 0.0="" 1),="" що="" вказує="" на="" те,="" що="" кількість="" клітинного="" джерела="" секреторного="" гонадотропіну="" зменшується="" після="" встановлення="" мишей="" моделі="" mps.="" усі="" отримані="" групи="" препаратів="" можуть="" помітно="" збільшити="" кількість="" базофільних="" клітин="" порівняно="" з="" mg="" (p="">< 0.01).="" миші="" в="" gc,="" hpgc="" і="" mpgc="" можуть="" значно="" збільшити="" кількість="" клітин="" передньої="" частки="" гіпофіза="" порівняно="" з="" mg="" (p=""><>

Рис. 13. Вплив GC, HPGC, MPGC та LPGC на патологічні морфологічні зміни гіпофіза у мишей. Зміни патологічної морфології представлені у вигляді фотографій для кожної групи.

Рис. 14. Вплив GC, HPGC, MPGC і LPGC на кількість базофільних клітин і клітини передньої частки гіпофіза у мишей. Кількість базофільних клітин і клітин передньої долі гіпофіза записують як середнє ± SD для кожної групи. У порівнянні з модельною групою^☆P < 0.05 і^☆☆P < 0.01, використовували ANOVA з методами аналізу LSD.

4. Обговорення

Записи вклімактеричний синдрому стародавніх книгах в основному розкидані описи «хвороби лілій», синдрому «зигзага», «меланхолії», «ненормальної менструації» та інших (Chen et al., 2015, Ma and Chen, 2015). Для жінки старше сорока років Інь Ци скоротили наполовину; Тяньгуй висох; Ци нирки поступово знижувалася; Інь Цзін був дефіцитним; баланс Інь і Ян було втрачено. Його основна дія полягала у появі порушень менструального циклу або менопаузи, таких як припливна лихоманка та пітливість, емоційна дратівливість, неспокій, серцебиття та безсоння, біль у спині, набряки обличчя та кінцівок, запаморочення, шум у вухах та відчуття шкіри, наче мурашки. Сильне зниження Ци нирки є внутрішньою причиною приходу або припинення менструації. Ниркова недостатність є основною причиноюклімактеричний синдром(Tan et al., 2013), а нирка є джерелом життя людини, яку називають «вродженою основою». Підйом і спад ниркової сутності домінують над ростом і репродуктивною функцією зрілого і спаду (Wang and Huang, 2011). Дослідження показали, що зниження функції яєчників є сутністю синдрому ниркової недостатності, а дисбаланс Інь і Ян нирок тісно пов'язаний з розладом ендокринної секреції та дисфункцією вегетативної нервової системи. Зміна E2, FSH і LH є вираженням ниркової недостатності та дисбалансу Інь і Ян у нирках (Shi et al., 2007). Тонізуючі нирково-яньські препарати використовуються для регуляції рівня гормонів у системі гіпоталамус-гіпофіз яєчників або відіграють безпосередню роль у регуляції функції яєчників. Сучасна китайська медицина вважає, що етіологія і патогенезклімактеричний синдромце ниркова недостатність (Razali and Said, 2017).

У дослідженні використовувалася повна резекція яєчників з обох боків спини для відтворення моделі MPS мишей. 90 відсотків естрогену самок виділяється яєчником, і яєчник видаляють. Він штучно викликав раптове зниження рівня естрогену, а потім імітував MPS. Ця модель була класичною, з високим рівнем успішності, стабільністю та надійністю тощо. Через самостійну діяльність і кількість стоянь, латентний період першого входу в темну кімнату та електричний номер ми спостерігали покращення функції навчання та пам’яті та цікавість свіжого середовища за допомогою ліків. Знижена функція яєчників зі зниженням секреції статевих гормонів. Крім того, рівень гонадотропіну був підвищений у пацієнтів з MPS. Рівні E2, T у сироватці були нижчими, ніж у людини без симптомів MPS, тоді як рівні LH, FSH були значно вищими, ніж у людини без симптомів MPS. Таким чином, шляхом вимірювання рівнів Е2, Т, ФСГ і ЛГ у сироватці крові можна використовувати візуальні індикатори для ідентифікації МПС, відображати вплив препаратів на захворювання МПС. Дослідження показало, що зниження функції яєчників є конотацією ниркової недостатності, а зміна E2, T, FSH і LH є свого роду проявом ниркової недостатності (Li et al., 2014, Cheng and Tian, ​​2012).Цистанхебуло через ефект поповнення нирок для підвищення імунітету (Zhang et al., 2009, Shareef et al., 2017).

