Нейропротекторні ефекти чотирьох фенілетаноїдних глікозидів на H2O2-індукований апоптоз клітин PC12 через шлях Nrf2/ARE
Mar 04, 2022
Контакт: Одрі Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Електронна пошта:audrey.hu@wecistanche.com
Maiquan Li 1, Tao Xu 1, Fei Zhou 1, Mengmeng Wang 1, Huaxin Song 1, Xing Xiao and Baiyi Lu 1,*
1. Введення
Окислювальний стрес, який є дисбалансом антиоксидантного гомеостазу, викликає перекисне окислення ліпідів, пошкодження білків і ДНК, старіння клітин і загибель клітин. Цей процес, ймовірно, сприяє виникненню кількох нейродегенеративних розладів, таких як хвороба Альцгеймера (БА), хвороба Паркінсона (ХП) та ішемія/реперфузія [1]. Відомо, що перекис водню (H2O2), яка є однією з основних активних форм кисню (АФК), викликає перекисне окислення ліпідів і пошкодження ДНК [2]. Крім того, H2O2 є ендогенним джерелом вільних гідроксильних радикалів, що сприяє фоновому рівню клітинного окисного стресу [3,4]. Таким чином, терапевтичні стратегії для запобігання апоптозу, викликаного окислювальним стресом, можуть мати потенціал для лікування нейродегенеративних захворювань.
Еритроїдний 2-фактор 2 (Nrf2) є фактором транскрипції, який тісно пов’язаний з окисним стресом. Активація Nrf2 індукує транскрипцію численних антиоксидантних і детоксикаційних генів, включаючи гемоксигеназу-1 (HO-1), NAD(P)H хіноноксидоредуктазу 1, протизапальну [13] та імуномодулюючу [14]. ] біоактивність. Osmanthusfragrans є звичайним інгредієнтом кількох азіатських страв і споживається здавна. Раніше ми показали, що квіткові екстракти O.fragrans покращують просторове навчання та пам’ять, пригнічують окислювальне пошкодження та проявляють нейропротекторну дію при старінні, спричиненому d-галактозою, на моделі миші ICR [15]. Салідрозид, актеозид та ізоактеозид є основною реакцією PhG на антиоксидантну активність екстрактів квітів O.fragrans [16].
Дослідження нейропротекторного ефекту PhGs дали бажані результати. Салідрозид значно знижував клітинний апоптоз клітин PC12, які були піддані MPP plus [17,18]. Актеозид також полегшив індукований MPP плюс апоптоз і окислювальний стрес у клітинах PC12 [19] і A p25-35-індуковане пошкодження клітин SH-SY5Y [20]. Ехінакозид досліджували на індукований фактором некрозу пухлини (TNFa) апоптоз у клітинах SH-SY5Y [21], індуковану MPTP дофамінергічну токсичність у мишей [22], пошкоджені глутаматом первинні культури клітин кори головного мозку щурів [23] та { {19}}Пошкодження клітин PC12, спричинене OHDA [24]. Результати показали, що PhGs виявляють цитопротекторний ефект і є потенційними агентами для лікування нейродегенеративних захворювань. Дослідження показали, що антиоксидантні властивості PhG лежать в основі багатьох інших біоактивних речовин цих сполук [25]. Однак мало досліджень досліджували молекулярний механізм PhG проти окисної токсичності.
У нашому дослідженні ми вибрали чотири типові PhG наступним чином: салідрозид (фенілетаноїдні моносахариди), актеозид (фенілетаноїдні дисахариди), ізоактеозид (фенілетаноїдні дисахариди) та ехінакозид (фенілетаноїдні трисахариди). Ми застосували модель загибелі нейронів з використанням диференційованих клітин PC12 [26], щоб дослідити захисний ефект і молекулярний механізм PhG на моделі клітин PC12, індукованих H2O2-. Ми продемонстрували, що PhGs активують шлях Nrf2/ARE шляхом зв’язування з Kelch-подібним ECH-асоційованим білком 1 (Keap1). Цей процес посилив регуляцію антиоксидантних ферментів і підвищив стійкість клітин PC12 до окисного стресу.
