Ідентифікація сімнадцяти компонентів трави Cistanches Herba, вирощеної в пустелі Тарім, за допомогою ВЕРХ-МС

NAN Ze-dong1 ,ＲEN Hua-zhong1 ,ZHAO Ming-bo2 ,JIANG Yong2 ,TU Peng-fei2*

(1. Професійно-технічний коледж Лешань, Лешань 614000, Китай; 2. Державна ключова лабораторія природних і біоміметичних препаратів, Школа фармацевтичних наук, Науковий центр охорони здоров’я Пекінського університету, Пекін 100191, Китай)

［Анотація］Мета: ідентифікувати хроматографічні компоненти 60% метанольного екстракту вCistanches deserticola Herbaкультивували в пустелі Тарім методом ВЕРХ-МС.метод: Аналіз ВЕРХ-МС проводили на колонці Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 (4,6 мм × 250 мм, 5 мкм). Рухомою фазою був ацетонітрил-0. 1% водного розчину мурашиної кислоти шляхом градієнтного елюювання при швидкості потоку 1 мл·хв - 1, довжина хвилі виявлення 254 нм. Температуру колонки встановлювали на рівні 25 градусів, а об’єм ін’єкції становив 10 мкл. Результат: Шістнадцять хроматографічних піків / сімнадцять компонентів були точно ідентифіковані шляхом порівняння часу утримування, молекулярної маси та фрагментів іонів сполук, які ми виділили та ідентифікували. Ці хроматографічні компоненти були визначені як коніферин, деметил сирингін, сирингін, ехінакозид, цистанозид А, вербаскозид (тубулозид А), цистанозид В, ізовербаскозид, 2'-ацетилцистанозид А, цистанозид С, ізоцистанозид С, 2'-ацетилвербаскозид, тубулозід В, епімеридинозид A, цистанозид K і цистанозид J.

Висновок: Метод ВЕРХ-МС підходить для ідентифікації хроматографічних компонентів 60-відсоткового метанольного екстракту в Cistanches Herba． Це дослідження надасть наукові докази для комплексного аналізу хімічних складових цієї лікарської трави.

［Ключові слова］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; ВЕРХ-МС; метанольний екстракт

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, також відомий як «пустельний женьшень»,є відомим загальнозміцнюючим засобом китайської медицини, який поширений у Внутрішній Монголії, Нінся, Ганьсу та Сіньцзяні Китаю [1].Він має ефект тонізування нирок-ян, покращує есенцію крові, зволожує кишечник і дефекацію. Його зазвичай використовують у клініках для лікування чоловічої імпотенції, жіночого безпліддя, холодного болю в попереку та колінах, застою крові, запору.тощо [2-3].Cistanche deserticola maдо першої частини Китайської фармакопеї (видання 2015 р.) входить висушене м’ясисте стебло Cistanche deserticola та Cistanche tubulosa (4). Наша дослідницька група протягом багатьох років проводила систематичні та поглиблені дослідження рослин Cistanche.Хімічними компонентами рослин Cistanche є в основному фенілетаноїдні глікозиди, крім іридоїдів та їх глікозидів, лігнанів та їх глікозидів, глікозидів бензилового спирту тощо.[5]. Сучасні фармакологічні дослідження показують, що фенілетанолглікозиди, основні компоненти роду, мають нейропротекторну, антиоксидантну, захисну для печінки, антибактеріальну, противірусну, протипухлинну, протизапальну та інші дії [6-11].

