Ідентифікація EST, що реагують на пероксид водню, залучених до біосинтезу фенілетаноїдних глікозидів у культурі клітин Cistanche Salsa
Mar 17, 2022
Контакт: Одрі Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Електронна пошта:audrey.hu@wecistanche.com
J. CHEN та ін
Анотація
Перекис водню є ефективним абіотичним еліситором, який може індукувати біосинтез вторинного метаболіту в рослинах. Показано, що в суспензійній культурі клітин солестійкої лікарської рослиниЦистанхесальса, виробництво біоактивних компонентівфенілетаноїдглікозиди(PeGs) збільшився після обробки H2O2. Ідентифікувати гени, пов'язані з PeG(фенілетаноїдглікозиди)біосинтезу, на який впливає H2O2, ми сконструювали бібліотеку супресивної субтрактивної гібридизації генів, що реагують на H2O2, використовуючиЦистанхесальсаклітинної лінії та ідентифікували 105 експресованих міток послідовності (EST) і 85 генів. Функціональна анотація бібліотеки EST та аналіз онтології генів показали гени, пов’язані з різними реакціями на стрес, біосинтезом вторинних метаболітів і регуляцією транскрипції. Серед них ми ідентифікували два гени, пов'язані з PeG(фенілетаноїдглікозиди)шлях біосинтезу (4-кумараткоензим А лігаза та циннамат 4-гідроксилаза) і два транскрипційні фактори типу WRKY. Експресії вибраних генів після обробки H2O2 аналізували за допомогою RT-qPCR. Рання посилена транскрипція PeG(фенілетаноїдглікозиди)гени шляху біосинтезу після лікування виявили, що H2O2 індукує PeG(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез шляхом посилення його ключових генів.
Додаткові ключові слова: циннамат{0}}гідроксилаза, 4-кумараткоензим А лігаза, придушення субтрактивної гібридизації.Цистанхесальса. фенілетаноїдглікозиди.
вступ
Цистанхесальсаце багаторічна рослина, що паразитує на корені Haloxylos ammodendrun, і росте в пустельних районах західного Китаю. Протягом століть,Цистанхевид використовувався як традиційна фітотерапія (Wang et al. 2012). Біоактивні компоненти єфенілетаноїдглікозиди(PeGs), які мають чудовий вплив на очищення від активних форм кисню (АФК), захист від радіації, підвищення імунітету та запобігання старінню (Nan та ін. 2013). PeGs(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез вЦистанхеініціюється з фенілаланіну (рис. 1 Додаток), а синтезована кофеїнова кислота далі глікозильується з утворенням різних PeG(фенілетаноїдглікозиди)(Ванг та ін. 2012). Три основні PeG(фенілетаноїдглікозиди), ехінакозид, актеозид і 2'-ацетилактеозид вважаються найбільш активними компонентами вЦистанхе(Кобаяші та ін. 1984). Щоб покращити їх вміст уЦистанхекультурі клітин, були протестовані різні еліситори, включаючи хітозан, путресцин, Ag plus та осмотичний стрес (Ouyang та ін. 2005a,b, Cheng та ін. 2005, 2006, Liu та ін. 2007, Liu та Cheng 2008). Однак гени, задіяні в PeGs(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез вЦистанхе, головним чином гени шляху метаболізму фенілаланіну, були ідентифіковані рідко. Лише ген, що кодує фенілаланін-аміак-ліазу (PAL), нещодавно був ідентифікований у Cistanche deserticola (Hu et al. 2011). Інші гени, що кодують, наприклад, циннамат{2}}гідроксилазу (C4H), яка може каталізувати перетворення циннамату в кумарову кислоту, і 4-кумараткоензим А-лігазу (4CL), важливий ген для лігніну та флаваноїдів біосинтезу, не виявлено вЦистанхе.