Ми використовували ліки, що відновлюють нирки, для лікування MPS, що було інноваційним. Результати також показали, що PGC може покращити рівень гормону розладу у мишей MPS і підвищити рівні E2, T, LH і FSH у сироватці. Тим часом, це може покращити патологічні зміни матки, тимуса, селезінки та гіпофіза мишей, що відповідає літературі, що ниркова недостатність є фундаментальною для MPS.

5. Висновок

Результати нашого дослідження показали, що PGC мав хороший терапевтичний ефект для MPS — він міг збільшити самостійну діяльність і кількість стоянь, латентний період першого входу в темну кімнату, нутрощі тимуса, селезінки та матки, E2, T as а також зменшити електричне число, ЛГ і ФСГ. Фенілетаноїдні глікозиди були виділені вЦистанхеза високу ефективність і зручність дослідження MPS для покращення лікуванняперименопаузальний синдром. Його стандарти якості легко контролювати, що сприяє інноваційним дослідженням та індустріалізації розробки ліків. Це пропонує новий спосіб мислення для лікування MPS.

Конфлікт інтересів

Автори не мають конфлікту інтересів, про який слід повідомляти.

Подяки

Це дослідження було підтримано Національним фондом природничих наук Китаю (81274154); Henan Science and Technology Innovation Team (2012IRTSTHN011); група науково-технічних інновацій міста Чженчжоу (131PCXTD612); ключова медична лабораторія для трансформації китайської медицини міста Чженчжоу (121PYFZX1820).

Список літератури

Chen et al., 2013 F. Chen, Z. Chen, XF Xing, SX Liu, TJ Zhang, CQ Chen Дослідницький процес уЦистанхеHerba Drug Eval. Res., 6 (2013), стор 469-475

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Chen та ін., 2015 ZF Chen, XX Zhang, YY Zhao, X. Wang, YL Ren, HQ Liao, Y. Li, L. Zhao Інтелектуальний аналіз даних щодо вибору акупунктурних точок у лікуванніперименопаузальний синдромСвітове підборіддя. мед., 4 (2015), с. 482-489

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Cheng and Tian, ​​2012 K. Cheng, SL Tian Вплив профілактичної електроакупунктури "Guanyuan" (CV4) і "Sanyinjiao" (SP6) на вісь гіпоталамус - гіпофіз - яєчник у акупунктури щурів з яєчником. Res., 1 (2012), стор 15-19

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Gu та ін., 2011 JH Gu, XH Yu, R. Wu, XK Zhao, L. Zhao Оптимізація технології виділення та очищення фенілетаноїдних глікозидів зЦистанхеTubulosa від Macroporous Adsorption Resin China Acad. Дж. Електрон. опубл. Будинок, 11 (2011), с. 1007-1009

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Halim and Phang, 2017 ANI Halim, IC Phang Саліцилова кислота пом’якшує pb-стрес у Nicotiana tabacum Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), стор. 16-19

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Ia, 2016 YM Ia Фактори впливу на якість життя жінок у перименопаузі та заходи протидії Чин. Дж. Клін. Раціональне використання наркотиків, 2B (2016), стор. 154-155

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2010 Y. Li, YY Song, HQ Zhang Прогрес у дослідженні хімічних складових і лікарської активностіЦистанхеПідборіддя. Ресурси диких рослин, 1 (2010), с. 7-11

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2014 Y. Li, L. Xu, Z. Qian, K. Cheng Ефекти електроакупунктурної стимуляції "Sanyinjiao" (SP6) на вісь гіпоталамус-гіпофіз - яєчники у щурів у перименопаузі. Рез., 3 (2014), с. 198-201

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Liu et al., 2013 X. Liu, CM Li, JD Gao, R. Wu Прогрес дослідженьЦистанхеПідборіддя. Ж. Традит. Мед. Sci. Технолог., 5 (2013), С. 575-577

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Ma et al., 2016 XZ Ma, QY Li, QF Chen, SN Li Дослідження прогресу лікування ТКМперименопаузальний синдромСвіт Дж. Інтегр. Традиція. Western Med., 9 (2016), стор 1329-1332

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Ма та Чен, 2015 р. К. Ма, Ю. Х. Чен Обговорення стратегії лікуванняперименопаузальний синдромз китайською та західною медициною, Китай J. Chin. Матеріал, 2 (2015), С. 3899-3906