Пустельний женьшень

У Китаї,Cistanche deserticolaпоширений у західній Внутрішній Монголії, північному Сіньцзяні та басейні Кайдам у Цинхаї, але не в басейні Тарім на півдні Сіньцзяну. Наприкінці 1990-х років, щоб захистити нафтове родовище Тажонг і контролювати пустелю, штаб-квартира нафтопромислу ввела велику кількість Haloxylon ammo dendron навколо нафтового родовища Tazhong і по обидва боки пустельної дороги, а також прищепила Haloxylon ammo dendron цистанхою, яка була більше 10 років. Завдяки теплому клімату в Південному Сіньцзяні та хорошим умовам крапельного зрошення в олійній базі врожайність цистанчі пустерної дуже висока, а врожайність свіжої цистанчі пустерної досягає понад 500 кг на один мук [8]. Багато хімічних компонентів Cistanche deserticola утворюють велику кількість ізомерів через різні позиції з’єднання замісників. Це створює великі труднощі для ідентифікації хроматографічного піку цього лікарського матеріалу. Важко точно визначити компоненти хроматографічного піку, якщо покладатися лише на LC-MS без мономерних сполук як контролю. Тому є мало літературних повідомлень про цю роботу на ранньому етапі. Автор виділив багато мономерних сполук [9-11] з Cistanche deserticola, що культивується в пустелі Тажонг на ранній стадії. Завдяки цим мономерним сполукам, отриманим на ранній стадії, ВЕРХ часткові хроматографічні піки 60-відсоткового метанольного екстракту Cistanche deserticola були точно ідентифіковані. Це не тільки дозволить уникнути повторної ідентифікації деяких відомих сполук у хімічних складових Cistanche deserticola, але також забезпечить певні посилання для подальших досліджень щодо контролю якості лікарського матеріалу. У цій статті 17 компонентів 60-відсоткового метанольного екстракту Cistanche deserticola ідентифіковано методом ВЕРХ-МС.

Скибочка цистанки десертної

Натисніть тут, щоб переглянути продукти Cistanche

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

1.матеріал

Інструмент ядерного магнітного резонансу Inova-500 (Varian, США); 6320IonTrap LC-MS мас-спектрометр, колонка EclipseXDB-C18 (4,6 мм × 250 мм, 5 мкм) (Agilent, США); Електронні ваги QUINTIX313-1CN типу 1/10000 (Sedaris Division); Ультразвуковий очисник KQ-500DV (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP - Ⅰ Trace Analytical Ultra Pure Water Generation System (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

Усі 39 контрольних речовин, використаних у цьому експерименті, були виділені автором із культивованої в пустелі Cistanche deserticola в Tazhong на ранній стадії, і їх структури були визначені за допомогою ЯМР та інших методів спектроскопії. Структури 39 контрольних зразків були ідентифіковані як Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocyanin B, Cistanche heterophyllin, Isocornicin, Cistanche deserticoside D, Cistanche deserticoside C, Cistanche cymosin, 2 '- ацетил Cistanche deserticoside A, 2' - ацетил Cistanche deserticoside A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glycoside E, Salidroside, 6'- acetyl salidroside, saliside B, syringin, demethyl syringin , ялівець, (2E, 6E) - 3, 7-диметил-8-гідроксиктадієн-1-O- - D-глюкозид, ( плюс ) - сирингін, ( плюс ) - сирингін-4 '- O- - D-глюкопіранозид, ( плюс ) - ізоеукоммінА, евкоммінА, ( плюс ) - монометиловий ефір каніфолі- - D-глюкозид, ларвіцидний-4 ' - O- - D-глюкозид, ларвіцидний-4-O- - D-глюкозид- - D глюкопіранозид, гесперидин A, зона в стороні A, 6-дезоксикатапол. Чистота всіх вищевказаних еталонних речовин становить понад 98.0 відсотків. Ацетонітрил — хроматографічно чистий (DikmaPure, США), вода — ультрачиста вода, а інші реактиви, що використовуються в процесі тестування, — аналітично чисті реактиви виробництва Пекінського хімічного заводу.

Лікарський матеріал, використаний у цьому експерименті, Cistanche deserticola, був зібраний у пустелі Tazhong, Сіньцзян, у листопаді 2010 року. Професор Ту Пенфей зі Школи фармації Пекінського університету ідентифікував його як висушене м’ясисте стебло рослини Leobaceae. Cistanche deserticola. Зразок зберігався в Сучасному дослідницькому центрі традиційної китайської медицини Пекінського університету (номер зразка: CD201011).

Скибочка цистанки десертної

2.Методи та результати

2.1 Приготування розчину порівняння

Візьміть приблизно 1 мг кожного з 39 контрольних зразків, отриманих з Cistanche deserticola на ранній стадії, точно зважте їх, помістіть у мірну колбу об’ємом 5 мл відповідно, розчиніть їх у метанолі та доведіть до шкали, а потім отримайте єдиний контроль. рішення.