Ми використовували культуру клітинЦистанхесальсавивчити PeGs(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез і експресія відповідних генів. Ми також досліджували вплив ефективного еліситора H2O2 на PeG(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез. Крім того, знайти ранні чутливі гени, задіяні в PeG(фенілетаноїдглікозиди)біосинтезу, ми провели супресійну субтрактивну гібридизацію (SSH) для створення бібліотеки кДНК H2O2-чутливих генів.
Рис. 1. Відносна експресія генів, визначена за допомогою RT-qPCR після обробки H2O2. Фактор транскрипції CsWRKY1 - WRKY (Contig07), CsC4H1 - циннамат 4-гідроксилаза (Contig09), Cs4CL1 - 4-кумарат: лігаза (Contig03), CsHSP1 - білок теплового шоку 70 кДа (Contig 01) і CsSOD1 - супероксиддисмутаза (Contig16). Клітини обробляли 80 мкг dm-3 H2O2 у рідкому середовищі протягом 2 годин і експресії порівнювали з контролем, обробленим водою. Значить плюс - SD трьох біологічних повторів; * - P < 0,05,="" **="" -="" p=""><>
Матеріали та методи
Лінія клітин CS2001 була створена з пелюстокЦистанхесальса(CA Mey.) Бек зібраний у провінції Нейменгу та субкультивований. Метод культивування був подібний до протоколу, опублікованого раніше (Liu et al. 2007). Як правило, тверде середовище Murashige і Skoog (1962; MS) використовувалося для субкультури та рідке середовище для PeGs(фенілетаноїдглікозиди)біосинтезу (це було модифіковане середовище MS, додане 30 г дм-3 глюкози та 2.0 мг дм-3 індол{-3-оцтової кислоти). Для обробки H2O2 5.0 ± 0,2 г клітин у період швидкого росту, як правило, через 20–30 днів після їх пересіву в тверде середовище, інокулювали в 50 см3 рідкого середовища в колбі Ерленмейера об’ємом 250 см3 і культивували в темряві з або без різних концентрацій H2O2. PeGs(фенілетаноїдглікозиди)вміст після 10-денної індукції H2O2 аналізували відповідно до опублікованого раніше методу (Liu et al. 2007), заснованого на обернено-фазовій високоефективній рідинній хроматографії з градієнтним елююванням метанолом.
Клітини через 2 години після обробки H2O2 збирали із середовища фільтрувальним папером за допомогою лійки Бюхнера, потім заморожували в рідкому азоті та подрібнювали до порошку. Кожні 2 г клітинного порошку лізували сумішшю 1 см3 2-меркаптоетанолу, 1 см3 200 г дм{{10}} саркозилу, і 8 см3 буфера GTC (5 М гуанідиній ізотіоціанат, 62,5 мМ Трис-HCl, рН 8,0, 6,25 мМ ЕДТА, рН 8,0, 5 мМ тіосечовина і 10 мМ дитіотреїтол). Потім клітини інкубували на льоду протягом 15 хвилин, потім додавали 1/3 об’єму 8,5 М CH3COOK, pH 6,0, і клітини інкубували на льоду протягом 15 хвилин, а потім центрифугували при 15 000 g протягом 15 хвилин . Супернатант додавали до рівного об’єму ізопропанолу для осадження загальної РНК. Загальну РНК додатково очищали міні-набором RNeasy (Qiagen, Hilden, США) згідно з інструкціями виробника. Матричну РНК виділяли із тотальної РНК за допомогою набору Oligotex mRNA midi (Qiagen).