Лікування нейродегенеративних захворювань:PhG з цистанхи
2. Результати
2.1. PhG пригнічують цитотоксичність, спричинену H2O2-, у клітинах PC12
Було перевірено цитотоксичну дію H2O2 і PhGs (0.1,1,5 і 10 卩g/mL) на клітини PC12. Результати показали, що H2O2 викликав втрату життєздатності клітин PC12 залежно від концентрації та часу (рис. 1A). Вплив на клітини PC12 200 H2O2 протягом 2 годин призвів до життєздатності клітин 57,4 відсотка. Попередня обробка клітин PhG 0. 1, 1, 5 і 10 昭/мл не вплинула на життєздатність клітин (рис. 1B) і помітно захищала клітини PC12 від пошкодження, викликаного H2O2-, покращуючи життєздатність клітин становить 9.549-22.141 відсоток, 12.092-25.289 відсотків, 1.470-9.289 відсотків і 3.411-11.441 відсоток відповідно ( малюнок 1C). Однак попередня обробка салідрозидом (0,1 мкг/мл), ізоактеозидом (0,1, 1, 5 і 10 мкг/мл), ехінакозидом (0,1,1 і 5 мкг/мл) не виявила суттєвої різниці в клітинах, індукованих HzOz травма. Попередня обробка клітин PhGs також покращила морфологічні характеристики, індуковані H2O2 (рис. 1D).
Фігура 1.PhG пригнічують цитотоксичність, спричинену H2O2-, у клітинах PC12. Життєздатність клітин виявляли методом МТТ. Цитотоксична дія H2O2 (A) і PhGs (B) у різних концентраціях на клітини PC12. (C) PhG послаблюють зниження життєздатності клітин, викликане H2O2-. Клітини PC12 інкубували з PhG (0.1 і 10 мг/мл) протягом 24 годин, а потім інкубували з 200 пМ H2O2 ще 2 години. год після видалення PhG. (D) Морфологічне спостереження. Клітини після обробки спостерігали за допомогою фазово-контрастного мікроскопа (x100), CK: нормальна група, H2O2: група, що отримувала H2O2, HL: група, яка отримувала низькі дози салідрозиду, HH: група, які отримували високі дози салідрозиду, ML: група, які отримували низькі дози актеозиду, MH: група лікування високими дозами актеозиду, IL: група лікування низькими дозами ізоактеозиду, IH: група лікування високими дозами ізоактеозиду, SL: група лікування низькими дозами ехінакозиду, SH: група лікування високими дозами ехінакозиду. ** p < 0,01="" порівняно="" з="" групою="" без="" лікування;="" #="" p="">< 0,05,="" порівняно="" з="" групою,="" яка="" отримувала="" h2o2;="" ##="" p="">< 0,01,="" порівняно="" з="" групою,="" яка="" отримувала="">
2.2. PhG пригнічують індуковане H2O2- внутрішньоклітинне накопичення АФК, перекисне окислення ліпідів (MDA) і підвищену активність супероксиддисмутази (SOD) у клітинах PC12
Вплив на клітини PC12 200 пМ H2O2 протягом 2 годин підвищив рівень АФК, вміст MDA та знизив активність SOD (рис. 2). Попередня обробка PhG знижувала рівень АФК, салідрозиду та актеозиду, а попередня обробка високими дозами ізоактеозиду та ехінакозиду значно знижувала рівень АФК (p <0,01). попередня="" обробка="" салідрозидом="" не="" вплинула="" на="" вміст="" mda,="" але="" попередня="" обробка="" актеозидом="" значно="" послабила="" вміст="" mda="" (p=""><0,05). попередня="" обробка="" ізоактеозидом="" та="" ехінакозидом="" значно="" зменшила="" вміст="" mda="" до="">
малюнок 2.PhG блокували накопичення ROS і MDA і підвищували активність SOD в клітинах PC12. Клітини PC12 інкубували з PhGs (0.1 і 10 4г/мл) протягом 24 годин, а потім інкубували з 200 |^М H2O2 протягом ще Через 2 год після видалення ФГ. (A) PhG блокували накопичення ROS і MDA. (B) PhGs блокували накопичення MDA. (C) PhG підвищили активність SOD. CK: звичайна група, модель: H2O2 оброблена група, салідрозид: салідрозид оброблена група, актеозид: актеозид оброблена група, ізоактеозид: ізоактеозид оброблена група, ехінакозид: ехінакозид оброблена група. ** p < 0.01="" порівняно="" з="" групою="" без="" лікування;="" #="" p="">< 0,05,="" порівняно="" з="" групою,="" яка="" отримувала="" h2o2,="" ##="" p="">< 0,01,="" порівняно="" з="" групою,="" яка="" отримувала="">