2.2 Приготування досліджуваного розчину

Посилаючись на китайську фармакопею, 2015 видання, візьміть приблизно 1 г порошку продукту (через четверте сито), точно зважте його, помістіть у коричневу пляшку на 100 мл, точно додайте 50 мл 60-відсоткового метанолу, утрамбуйте це, добре струсити, зважити масу, замочити протягом 30 хвилин, ультразвукова обробка протягом 40 хвилин, охолодити, знову зважити масу, додати 50 відсотків метанолу, щоб компенсувати зменшену масу, добре струсити, витримати, взяти супернатант, і використовуйте 0,45 мкМ мікропористу мембранну фільтрацію, візьміть безперервний фільтрат, щоб отримати тестовий розчин.

2.3 Умови хроматографії

Хроматографічна колонка AgilentEclipse XDB-C18 (4,6 мм × 250 мм, 5 мкм), довжина хвилі детектування 254 нм, температура колонки 25 градусів; Використовуючи ацетонітрил (A) - 0.1% водного розчину мурашиної кислоти (B) як рухому фазу, градієнтне елюювання (0 - 20хв., 5% - 15% A; 20 - 50 мінімум, 15 відсотків - 30 відсотків A; 50 - 60мін, 30 відсотків - 50 відсотків A; 60 - 70мін, 50 відсотків - 95 відсотків A); Швидкість потоку: 1,0 мл · хв-1, об’єм ін’єкції: 10 мкл.

2.4 Умови мас-спектру

Капілярна температура 350 градусів; Капілярна напруга 3500В; Швидкість потоку сорочкового газу (азоту) 12,0 л · хв-1; Тиск допоміжного газу (азоту) 206,8 кПа; Повний діапазон сканування мас-спектрометрії становить m/z 50~1000; Газ зіткнення гелій, енергія зіткнення вибирається автоматично під час тесту; Зберіть по 1 голці для кожного режиму позитивних і негативних іонів.

2.5 Випробування еталонної речовини

39 еталонних розчинів, приготованих згідно з 2.1, перевіряли в хроматографічних умовах 2.3 і мас-спектрометричних умовах 2.4, і реєстрували їх час утримання та відносну молекулярну масу (Таблиця 1).

2.6 Визначення досліджуваного розчину

Візьміть лікарський матеріал Cistanche deserticola, зібраний у пустельній місцевості Тачжун, Сіньцзян, і приготуйте досліджуваний розчин відповідно до методу, описаного в 2.2. Потім виконайте визначення відповідно до хроматографічних умов, описаних у 2.3, та умов мас-спектрометрії, описаних у 2.4, і визначте його ВЕРХ-хроматограму та мас-спектрометрію в режимі позитивних і негативних іонів (рис. 1-3).

інжир. 1 ВЕРХ хроматограма 60% метанольного екстракту Cistanches Herba

інжир. 2 Позитивна TIC MS хроматограма 60% метанольного екстракту Cistanches Herba

інжир. 3 Негативна TIC MS хроматограма 60% метанольного екстракту Cistanches Herba

2.7 Ідентифікація ВЕРХ хроматограми лікарських матеріалів

За однакових умов (2,3 хроматографічних умов і 2,4 мас-спектрометричних умов) компоненти ідентифікували шляхом порівняння часу утримання та відносної молекулярної маси досліджуваного зразка та контрольного зразка. Конкретний процес ідентифікації піку хроматограми досліджуваного зразка (рис. 1) полягає в наступному.

2.7.1 Ідентифікація хроматографічного піку 1

Час утримання хроматографічного піку 1 становить 16,67 хвилин. У режимі позитивних іонів пік ексимер-іонів m/z365 подається як [M плюс Na] плюс , тоді як у режимі негативних іонів пік ексимер-іонів m/z387 [M плюс COOH] - подано. Відносна молекулярна маса піку 1 визначена як 342. Також наведено фрагмент іона m/z179, який походить від втрати 1 молекули глюкози 163 Да внаслідок розриву глікозидного зв’язку. Відповідно до часу утримування та відносної молекулярної маси контрольної речовини хроматографічний пік 1 ідентифікували як коніферин.