фенілетаноїдглікозидивЦистанхеСальса
Бібліотека SSH була створена з контрольних і 30% H2O2-виявлених зразків клітин через 2 години після виявлення за допомогою ПЛР-селектного набору для віднімання кДНК (Clontech, Mountain View, США). Для створення бібліотеки продукти очищали окремо за допомогою набору для очищення гелю (Qiagen) і клонували у вектор pGEM за допомогою набору для клонування TA (Tiangen, Пекін, Китай). Плазміди з незалежних клонів виділяли та секвенували за допомогою праймера Т7. Усі послідовності експресованих міток послідовності (EST) з бібліотеки (з видаленими векторними послідовностями) використовували для складання контига за допомогою CAP3 (http://doua.prabi.fr/software/cap3). EST були згруповані в контиги та синглетони; їх використовували для пошуку гомології за допомогою програми BLASTx в NCBI (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov). Потім послідовності були анотовані, проаналізовані та класифіковані відповідно до термінів генної онтології (GO) за допомогою Blast2GO (http://www.blast2go.com).
Кількісну полімеразну ланцюгову реакцію в реальному часі (RT-qPCR) проводили відповідно до Bustin et al. (2009). Зразки кДНК синтезували за допомогою набору реагентів PrimeScript RT (Takara, Далянь, Китай) з 0,5 мкг загальної РНК. RT-qPCR проводили з використанням наборів SYBR Premix Ex Taq II та ROX plus (Takara) на системі ПЛР у реальному часі ABI 7300 (Applied Biosystems, Foster City, США) з трьома технічними повторами. Праймери були розроблені за допомогою онлайн-програмного забезпечення Primer3 відповідно до інструкцій, наданих Takara; праймери, використані в цьому дослідженні, перераховані в таблиці 1 Suppl. Експресії генів нормалізували до 18S РНК, експресія якої була стабільною у всіх зразках.
Результати аналізували за допомогою R версії 3.1.1, значущість відмінностей перевіряли t-критерієм Стьюдента.
Результати
Перекис водню індукує біосинтез усіх трьох основних PeG(фенілетаноїдглікозиди)вЦистанхесальсасуспензійних клітин (табл. 1), але без очевидного впливу на ріст клітин (рис. S2). Вміст ехінакозиду підвищувався вже після обробки 10 мкг дм-3 H2O2 (P < 0.05),="" вищий="" приріст="" зафіксовано="" після="" 20="" мкг="" дм-3="" -3="" обробка="" h2o2="" (p="">< 0,01),="" і="" найбільше="" збільшення="" спостерігалося="" після="" обробки="" 40,="" 80="" і="" 160="" мкг="" дм-3="" h2o2.="" подібні="" результати="" показані="" для="" актеозиду,="" але="" його="" вміст="" досяг="" піку="" після="" обробки="" 80="" мкг="" dm-3="" h2o2.="" біосинтез="" 2'-ацетилактеозиду="" був="" менш="" чутливим="" до="" обробки="" h2o2;="" достовірне="" підвищення="" його="" вмісту="" (p="">< 0,05)="" спостерігалося="" при="" концентраціях="" h2o2="" понад="" 40="" мкг="" дм-3.="" після="" обробки="" 80="" мкг="" dm-3="" h2o2="" кількість="" усіх="" трьох="" основних="">(фенілетаноїдглікозиди)значно збільшився (P < 0.01)="" порівняно="" з="" контролем.="" тому="" цю="" концентрацію="" використовували="" в="" подальших="">
Щоб створити бібліотеку, збагачену ранніми чутливими генами, які посилено регулюються H2O2, ми використали кДНК зЦистанхесальсасуспензійні клітини, оброблені 80 мкг dm-3 H2O2 протягом 2 год. Однопрохідне секвенування 129 рекомбінантних клонів у бібліотеці SSH дало 105 чистих EST після виключення векторної послідовності. Ці чіткі EST були використані для збирання CAP3, і було згенеровано 18 контигів і 67 синглтонів (Таблиця 2). Таким чином, у цій бібліотеці виділено 85 генів. Середня довжина чистих 105 EST становила 527 bp, що є достатнім для функціональної класифікації на основі схожості послідовностей.