2.3. PhGs реверсований H2O2-індукований апоптоз у клітинах PC12
Обробка H2O2 (200 |1M) протягом 2 годин значно збільшила апоптоз у клітинах PC12 із загальною швидкістю апоптозу до 16,02 відсотка (рис. 3). Однак попередня обробка PhG (0,1 і 10 мкг/мл) протягом 24 годин знижувала швидкість апоптозу залежно від концентрації (p <0,01). салідрозид,="" актеозид,="" ізоактеозид="" та="" ехінакозид="" помітно="" знизили="" відсоток="" апоптозу="" клітин="" на="" 4.750-6.627="" відсотка,="" 4.413-5.800="" відсотка,="" 6.593-10.047="" відсотка="" та="" 1.530-7.510="" відсотків="">
малюнок 3. PhG скасували H2O2-індукований апоптоз у клітинах PC12. Клітини PC12 інкубували з PhG (0.1 і 10 卩г/мл) протягом 24 годин, а потім інкубували з 200 пМ H2O2 ще 2 години після PhG були видалені. Потім апоптоз вимірювали проточною цитометрією з використанням флуоресцентного зонда PI/FITC. CK: звичайна група, модель: H2O2 оброблена група, салідрозид: салідрозид оброблена група, актеозид: актеозид оброблена група, ізоактеозид: ізоактеозид оброблена група, ехінакозид: ехінакозид оброблена група. ** p < 0,01="" порівняно="" з="" групою="" без="" лікування;="" ##="" p="">< 0,01,="" порівняно="" з="" групою,="" яка="" отримувала="">
2.4. PhGs реверсує H2O2-індуковане зниження експресії білка HO-1, NQO1, GCLC і GCLM
HO{{0}}, NQO1 і глутамат-цистеїнова лігаза (GCL) є важливими клітинними антиоксидантними ферментами, а HO-1, NQO1 і каталітичні або модифіковані субодиниці GCL (GCLC або GCLM) є Nrf2-регульовані нижчі гени [27]. Експресія білків HO-1, NQO1, GCLC і GCLM спостерігалася після лікування. Була виявлена очевидна різниця між експресією білків HO-1 і NQO1 з або без H2O2 (Рис. 6A-C) (p < 0.01).="" phg="" (0.1="" і="" 10="" п^г/мл)="" скасували="" h2o2-індуковане="" зниження="" експресії="" білка="" ho-1="" (за="" винятком="" салідрозиду="" на="" {{32}="" }.1="" пг/мл),="" nqo1="" (крім="" актеозиду="" при="" 0.1="" пг/мл)="" (p="">< {{40}}.01).="" h2o2="" також="" знижував="" експресію="" білка="" gclc="" і="" gclm="" (p="">< 0.05)="" (рис.="" 6a,="" d,="" e).="" phg="" (0.1="" і="" 10="" пг/мл)="" скасовують="" h2o2-індуковане="" зниження="" експресії="" білка="" gclc="" (крім="" ехінакозиду="" при="" 0,1="" пг/мл)="" (p="">< 0,01)="" і="" gclm="" (крім="" салідрозиду="" при="" 0,1="" пг/мл)="" (p=""><0,01). потім="" хімічні="" інгібітори="" для="" ho-1="" були="" використані="" для="" подальшої="" оцінки="" ролі="" антиоксидантних="" ферментів="" у="" регулюванні="" захисту="" phg="" від="" цитотоксичності,="" спричиненої="" h2o2-.="" phg="" (0,1="" і="" 10="" пг/мл)="" запобігали="" цитотоксичності,="" спричиненій="" h2o2-,="" але="" такий="" захисний="" ефект="" був="" скасований="" інгібітором="" ho-1="" znpp="" (p="">< 0,01)="" при="" 20="" пм="" (рисунок="" 6f,="" p="">< 0,01)="">
2.5. Експресія Keap1 і аналіз молекулярного докінгу
У фізіологічних умовах Keap1 діє як білок-репресор Nrf2, зв’язуючись із доменом Neh2 Nrf2 і націлюючи Nrf2 на убіквітин-лігазу E3 на основі Cul3- для убіквітування та подальшої деградації протеасомою 26S [28]. Здатність зв’язування PhG з Keap1 була оцінена за допомогою аналізу молекулярного докінгу, щоб дослідити механізм їхнього антиоксидантного ефекту.