2.7.2 Ідентифікація хроматографічного піку 2

Час утримання хроматографічного піку 2 становить 17,36 хв. У режимі негативних іонів подано піки ексимер-іонів m/z357 [M – H] -, 393 [M плюс Cl] -, а відносна молекулярна маса піку 2 визначена як 358. У той же час, іон фрагмента m/z195 походить від втрати 1 молекули глюкози 163 Да внаслідок розриву глікозидного зв’язку. Хроматографічний пік 2 ідентифікували як деметилсирингін відповідно до часу утримування та відносної молекулярної маси контрольної речовини.

2.7.3 Ідентифікація хроматографічного піку 3

Час утримування хроматографічного піку 3 становить 19,04 хв, пік ексимер-іонів m/z395 [M плюс Na] плюс наведено в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z417 [M плюс HCOO] - наведено в режимі моді негативних іонів, а відносна молекулярна маса піку 3 визначена як 372. У той же час фрагмент іона m/z209 походить від втрати 1 молекули глюкози 163 Да внаслідок розриву глікозидного зв’язку. Хроматографічний пік 3 ідентифікували як сирингін відповідно до часу утримання та відносної молекулярної маси контрольної речовини.

2.7.4 Ідентифікація хроматографічного піку 4

Час утримання хроматографічного піку 4 становить 27,66 хв. Пік ексимер-іонів m/z804 [M плюс NH4] плюс наведено в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z785 [M – H] - наведено в режимі негативних іонів. Визначено, що відносна молекулярна маса піку 4 дорівнює 786. У той же час іон фрагмента m/z623 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули кофеїну 163 Да. У поєднанні з часом утримування та відносною молекулярною масою еталонної речовини хроматографічний пік 4 ідентифікували як ехінацею.

2.7.5 Ідентифікація хроматографічного піку 5

Час утримання хроматографічного піку 5 становить 31,48 хв, пік ексимер-іонів m/z818 [M плюс NH4] плюс наведено в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z799 [M – H] - наведено в режимі режимі негативних іонів, а відносна молекулярна маса піку 5 визначена як 800. У той же час іон фрагмента m/z637 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули кофеїну 163Da. Комбінуючи час утримування та відносну молекулярну масу контрольної речовини, було підтверджено, що хроматографічний пік 5 був глікозидом А цистанхи.

Таблиця 1 Молекулярна маса та час утримання( tＲ ) 39 стандартних сполук

2.7.6 Ідентифікація хроматографічного піку 6

Час утримання хроматографічного піку 6 становить 34,17 хв. Два піки ексимерних іонів m/z846642 [M плюс NH4] плюс подано в режимі позитивних іонів, а два піки ексимерних іонів m/z827623 [M – H] - також подано в режимі негативних іонів. Припускають, що пік 6 може містити дві сполуки з відносною молекулярною масою 828624. У той же час іон-фрагмент m/z665461 походить від втрати 1 молекули кофеїну на розрив ефірного зв’язку 163 Да, а іон-фрагмент m /z622 походить від розриву зв’язку ацетилового ефіру. Ці дві сполуки були виділені та об’єднані з часом утримування та відносною молекулярною масою контрольної речовини, хроматографічний пік 6 був сумішшю цимицифугарину та антоціаніну А.

2.7.7 Ідентифікація хроматографічного піку 7

Час утримання хроматографічного піку 7 становить 35,34 хв. Пік ексимер-іонів m/z832 [M плюс NH4] плюс , 837 [M плюс Na] плюс подано в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z813 [M – H] - подано в режимі негативних іонів , а відносна молекулярна маса піку 7 дорівнює 814. У той же час іон фрагмента m/z637 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули ферулової кислоти 177Da. У поєднанні з часом утримування та відносною молекулярною масою контрольної речовини хроматографічний пік 7 було ідентифіковано як глікозид В цистанхи.