фенілетаноїдглікозидивЦистанхеСальса
Усі 85 генів, отриманих у бібліотеці, були отримані за допомогою BLASTx із бази даних без надлишкових білків GenBank для подібності послідовності (E-значення менше або дорівнює 0.001). Двадцять один ген не виявив збігів у базі даних, вони могли бути специфічними дляЦистанхесальса. Результати за допомогою BLASThits були імпортовані в програмне забезпечення Blast2GO для подальшого аналізу збагачення шляхів GO та KEGG. З 64 генів з BLAST-хітами 50 були анотовані відповідно до опису гомологічних генів інших видів. Анотовані гени були названі відповідно до опису BLAST-хітів. Аналіз GO (рис. 3 Додаток) показує, що серед цих 50 генів було 14 генів, залучених у відповіді на подразники, і понад 30 генів, пов’язаних з метаболічними процесами (таблиці 1 і 2). Серед цих генів було виділено два гомологи генів шляху біосинтезу PeG, як і очікувалося: 4-кумарат-коензим А-лігаза (під назвою Cs4CL1: Contig03) і циннамат-{13}}гідроксилаза (під назвою CsC4H1: Contig14). Крім того, була проведена RT-qPCR для підтвердження індукованих експресій генів з бібліотеки після обробки H2O2.
Щоб підтвердити, що важливі гени, ідентифіковані з бібліотеки SSH, реагували на обробку H2O2, експресії двох PeG(фенілетаноїдглікозиди)гени, пов’язані зі шляхом біосинтезу (Cs4CL1, CsC4H1), два гени, індуковані АФК (CsSOD1: Contig 16, CsHSP1: CISTH099), і один ген, подібний фактору транскрипції родини WRKY (CsWRKY1: Contig 07), були виміряні за допомогою RT-qPCR після лікування з H2O2 (рис. 1). Експресії CsC4H1, Cs4CL1, CsSOD1 і CsWRKY1 підвищувалися більш ніж у 15-раз, 3-раз, 45-раз і 4-раз відповідно через 2 години після H2O2 лікування. Експресія CsHSP1 була змінена лише в 1,8 рази після обробки H2O2.
Хід експресії CsWRKY1, CsC4H1 і Cs4CL1 після обробки H2O2 був додатково проаналізований за допомогою RT-qPCR (рис. 2). Експресії CsC4H1 та Cs4CL1 були значно збільшені (більш ніж у 80-рази та 50-рази, відповідно) після 16-год обробки, а потім знизилися через 32 години. Експресія CsWRKY1 посилювалася більш ніж у 20-рази через 4 години, а потім зменшувалася через 8 годин (рис. 2).
Рис. 2. Відносна експресія CsWRKY1 (A), CsC4H1 (B) і Cs4CL1 (C) у різний час після обробки 80 ug dm-3 H2O2. Вирази були нормалізовані до контролю; (оброблені водою). Значить плюс - SD трьох біологічних повторів; * - P < 0.05,="" **="" -="" p=""><>
Обговорення
Перекис водню є відомим рослинним еліситором, який виявляє різноманітну дію на рослини. Подібно АФК, він може індукувати систему поглинання АФК, що складається з супероксиддисмутази, каталази, пероксидаз тощо, і служить вихідним сигналом солі, осмотичної та дегідратації.
стреси (Ві та ін. 2006, Кар 2011, Фурлан та ін. 2013, Сатіярадж та ін. 2014). Було висловлено припущення, що генерація H2O2 в рослинах супроводжується індукованим біосинтезом вторинного метаболіту вЦистанхесальсакультура клітин. Як і очікувалося, наші результати показують, що PeGs(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез вЦистанче сальсакультуру клітин індукували після обробки H2O2 (табл. 1). Вміст трьох основних PeG(фенілетаноїдглікозиди)збільшується після обробки H2O2, що вказує на його ключову роль у біосинтезі PeG. Гени, збагачені бібліотекою SSH, додатково припустили її вплив на PeG(фенілетаноїдглікозиди)індукція біосинтезу вЦистанче сальса.