Антиоксидантна дія: ЦистанхеяPhGs
3. Обговорення
Ми досліджували нейропротекцію PhGs на індуковану H2O2 цитотоксичність у клітинах PC12. Результати показують, що попередня обробка PhG значно пригнічує цитотоксичність, спричинену HzOz, послаблює рівень внутрішньоклітинних АФК, покращує рівень внутрішньоклітинних антиоксидантних ферментів і, зрештою, усуває цитотоксичність, спричинену H2O2-, у клітинах PC12. Крім того, PhG збільшували транскрипційну активацію Nrf2, скасовували HzOz-індуковане зниження експресії білка HO-1, NQO1, GCLC і GCLM. Крім того, PhG показали потенційну взаємодію з сайтом зв’язування Nrf2 у білку Keap1.
У пошкодженні клітин PC12, викликаному H2O2-, перекисне окислення ліпідів, що відноситься до окисної деградації ліпідів, збільшило проникність мембран, що призвело до пошкодження клітин [29]. Утворення МДА широко використовується як індекс перекисного окиснення ліпідів [30]. H2O2 посилив виробництво ROS і вичерпав антиоксидантні захисні ферменти, такі як SOD, каталаза та GPx. Цей процес призводить до окислювального стресу [31], який відіграє ключову роль у спричиненні та прогресуванні більшості нейродегенеративних розладів. Відповідно до попередніх досліджень ми спостерігали підвищений рівень ROS, зниження внутрішньоклітинних антиоксидантних ферментів і посилений апоптоз клітин PC12 після лікування H2O2. Попередня обробка PhGs значно послабила HzOz-індуковане збільшення внутрішньоклітинних АФК, покращила внутрішньоклітинні антиоксидантні ферменти та, зрештою, скасувала HzOz-індуковану цитотоксичність у клітинах PC12.
Куанг та ін. [32] повідомили, що ехінакозид продемонстрував значний нейропротекторний ефект на цитотоксичність, спричинену H2O2-, у клітинах PC12 через мітохондріальний апоптотичний шлях. У цьому дослідженні ми виявили, що ехінакозид, салідрозид, актеозид та ізоактеозид показали нейропротекторну дію шляхом посилення антиоксидантної активності клітин PC12, оскільки вони збільшували транскрипційну активацію Nrf2 і посилювали експресію білка HO-1, NQO1, GCLC і GCLM. Численні дослідження чітко продемонстрували, що активація цільових генів Nrf2, зокрема HO-1, в астроцитах і нейронах сильно захищає від запалення, окисного пошкодження та загибелі клітин. Повідомлялося, що система HO -1 дуже активна в центральній нервовій системі, і її модуляція, очевидно, відіграє вирішальну роль у патогенезі нейродегенеративних розладів [33]. Нещодавні дослідження також уточнили роль Nrf2 у прогресуванні та ризику розвитку хвороби Паркінсона [9] та Keap1 як ефективної мішені для реактивації Nrf2 при AD [34]. Результати підтверджують нові докази Nrf2 як терапевтичної мішені при нейродегенеративних захворюваннях.
Молекулярний докінг-аналіз показав, що PhG можуть зв’язуватися з Keap1 із такими властивостями зв’язування: ехінакозид > ізоактеозид > актеозид > салідрозид. Згідно з цими результатами, попередня обробка PhG призвела до ядерної транслокації Nrf2 із наступною експресією Nrf2 у ядрі: ехінакозид > ізоактеозид * актеозид > салідрозид. Ми припустили, що кількість глікозидів вплинула на можливий режим зв'язування PhGs і Keap1, і режим зв'язування додатково викликав вивільнення Nrf2 з Keap1. Цей процес призвів до активації Nrf2 і наступних генів і зрештою захищає клітини PC12 від окислювального стресу, викликаного H2O2 -.