2.7.8 Ідентифікація хроматографічного піку 8

Час утримання хроматографічного піку 8 ​​становить 36,17 хв, пік ексимер-іонів m/z647 [M плюс Na] плюс наведено в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z623 [M – H] - наведено в режимі моді негативного іона, а відносна молекулярна маса піку 8 ​​визначена як 624. У той же час наведено фрагмент іона m/z461, який походить від розриву складноефірного зв’язку та втрати 1 молекули кофеїну групи 163 Да. У поєднанні з часом утримування та відносною молекулярною масою еталонної речовини хроматографічний пік 8 ідентифікували як гетероценозид.

2.7.9 Ідентифікація хроматографічного піку 9

Час утримання хроматографічного піку 9 становить 38,20 хвилин. Піки ексимерних іонів m/z860 [M плюс NH4] плюс , 865 [M плюс Na] плюс подано в режимі позитивних іонів, а піки ексимерних іонів m/z841 [M – H ] -, 877 [M плюс Cl] - дані в режимі негативних іонів. Визначено, що відносна молекулярна маса піку 9 дорівнює 842. У той же час іон фрагмента m/z679636 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули кофеїну 163 Da та 1 молекули ацетилу 43 Da. Час утримування та відносна молекулярна маса контрольної речовини є відповідними, а ідентифікаційний пік 9 є 2'-ацетилцистанхглікозидом А.

2.7.10 Ідентифікація кольоровостітографічна стак 10

Час утримання хроматографічного піку 10 становить 39,04 хв. Пік ексимер-іонів m/z656 [M плюс NH4] плюс, 661 [M плюс Na] плюс подано в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z637 [M – H] -, 673 [M плюс Cl] - подається в режимі негативних іонів. Визначено, що відносна молекулярна маса піку 10 дорівнює 638. У той же час іон фрагмента m/z475 походить від втрати 1 молекули кофеїну на розрив зв’язку 163 Да. Час утримування та відносна молекулярна маса еталонної речовини є відповідними, а ідентифікаційний пік 10 є Cistanche C.

2.7.11 Ідентифікація хроматографічного піку 11

Час утримання хроматографічного піку 11 становить 40,82 хв. Пік ексимер-іонів m/z661 [M плюс Na] плюс, 677 [M плюс K] плюс подано в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z637 [M – H] -, 673 [M плюс Cl] - подається в режимі негативних іонів. Можна визначити, що відносна молекулярна маса піку 11 становить 638. У той же час іон фрагмента m/z475 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули кофеїну 163 Да. Поєднуючи час утримання та відносну молекулярну масу контрольної речовини, хроматографічний пік 11 ідентифікували як ізоцистанховий глікозид C.

2.7.12 Ідентифікація хроматографічного піку 12

Час утримання хроматографічного піку 12 становить 41,48 хв. Пік ексимер-іонів m/z684 [M плюс NH4] плюс , 689 [M плюс Na] плюс подано в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z665 [M – H] - подано в режимі негативних іонів . Можна визначити, що відносна молекулярна маса піку 12 становить 666. У той же час показано, що іон-фрагмент m/z503460 походить від втрати розриву складноефірного зв’язку 1 молекули кофеїну 163 Да та 1 молекули ацетилу 43 так Відповідно до часу утримування та відносної молекулярної маси контрольної речовини хроматографічний пік 12 ідентифікували як 2'-ацетилцеліаозид.

Експеримент Cistanche deserticola

2.7.13 Ідентифікація хроматографічного піку 13

Час утримання хроматографічного піку 13 становить 44,29 хв, пік ексимер-іонів m/z689 [M плюс Na] плюс наведено в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z665 [M – H] - наведено в режимі моді негативних іонів, а відносна молекулярна маса піку 13 становить 666. У той же час показано, що іон-фрагмент m/z503460 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули кофеїну 163 Да та 1 молекули ацетилу 43 так У поєднанні з часом утримування та відносною молекулярною масою еталонної речовини хроматографічний пік 13 було ідентифіковано як антоціан B.

2.7.14 Ідентифікація хроматографічного піку 14

Час утримання хроматографічного піку 14 становить 46,67 хв. Пік ексимер-іонів m/z675 [M плюс Na] плюс наведено в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z651 [M – H] - наведено в режимі негативних іонів. Відносна молекулярна маса піку 14 становить 652. У той же час іон фрагмента m/z475 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули групи ферулової кислоти 177Da. У поєднанні з часом утримування та відносною молекулярною масою контрольної речовини хроматографічний пік 14 ідентифікували як епімеридинозид A.