Багато відомих H2O2-реагуючих генів, таких як аскорбатпероксидаза (CISTH069, Karyotou and Donaldson 2005), h-хіноноксидоредуктаза (CISTH125, Bello та ін. 2001), CsSOD1, CsHSP1 (Baruah та ін. 2014), і гени відповіді на хворобу стійкості (Contig10, Nanda, et al. 2010), були збагачені бібліотекою SSH (Таблиця 3, Додаток до Таблиці 2). Деякі з цих типових генів, що реагують на АФК, з індукованою експресією після обробки H2O2 були додатково підтверджені RT-qPCR (рис. 1 і 2), що вказує на те, що тут була створена кваліфікована бібліотека SSH. Два гени шляху біосинтезу PeG, CsC4H1 і Cs4CL1, також були знайдені в цій бібліотеці, і експресія цих двох генів була індукована обробкою H2O2 залежно від часу (рис. 2). Це свідчить про те, що обробка H2O2 викликала PeGs(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез на генетичному рівні через регуляцію генів шляху PAL. Однак PAL та інші гени біосинтезу PeGs (Wang et al. 2012) не були ідентифіковані в бібліотеці SSH; це може бути тому, що бібліотека не була належним чином упорядкована. Зв'язок між індукованими експресіями CsC4H1 і Cs4CL1 і збільшеним біосинтезом PeG після обробки H2O2 повинен бути з'ясований шляхом подальшого аналізу.
На додаток до генів шляху PAL, індукованих лікуванням H2O2, у бібліотеці SSH було знайдено два транскрипційні фактори сімейства WRKY (CsWRKY1, CsWRKY2) (таблиця 3 і таблиця 2, доповнення), а експресія, індукована CsWRKY1, була підтверджена RT-qPCR . Його експресія реагувала на обробку H2O2 раніше, ніж експресія двох генів шляху PAL, Cs4CL1 і CsC4H1 (рис. 2). Згідно з попередніми дослідженнями, спільна експресія деяких факторів транскрипції WRKY та генів шляху PAL спостерігалася в рисі (Gupta та ін. 2012). Крім того, експресія гена PAL посилено регулюється в мутанті з надмірною експресією OsWRKY03 (Liu et al. 2005). Вищезазначені два транскрипційні фактори сімейства WRKY також можуть брати участь у PeG(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез вЦистанхесальса. Цікаво, що EST, пов’язані з дегідратацією (CISTH067, CISTH064), були знайдені в бібліотеці SSH, що може припустити, що лікування H2O2 було пов’язане з експресією генів, що реагують на дегідратацію вЦистанхесальсаяк це спостерігалося в інших рослинах (Schmidt et al. 2013, Zhou et al. 2013). Один ген, пов’язаний із передачею сигналів гібереліну (GA), подібний рецептору гібереліну gid1b (CISTH092), був ідентифікований у бібліотеці SSH, що свідчить про зв’язок між передачею сигналів GA та обробкою H2O2 уЦистанхесальса, про що також повідомлялося в ячмені (Bahin et al. 2011). Однак необхідні додаткові дослідження, щоб підтвердити, чи пов’язані ці гени з PeG(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез. Крім генів, згаданих вище, створена тут бібліотека SSH також представляє гени з BLAST-попаданнями або без них. Це покращує наше розуміння впливу H2O2 на C. salsa і насамперед надає інформацію про його гени, залучені до біосинтезу PeG.
На закінчення ми оцінили вплив H2O2 на PeG(фенілетаноїдглікозиди)індукція вЦистанхесальсакультура клітин. Бібліотека SSH була створена після обробки H2O2, і експресія вибраних генів була підтверджена RT-qPCR. Було ідентифіковано два гени, пов’язані зі шляхом біосинтезу PeG, та інші гени, що реагують на H2O2-. Ці відкриття розширять наше розуміння H2O2-спричинених PeG(фенілетаноїдглікозиди)біосинтез вЦистанхесальсана молекулярному рівні, надаючи інформацію для маніпулювання генамиЦистанхесальсакультури клітин для покращення PeG(фенілетаноїдглікозиди)виробництва.