Нейропротекторні ефекти цистанхиPhGs
4. Матеріали та методи
4.1. Хімічні сполуки та реагенти
Салідрозид (№ CAS {{0}}), актеозид (№ CAS 61276-17-3), ізоактеозид (№ CAS 61303-13-7) та ехінакозид (№ CAS {{3} }) були придбані у YYuanye Biotechnology Company (Шанхай, Китай). PhGs розчиняли в PBS для отримання основного розчину 10 мг/мл, який зберігали при -20 градусах. H2O2 було придбано у Aladdin® (Шанхай, Китай). Середовище RPMI-1640 і фетальну сироватку великої рогатої худоби було придбано в Hyclone (Логан, Юта, США), а 0,5% трипсину EDTA, пеніцилін і стрептоміцин були придбані в Keyi (Ханчжоу, Китай). Діагностичні набори MDA, SOD, MTT і DCFH-DA були придбані в Beyotime Institute of Biotechnology (Нанкін, Цзянсу, Китай). Набір для подвійного фарбування Annexin V-FITC/PI був придбаний у Solarbio Life Sciences (Пекін, Китай). Антитіла до Nrf2, гістону H3, Keap1, HO-1, NQO1, GCLC, GCLM і p-актину, анти-мишачий пероксид хрону (HRP) IgG і анти-кролячий HRP-IgG були придбані в Abcam (Лондон, Великобританія). Інгібітори HO-1 та ZnPP були придбані у Sigma Chemical Co. (Сент-Луїс, Міссурі, США). RNAiso Plus, набір реагентів PrimeScript™RT з gDNA Eraser і SYBR® Premix Ex Taq™ II були придбані у Takara (Shiga, Японія). Трансфекційний реагент Lipofectamine® RNAiMAX був придбаний у Thermo Fisher Scientific (Waltham, Великобританія). Послідовності siRNA Nrf2 були такими: вперед, CCGAAUUACAGUGUCUUAA; і зворотний, UUAAGACACUGUAAUUCGG. Тим часом контрольні послідовності siRNA були такими: вперед, UUCUCCCGAACGUGUCACGU; і навпаки, ACGUGACACGUUCGGAGAA.
4.2. Культура клітин
Лінія мишачої феохромоцитоми надниркових залоз (клітини PC12) була отримана з Інституту біохімії та клітинної біології SIBS (CAS, Шанхай, Китай). Клітини зберігалися в RPMI-1640 (Hyclone), що містить 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби (Hyclone), 100 ОД/мл пеніциліну та 0,1 мг/мл стрептоміцину при 37 градусах з 5% CO2. Середовище змінювали через день.
4.3. Аналіз життєздатності клітин
Клітини PC12 висівали в 96-лункові планшети по 2 x 104 клітин на лунку. Після приєднання клітини попередньо інкубували з або без інгібітора протягом 20 хвилин, інкубували з або без PhG протягом 24 годин, а потім інкубували з H2O2 ще 2 години після видалення PhG. Після інкубації клітини обробляли 5 мг/мл МТТ протягом 4 годин при 37°С і обережно видаляли середовище. Кристали формазану, які утворилися клітинами, що вижили, розчиняли в 150 мкл ДМСО, щоб отримати синє забарвлення [35], і оптичну густину вимірювали при 570 нм на планшет-рідері. Контролі використовували таку саму концентрацію середовища з лише ДМСО. Життєздатність клітин нормалізували як відсоток контролю.
Концентрації PhG (0.1, 1, 5 і 10 мкг/мл) були обрані залежно від аналізу цитотоксичності PhG та повідомленого цитопротекторного ефекту ехінакозиду [32]. Згідно зі звітом, цитотоксичний ефект не спостерігався при рівнях нижче 10 мкг/мл, і повідомлялося, що ехінакозид демонструє цитопротекторний ефект у моделі клітин, уражених HzOz.
4.4. Аналіз апоптозу
Апоптоз виявляли за допомогою набору для подвійного фарбування Annexin V-FITC/PI (Solarbio). Клітини PC12 висівали в 6-лункові планшети по 2 x 105 клітин на лунку. Після приєднання клітини обробляли PhGs (0,1 і 10 мкг/мл) протягом 24 годин та інкубували з H2O2 ще 2 години після видалення PhGs. Після інкубації клітини промивали холодним PBS, двічі центрифугували при 1500 об/хв протягом 10 хв і ресуспендували в 500 мкл буфера для зв’язування. Мічений FITC Анексин V (5 мкл) і йодид пропідію.