2.7.15 Ідентифікація хроматографічного піку 15

Час утримання хроматографічного піку 15 становить 49,90 хв. Пік ексимер-іонів m/z698 [M плюс NH4] плюс, 703 [M плюс Na] плюс подано в режимі позитивних іонів, а пік ексимер-іонів m/z679 [M – H] -, 715 [M плюс Cl] - подається в режимі негативних іонів. Відносна молекулярна маса піку 15 становить 680. У той же час іон фрагмента m/z517474 походить від втрати ефірного зв’язку 1 молекули кофеїну 163 Da та 1 молекули ацетилу 43 Da. Хроматографічний пік 15 ідентифікували як глікозид цистанхи K на основі часу утримування та відносної молекулярної маси контрольної речовини.

2.7.16 Ідентифікація хроматографічного піку 16

Час утримання хроматографічного піку 16 становить 55,36 хвилин. У режимі позитивних іонів подано пік ексимер-іонів m/z717 [M плюс Na] плюс, тоді як у режимі негативних іонів піки ексимер-іонів m/z693 [M – H] -, 729 [M плюс Cl] - наведено, що призводить до відносної молекулярної маси 694 для піку 16. У той же час показано, що іон-фрагмент m/z517474 походить від втрати розриву складноефірного зв’язку 1 молекули ферулової кислоти групи 177 Da та 1 молекули ацетильна група 43 Да. У поєднанні з часом утримування та відносною молекулярною масою контрольної речовини хроматографічний пік 16 ідентифікували як глікозид цистанхи J. Хроматографічні піки 60-відсоткового метанольного екстракту Cistanche deserticola ідентифікували за допомогою ВЕРХ-МС у поєднанні з відносною молекулярною масою, утриманням час та іон фрагмента відокремленої контрольної речовини. Результати показали, що 17 компонентів 16 хроматографічних піків були точно ідентифіковані (Таблиця 2).

Таблиця 2 Ідентифіковані хроматографічні піки Cistanches Herba та еталонних стандартних сполук

3 .Обговорення

3.1 Вибір методу підготовки досліджуваного зразка

Основною метою цього дослідження є ідентифікація піків HPLC Cistanche deserticola. Тому вибір розчинника для екстракції та методу екстракції ґрунтується на здатності отримати більше піків ВЕРХ. Дослідницька група провела довготривалі дослідження Cistanche deserticola та провела багато роботи з аналізу якості. У цій статті розчинник для екстракції та метод екстракції Cistanche deserticola також були обрані на основі попередньої аналітичної роботи дослідницької групи та Китайської фармакопеї (видання 2015 року). Нарешті, як метод екстракції було обрано ультразвукову екстракцію розчинником 60% метанолу протягом 40 хв.

3.2 Вибір умов ВЕРХ-МС

Вибір хроматографічної колонки в цій статті базується на аналізі якості Cistanche deserticola на ранній стадії дослідницької групи та дослідженні AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 мм × 250 мм, 5 мкм), DionexC18 (4,6 мм × 250 мм,5). мкм), ThermoC18 (4,6 мм × 250 мм, 5 мкм) Хроматографічна колонка, нарешті виберіть хроматографічну колонку AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 мм × 250 мм, 5 мкм) Має хороший ефект розділення Cistanche deserticola; 39 еталонних речовин включають фенілетаноїд, лігнани та фенілпропаноїд, тому довжина хвилі виявлення становить 254 нм; У той же час вплив рухомої фази, такої як метанол-вода, ацетонітрил-вода, метанол-0.1% фосфорної кислоти, води, ацетонітрилу-0.1% мурашиної кислоти, води на хроматографічне розділення та масу було досліджено спектрометричне виявлення, і ацетонітрил-0.1% води мурашиної кислоти було обрано в якості рухомої фази.

3.3 Резюме

Метод, встановлений у цьому дослідженні, точно ідентифікував 17 компонентів із 16 хроматографічних піків 60-відсоткового метанолу.екстрактзCistanche deserticola. 