З: «Ідентифікація EST, що реагують на пероксид водню, залучених до біосинтезу фенілетаноїд глікозиду в культурі клітин Cistanche salsa»J. CHEN та ін.
--- BIOLOGIA PLANTARUM 59 (4): 695-700, 2015 J. CHEN та ін. DOI: 10.1007/s10535-015-0541-y
Список літератури
Bahin, E., Bailly, C., Sotta, B., Kranner, I., Corbineau, F., Leymarie, J.: Взаємозв’язок між активними формами кисню та гормональними сигнальними шляхами регулює стан спокою зерна в ячмені. - Навколишнє середовище рослинної клітини. 34: 980-993, 2011.
Баруа, К., Норузіталлаб, П., Лінаяті, Л., Соргелос, П., Боссі, р.: Активні форми кисню, що утворюються продуктом, що індукує білок теплового шоку (Hsp), сприяють утворенню Hsp70 і Hsp{{1} }опосередкований захисний імунітет Artemia franciscana проти патогенних вібріонів. - Dev. комп. Immunol. 46: 470-479, 2014.
Белло, Р.І., Гомес-Діас, К., Наварро, Ф., Алькаін, Ф.Дж., Віллалба, Дж.М.: Експресія NAD(P)H: хіноноксидоредуктази 1 у клітинах HeLa роль перекису водню та фаза росту. - J. біол. Chem. 276: 44379-44384, 2001.
Bustin, SA, Vandesompele, J., Pfaffl, MW: Стандартизація qPCR та RT-qPCR. - Жене. інж. Біотехнологія. Новини 29: 40-43, 2009.
Cheng, XY, Wei, T., Guo, B., N, I W., Liu, CZ:Цистанхесуспензійні культури клітин deserticola:фенілетаноїдглікозидибіосинтез і антиоксидантна активність. - Process Biochem. 40: 3119-3124, 2005.
Cheng, XY, Zhou, HY, Cui, X., Ni, W., Liu, CZ Поліпшенняфенілетаноїдглікозидибіосинтез вЦистанхесуспензійні культури клітин deserticola на хітозановому елісіторі. – Дж. Біотехнолог. 121: 253-260, 2006.
Фурлан, А., Ллейнс, А., Луна, В., Кастро, С.: Абсцизова кислота опосередковує утворення перекису водню в арахісі, викликане водним стресом. - біол. Рослина. 57: 555-558, 2013.
Гупта, С.К., Ра,і А.К., Канвар, С.С., Чанд, Д., Сінгх, Н.К., Шарма, Т.Р.: Єдиний функціональний ген стійкості до вибухів Pi54 активує складний захисний механізм у рису. - J. досвід. Бот. 63: 757-772, 2012.
Hu, GS, Jia, JM, Hur, YJ, Chung, YS, Lee, JH, Yun, DJ, Chung, WS, Yi, GH, Kim, TH, Kim, DH: Молекулярна характеристика гена фенілаланін-аміак-ліази зЦистанхеdeserticola. - Мол. Biol. Доповідь 38: 3741-3750, 2011.
Кар, РК: Реакція рослин на водний стрес: роль активних форм кисню. - Сигнальна поведінка рослин 6: 1741-1745, 2011.
Karyotou, K., Donaldson, RP: Аскорбатпероксидаза, поглинач перекису водню в гліоксисомних мембранах. - Дуга h. Біохім. біофіз. 434: 248-257, 2005.
Кобаясі Х., Карасава Х., Міясе Т., Фукусіма С.: Дослідження складовихцистанчеце трава. 4. Виділення та структура 2 нових фенілпропаноїдних глікозидів, цистанозиду-C та цистанозиду-D. - Хім. фарм. Бик. 32: 3880-3885, 1984.