Скорочення
GCLC глутамат-цистеїнова лігазно-каталітична субодиниця
Субодиниця глутамат-цистеїнової лігази-каталітичного модифікатора GCLM
H2O2 перекис водню
HO-1 гемоксигеназа 1
Keap1 Kelch ECH асоціативний білок 1
NQO1 NAD(P)H хіноноксидоредуктаза 1
Еритроїдний ядерний фактор Nrf2 2-споріднений фактор 2
PhGs салідрозид, актеозид, ізоактеозид та ехінакозид
АФК активні форми кисню
ZnPP цинк протопорфірин
Екстракт Cistanche deserticola: PHG Cistanche
Список літератури
1. Сонце, А.Ю.; Chen, YM Окислювальний стрес і нейродегенеративні розлади. J. Biomed. Sci. 1998, 5, 401-414. [CrossRef] [PubMed]
2. Махешварі, А.; Мікро, ММ; Агарвал, А.; Шарма, Р.К.; Нандан, Д. Шляхи, залучені до апоптозу зародкових клітин яєчка, індукованого H2O2 in vitro. FEBS J. 2009, 276, 870-881. [CrossRef] [PubMed]
3. Холлівелл Б. Активні форми кисню та центральна нервова система. J. Neurochem. 1992, 59, 1609-1623. [CrossRef] [PubMed]
4. Річардсон, Дж.С.; Суббарао, К.В.; Ang, LC Про можливу роль індукованого залізом перекисного окислення вільних радикалів у нервовій дегенерації при хворобі Альцгеймера. Енн NY акад. Sci. 1992, 648, 326-327. [CrossRef] [PubMed]
5. Чжан Д. Д. Дослідження механізму сигнального шляху Nrf2-Keap1. Препарат Метаб. Rev. 2006, 38, 769-789. [CrossRef] [PubMed]
6. Іто, К.; Тонг, К.І.; Ямамото, М. Молекулярний механізм, що активує шлях Nrf2-Keap1 у регуляції адаптивної відповіді на електрофіли. Вільний радикал. Biol. Мед. 2004, 36, 1208-1213. [CrossRef] [PubMed]
7. Конг, А. Н.; Овуор, Е.; Ю, Р.; Хеббар, В.; Чен, К.; Ху, Р.; Мандлекар, С. Індукція ксенобіотичних ферментів за допомогою мап-кіназного шляху та антиоксидантного або електрофільного відповідного елемента (ARE/EpRE). Препарат Метаб. Rev. 2001, 33, 255-271. [CrossRef] [PubMed]
8. Буендіа, І.; Міхальська, П.; Наварро, Е.; Гамейро, І.; Егеа, Дж.; Леон, Р. Nrf2-Шлях ARE: нова мішень проти окисного стресу та нейрозапалення при нейродегенеративних захворюваннях. Pharmacol. Тер. 2016, 157, 84-104. [CrossRef] [PubMed]
9. Скібінський, Г.; Хван В.; Андо, Д.М.; Дауб, А.; Лі, А. К.; Равісанкар, А.; Модан, С.; Фінукане, М.М.; Шеббі, Б.А.; Finkbeiner, S. Nrf2 пом’якшує LRRK2- та нейродегенерацію, спричинену a-синуклеїном, шляхом модуляції протеостазу. Proc. Natl. акад. Sci. США 2016, 114, 1165-1170. [CrossRef] [PubMed]
10. Хіменес К.; Riguera, R. Фенілетаноїдні глікозиди в рослинах: структура та біологічна активність. Нац. Виробник Rep. 1994, 11, 591-606. [CrossRef] [PubMed]
11. Георгієв, М.; Аліп'єва К.; Орхан, І.; Абрашев Р.; Денев, П.; Ангелова, М. Антиоксидантна та інгібуюча холінестерази активність Verbascum xanthophoeniceum Griseb. і його фенілетаноїдні глікозиди. Харчова хім. 2011, 128, 100-105. [CrossRef] [PubMed]
12. Лі, Н.; Ван, Дж.; Ма, Дж.; Гу, З.; Jiang, C.; Ю, Л.; Fu, X. Нейропротекторні ефектиCistanches HerbaТерапія пацієнтів з помірною хворобою Альцгеймера. Evid.-Based Complement. Чергувати. Мед. 2015, 2015,103985. [CrossRef] [PubMed]
13. Лю Ю.Л.; Він, WJ; Мо, Л.; Ши, М.Ф.; Чжу, YY; Пан, С.; Li, XR; Сюй, QM; Yang, SL Антимікробна, протизапальна дія та токсикологія фенілетаноїдних глікозидів з Monochasma savatieri Franch. колишній Максим. J. Етнофармакол. 2013, 149, 431-437. [CrossRef] [PubMed]