Порошок екстракту цистанчі

Результати дослідження не тільки мають певну еталонну цінність для подальшого аналізу якості лікарського матеріалу, але й можуть уникнути певної повторюваної роботи з ідентифікації структури відомих сполук лікарського матеріалу. Однак, загалом, ідентифікованих хроматографічних піків порівняно небагато, а багато хроматографічних піків не ідентифіковано, оскільки вони не були віднесені до еталонної речовини. Більшість ідентифікованих компонентів є фенілетаноїдними глікозидами, тоді як лігнани зустрічаються рідко. Це може бути тому, що метод екстракції, згаданий у виданні Китайської фармакопеї 2015 року, в основному спрямований на фенілетаноїдні глікозиди, або тому, що вміст ехінакозиду та коліформних сполук в екстракті цього лікарського матеріалу є занадто високим, що ускладнює його для виявлення інших сполук з невеликим вмістом. Конкретні причини потребують додаткового з’ясування.

[Посилання]

[1] Редакційний комітет Флори Китаю. Флора Китаю [М]. Пекін: Science Press, 1990: 86

[2] Ян Цзюньшань. Пустельний женьшень -- Cistanche deserticola [J]. Китайський фармацевтичний журнал, 2011, 46 (12): 881.

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai та ін. Дослідження Cistanche deserticola та його промисловий розвиток [J]. Китайський фармацевтичний журнал, 2011, 46 (12): 882-887

[4]Національна фармакопейна комісія. Фармакопея КНР. Частина I [M]Beijing: China Pharmaceutical Science and Technology Press, 2015: 135

[5] JIANG Y,TU PF. Аналіз хімічних складових у видів Cistanche ［J］． J Chromatogr A, 2009, 1216 (11): 1970-1979.

[6] PAN J, ЮАНЬ CS, LIN CJ та ін. Фармакологічна дія та механізми природних фенілпропаноїдних глікозидів［J］． Pharmazie, 2003, 58 (11): 767-775.

[7] ФУ ГМ, ПАН ГХ, Вонг І. Природні фенілетаноїдні глікозиди: потенційні джерела для нових терапевтичних засобів［J］． Curr Med Chem, 2008, 15 (25): 2592-2613.

[8] Род Мей, Лонг Мей, Ду Венцзін та ін. Механізм антиостеопорозного ефекту екстракту Cistanche deserticola на мишах M KOOPG ［ J ］. Китайський експеримент Journal of Prescriptions, 2016, 22 (10): 138-142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min та ін. Вплив полісахариду Cistanche deserticola на індуковане D-галактозою старіння Вплив експресії CREB у мишей старої моделі ［ J ］. Журнал китайських експериментальних рецептів, 2014, 20 (20): 137-141

[10] Тао Іцунь, Лі Цзяньїн, Сюй Юнхуа та ін. Вплив фенілетанозиду Cistanche deserticola на щурів. Профілактика та лікування висотного набряку легенів ［ J ］. Китайський журнал експериментальних рецептів, 2014, 20 (15): 134-138．

[11] Чжоу Хайтао, Цао Цзяньмінь, Лінь Цян. Cistanche deserticola на виснажену плавальну здатність щурів і антиоксидантну здатність міокарда мітохондрій ［ J ］. Китайська експериментальна формула Journal of Science, 2012, 18 (6): 229-233

[12] NAN ZD, ZHAO MB, ZENG KW та ін. Протизапальні іридоїди зі стебел Cistanche deserticola, вирощених у пустелі Тарім ［J］． Chin J Nat Med, 2016, 14 (1): 61-65.

[13] NAN ZD, ZENG KW, SHI SP та ін. Фенілетаноїдні глікозиди з протизапальною дією зі стебел Cistanche deserticola, вирощених у пустелі Тарім ［J］． Fitoterapia, 2013, 89: 167-174.

[14] Нань Цзедун, Чжао Мінбо, Цзян Юн та ін. Хімічний склад пустельної цистанки, культивованої в Тачжуні, дослідження складу ［ J ］. Китайський журнал традиційної китайської медицини, 2013, 38 (16):2665-2670．

[15] Нань Цзедун, Чжао Мінбо, Цзян Юн та інші Лігнани [J]. Китайський журнал традиційної китайської медицини, 2015, 40 (3):463-468．