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Мустафа та ін., 2017 р. Г. Мустафа, Р. Аріф1, А. Атта, С. Шаріф, А. Джаміль. Біоактивні сполуки з лікарських рослин та їх значення для відкриття ліків у Пакистані Matrix Sci. Фарма, 1 (1) (2017), с. 17-26

Запис CrossRefView в ScopusGoogle Scholar

Nawaz et al., 2017 S. Nawaz, M. Shareef, H. Shahid, M. Mushtaq, M. Sarfraz Огляд антигіперліпідемічного ефекту синтетичних фенольних сполук Matrix Sci. Медика, 1 (1) (2017), с. 22-26

Запис CrossRefView в ScopusGoogle Scholar

Рашид та ін., 2017 М. Рашид, М. І. Салім, Ф. Діба, М. С. Хан, С. А. Махфуз, А. А. Батт, М. В. Аббас Вплив сезону на появу козячого маститу у жуків у Файсалабадському приміщенні Matrix Sci. Медика, 1 (1) (2017), с. 19-21

Запис CrossRefView в ScopusGoogle Scholar

Razali and Said, 2017 MAA Razali, FM Said Вироблення червоного пігменту monascus purpureus у барабанному біореакторі з перемішуванням Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), стор. 13-15

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Шаріф та ін., 2017 М. Шаріф, М. Джамал, М. Сарфраз Огляд антибактеріальної активності Nigella sativa в кишечнику курчат-бройлерів Matrix Sci. Фарма, 1 (1) (2017), с. 27-32

Запис CrossRefView в ScopusGoogle Scholar

Shi et al., 2007 HB Shi, YB Miao, SL Zhong, W. Wang, LP Wang Вплив гранул Fuchun на нейроендокринну систему у щурів із менопаузальним дефіцитом інь Chin. Ж. Традит. Мед. Sci. техн., 1 (2007), с. 16-17

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Тан та ін., 2013 р. XJ Tan, WH Li, YQ Zeng, SL Xu, J. Qin, JM Cui, NG Shi Обговорити підтримкуперименопаузальний синдромз патогенезу ниркової недостатності Lishizhen Med. Materia Medica Res., 9 (2013), стор 2212-2213

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Tu et al., 2011 PF Tu, Y. Jiang, YH Guo, XB Li, YZ Tian ДослідженняЦистанхеdeserticola та розвиток її промисловості Чин. J. Pharmacol., 12 (2011), стор 882-886

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Wang and Huang, 2011 J. Wang, H. Huang Традиційна китайська медицина та традиційна китайська культура Clin. Ж. Традит. Підборіддя. мед., 2 (2011), с. 95-105

Запис CrossRefView в ScopusGoogle Scholar

Wei and Miao, 2013 ZZ Wei, MS Miao Аналіз характеристик підсилення нирок традиційною китайською медициною в лікуванніперименопаузальний синдромКитай Дж. Чін. мед., 11 (2013), с. 1688-1691

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Wumaierjiang and Yao, 2016 YHF Wumaierjiang, G. Yao Досягнення в експериментальному дослідженні ефективностіЦистанхеХунань Дж. Традит. Підборіддя. мед., 4 (2016), с. 193-195

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Ян та ін., 2012 GH Yan, JH Tian, ​​BW Long, N. Li Досягнення фенілетаноїдних глікозидів відЦистанхеCentral South Pharm., 9 (2012), стор 692-695

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Zhao and Pan, 2013 W. Zhao, YN Pan Досягнення в дослідженні фармакологічної активності фенілетаноїдних глікозидів уЦистанхеАзіатсько-Тихоокеанська традиція. мед., 5 (2013), с. 77-79

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Zhang and Miao, 2011 Y. Zhang, MS Miao Дослідження традиційної китайської медицини для тонізування нирок ян у лікуванні клімактеричного синдрому Китай J. Chin. мед., 9 (2011), с. 1084-1087

Переглянути запис у ScopusGoogle Scholar

Чжан та ін., 2009 YZ Zhang, LL Yang, HF Song, Du. Yimin Антистресова фармакологічна діяЦистанхеdeserticola та механізм: досягнення досліджень J. Int. Фармацевт. Res., 5 (2009), стор 344-347

Запис CrossRefView в ScopusGoogle Scholar

З: Saudi Pharmaceutical Journal

Том 25, випуск 4, травень 2017 р., сторінки 537-547