14. Донг, К.; Яо, Дж.; Ікло, JN; Ding, K. Структурна характеристика та імунологічна активність двох екстрагованих холодною водою полісахаридів зCistanche deserticola YC Ma. вуглеводний. рез. 2007, 342, 1343-1349. [CrossRef] [PubMed]
15. Сюн, Л.; Мао, С.; Лу, Б.; Ян, Дж.; Чжоу, Ф.; Ху, Ю.; Цзян, Ю.; Shen, C.; Чжао, Ю. Екстракт квітів Osmanthusfragrans і актеозид захищають від індукованого d-галактозою старіння в моделі миші ICR. J. Med. Харчування 2016, 19, 54-61. [CrossRef] [PubMed]
16. Цзян Ю.; Мао, С.; Хуан, В.; Лу, Б.; Цай, З.; Чжоу, Ф.; Лі, М.; Лу, Т.; Zhao, Y. Профілі фенілетаноїдних глікозидів та антиоксидантна активність Osmanthusfragrans Lour. Flowers за допомогою UPLC/PDA/MS та імітованої моделі травлення. Дж. Агрік. Харчова хім. 2016, 64, 2459-2466. [CrossRef] [PubMed]
17. Лі, X.; Є, X.; Лі, X.; Сонце, X.; Лян, К.; Тао, Л.; Кан, X.; Chen, J. Salidroside захищає від апоптозу, індукованого MPP plus, у клітинах PC12 шляхом інгібування шляху NO. Brain Res. 2011, 1382, 9-18. [CrossRef] [PubMed]
18. Чжан, Л.; Дінг, В.; Сонце, Х.; Чжоу, К.; Хуан, Дж.; Лі, X.; Се, Ю.; Chen, J. Salidroside захищає клітини PC12 від апоптозу, індукованого MPP plus, шляхом активації шляху PI3K/Akt. Харчова хім. Токсикол. 2012, 50, 2591-2597. [CrossRef] [PubMed]
19. Sheng, GQ; Чжан, JR; Pu, XP; Ма, Дж.; Li, CL Захисний ефект вербаскозиду на нейротоксичність, спричинену іонами 1-метил-4- фенілпіридинію, у клітинах PC12. Євро. J. Pharmacol. 2002, 451, 119-124. [CrossRef]
20. Ван, Х.; Сюй, Ю.; Ян, Дж.; Чжао, X.; Сонце, X.; Чжан, Ю.; Го, Дж.; Zhu, C. Acteoside захищає клітини нейробластоми людини SH-SY5Y від пошкодження клітин, викликаного бета-амілоїдом. Brain Res. 2009, 1283, 139-147. [CrossRef] [PubMed]
21. Мін, Д.; Jin, YZ; Йонг, Дж.; Чжен, Б.Л.; Yao, HW Ехінакозид рятує нейронні клітини SHSY5Y від апоптозу, індукованого TNFa. Підборіддя. Pharmacol. Бик. 2005, 505, 11-18.
22. Чжао, Q.; Гао, JP; Li, WW; Кай, Д. Ф. Нейротрофічні та нейрорятувальні ефекти ехінакозиду в підгострій мишачій моделі MPTP хвороби Паркінсона. Brain Res. 2010, 1346, 224-236. [CrossRef] [PubMed]
23. Ку, К.А.; Сунг, Ш.; Парк, JH; Кім, Ш.; Лі, Кентуккі; Kim, YC In vitro нейропротекторна активність фенілетаноїдних глікозидів з Callicarpa dichotoma. Планта Мед. 2005, 71, 778-780. [CrossRef] [PubMed]
24. Лю Ю.Г.; Лі, X.; Сюн, К.; Ю, Б.; Pu, X.; Ye, XS Синтетичні фенілетаноїдні похідні глікозидів як потенційні нейропротекторні агенти. Євро. J. Med. Chem. 2015, 95, 313-323. [CrossRef] [PubMed]
25. Фу, Г.; Панг, Х.; Вонг, Ю. Х. Природні фенілетаноїдні глікозиди: потенційні джерела для нових терапевтичних засобів. Curr. Мед. Chem. 2008, 15, 2592-2613. [CrossRef] [PubMed]
26. Грін, Луїзіана; Tischler, AS Створення норадренергічної клональної лінії клітин феохромоцитоми надниркових залоз щурів, які реагують на фактор росту нервів. Proc. Natl. акад. Sci. США 1976, 73, 2424-2428. [CrossRef] [PubMed]