Лю, CZ, Ченг, XY: ПокращенняфенілетаноїдглікозидиБіосинтез в клітинних культурахЦистанхеdeserticola шляхом осмотичного стресу. - Plant Cell Rep. 27: 357-362, 2008.
Лю, JY, Го, ZG, Zeng, ZL: Покращене накопиченняфенілетаноїдглікозидишляхом внесення попередника в суспензійну культуруЦистанхесальса. - Біохім. інж. J. 33: 88-93, 2007.
Лю, XQ, Бай, XQ, Цянь, Q., Ван, XJ, Чен, MS, Чу, CC: OsWRKY03, рисовий активатор транскрипції, який функціонує в захисному сигнальному шляху вище за OsNPR1. - Cell Res. 15: 593-603, 2005.
Murashige, T., Skoog, F.: Переглянуте середовище для швидкого росту та біотести з культурами тканин тютюну. - Фізіол. Рослина. 15: 473-497, 1962.
Нань, З.Д., Цзен, К.В., Ши, С.П., Чжао, М.Б., Цзян, Ю., Ту, П.Ф.:Фенілетаноїдглікозидиз протизапальною дією зі стебелЦистанхеdeserticola культивується в пустелі Тарім. - Fitoterapia 89: 167-174, 2013.
Нанда, А. К., Андріо, Е., Маріно, Д., Полі, Н., Дунанд, К.: Активні форми кисню під час ранніх взаємодій між рослинами та мікроорганізмами. - Я. Інтегр. Plant Biol. 52: 195-204, 2010.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: Розширене виробництвофенілетаноїд глікозидишляхом введення попередника в культуру клітинЦистанхеdeserticola. - Process Biochem. 40: 3480-3484, 2005a.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: Покращене виробництвофенілетаноїдглікозидизаЦистанхеклітини deserticola, культивовані в повітряному біореакторі з внутрішньою петлею з стояком сита. - Фермент мікробіол. техн. 36: 982-988, 2005b.
Сальседо-Моралес, Г., Хіменес-Апарісіо, А.Р., Круз-Соса, Ф., Трехо-Тапіа, Г.: Анатомічна та гістохімічна характеристика гаусторію in vitro з коренів Castilleja tenuiflora. - біол. Рослина. 58: 164-168, 2014.
Sathiyaraj, G., Srinivasan, S., Kim, YJ, Lee, OR, Parvin, S., Balusamy, SR, Khorolragchaa, A., Yang, DC: Звикання до перекису водню покращує толерантність до солі шляхом активації захисних білків у Panax ginseng CA Meyer. - Мол. Biol. Доповідь 41: 3761-3771, 2014.
Шмідт Р., Мьоле Д., Хюббертен Х.М., Обата Т., Хофген Р., Ферні А.Р., Фізан Дж., Сегундо Б.С., Ґідердоні Е., Шипперс Дж.Х.М., Мюллер-Робер, B.: SALTRESPONSIVE ERF1 регулює залежну від активних форм кисню сигналізацію під час початкової реакції на сольовий стрес
в рисі. - Рослинна клітина 25: 2115-2131, 2013.
Ван, Т., Чжан, XY, Се, WY:Цистанхеdeserticola YC Ma, «Desert Ginseng»: огляд. - амер. Ж. підборіддя. Мед. 40: 1123-1141, 2012.
Ві, С. Г., Чунг, Б. І., Кім, Дж. Х., Лі, К. С., Кім, Дж. С. Схема осадження перекису водню в оболонках листя рису під впливом солі. - біол. Рослина. 50: 469-472, 2006.
Zhou, XF, Jin, YH, Yoo, CY, Lin, XL, Kim, WY, Yun, DJ, Bressan, RA, Hasegawa, PM, Jin, JB: CYCLIN H1 регулює реакції на посуху та відкриття продихів, викликане синім світлом. інгібування накопичення активних форм кисню в Arabidopsis. - Фізіологія рослин. 162: 1030-1041, 2013.