27. Лян, QN; Sheng, YC; Цзян, П.; Ji, LL; ся, YY; Мін, Ю.; Wang, ZT. Різниця антиоксидантної системи глутатіону в печінці недавно відлучених і молодих мишей і її участь у гепатотоксичності, викликаній ізоліном. Арк. Токсикол. 2011, 85, 1267-1279. [CrossRef] [PubMed]
28. Кобаяші, А.; Кан, М.; Окава, Х.; Оцудзі, М.; Зенке, Ю.; Чіба, Т.; Ігарасі, К.; Ямамото, М. Датчик окисного стресу Keap1 функціонує як адаптер для лігази E3 на основі Cul3- для регулювання протеасомної деградації Nrf2. мол. Стільниковий. Biol. 2004, 24, 7130-7139. [CrossRef] [PubMed]
29 Корнеліус К.; Крупі, Р.; Калабрезе, V; Граціано, А.; Мілоне, П.; Пеннісі, Г.; Радак, З.; Калабрезе, EJ; Cuzzocrea, S. Черепно-мозкова травма: окислювальний стрес і нейропротекція. Антиоксид. Окисно-відновний сигнал. 2013, 19, 836-853. [CrossRef] [PubMed]
30. Хоу, З.; Ло, В.; Сонце, X.; Хао, С.; Чжан, Ю.; Сюй, Ф.; Ван, З.; Лю, Б. Насичений воднем фізіологічний розчин захищає від окисного пошкодження та когнітивного дефіциту після легкої черепно-мозкової травми. Brain Res. Бик. 2012, 88, 560-565. [CrossRef] [PubMed]
31. Ансарі, Массачусетс; Робертс, К.Н.; Шефф, С. В. Хід окисного стресу, спричиненого контузією, і синаптичних білків у корі головного мозку на щурячій моделі ЧМТ. J. Нейротравма 2008, 25, 513-526. [CrossRef] [PubMed]
32. Куанг, Р.; Сонце, Ю.; Юань, В.; Лей, Л.; Zheng, X. Захисні ефекти ехінакозиду, одного з фенілетаноїдних глікозидів, на H2O2-індуковану цитотоксичність у клітинах PC12. Планта Мед. 2009, 75, 1499-1504. [CrossRef] [PubMed]
33. Скапаньїні, Г.; Васто, С.; Абрахам Н.Г.; Карузо, К.; Зелла, Д.; Фабіо, Г. Модуляція шляху Nrf2/ARE харчовими поліфенолами: харчова нейропротекторна стратегія для когнітивних і нейродегенеративних розладів. мол. нейробіол. 2011, 44, 192-201. [CrossRef] [PubMed]
34. Керр, Ф.; Софолаадесакін, О.; Іванов Д.К.; Гетліфф, Дж.; Гомес, П.Б.; Бертран, HC; Мартінес, П.; Каллард, Р.; Снорен, І.; Cochem, HM Direct Keap1-Порушення Nrf2 як потенційна терапевтична мішень для хвороби Альцгеймера. PLoS Genet. 2017, 13, e1006593. [CrossRef] [PubMed]
35. Хансен, М.Б.; Нільсен, SE; Берг, К. Повторна перевірка та подальша розробка точного та швидкого методу фарбування для вимірювання росту/знищення клітин. J. Immunol. Методи 1989, 119, 203-210. [CrossRef]
36. Прес, К. Віртуальний скринінг при виявленні ліків; Crc Press: Бока Ратон, Флорида, США, 2005.
37. Мюгге, І.; Мартін Ю.К.; Хайдук, П. Й.; Фесік, С. В. Оцінка оцінки PMF у докінгу слабких лігандів до білка, що зв’язує FK506. J. Med. Chem. 1999, 42, 2498-2503. [CrossRef] [PubMed]
38. Кунц І.Д.; Блейні, Дж.М.; Отлі, SJ; Ленгрідж, Р.; Ferrin, TE Геометричний підхід до взаємодій макромолекула-ліганд. J. Mol. Biol. 1982, 161, 269-288. [CrossRef]
39. М. Д. Е.; Мюррей, CW; Auton, TR; Паоліні, Г.В.; Мі, Р. П. Емпіричні оцінювальні функції: I. Розробка швидкої емпіричної оціночної функції для оцінки афінності зв’язування лігандів у рецепторних комплексах. J. Comput.-Aided Mol. Des. 1997, 11, 425-445.
© 2018 авторів. Ліцензіат MDPI, Базель, Швейцарія. Ця стаття є статтею відкритого доступу, яка розповсюджується згідно з умовами ліцензії Creative Commons Attribution (CC BY) (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
