Вплив загальних опосередкованих цистанозидами специфічних андрогенних рецепторів на синаптичні білки та когнітивну функцію мишей SAMP8 Ⅱ

2 результати

2. 1 Вплив ГК на навчання та пам'ять у мишей

Після 30 днів введення GC затримка виходу в експерименті з позиціонування та навігації поступово зменшувалася зі збільшенням експериментальних днів, і тенденція до зниження була найбільш значною. Порівняно з модельною групою, затримка виходу в групі GCs була значно зменшена на 4-й і 5-й дні (P < 0. 05); порівняно з групою GCs, латентність виходу в групі GCs + F була збільшена на 4-й і 5-й дні. , затримка виходу в групі GCs + ICI була значно знижена на 4-й і 5-й дні (P < 0,05), але не було істотної різниці від 1 до 3 днів (P < 0,05). дивіться малюнок 1.

Рисунок 1. Затримка виходу кожної групи в експерименті навігації позиціонування

Примітка. Порівняно з групою моделі, * P < {{0}}. 05; Порівняно з групою GCs, # P < 0,05

Малюнок 2 Кількість перетинів платформи для кожної групи в дослідженні космосу

Примітка. Порівняно з групою моделі, * P < {{0}}. 05; Порівняно з групою GCs, # P < 0,05

Cistanche добавка Покращення когнітивних функцій Дієтична добавка PhGs75% Ech 30% Act 12%

В дослідженні космосу, порівняно з модельною групою, кількість перетинів платформи в групі GCs була значно збільшена (P ＜ {{0}}. 05); порівняно з групою GCs, група GCs + F зменшила кількість перетинів платформи (P ＜ 0. 05), група GCs +ICI зросла (P ＜ 0 . 05). Дивіться малюнок 2. Графік траєкторії плавання показав, що траєкторія плавання мишей у модельній групі була неорганізованою та нерегулярною, а відсоток часу, проведеного в цільовому квадранті, був найнижчим (P <0,05). Порівняно з модельною групою, траєкторії плавання мишей у групі GCs були більш концентрованими, причому більшість із них розташовувалися в квадранті платформи, і тварини проводили найбільший відсоток часу, залишаючись у цільовому квадранті (P < 0. 05); порівняно з групою GCs перетин групи GCs + F. Кількість платформ зменшилася (P <0,05), але зросла в групі GCs + ICI (P <0,05). Дивіться малюнок 3.

2. 2. Вплив ГК на експресію білка SYN, PSD-95 і BDNF в гіпокампі миші.

Порівняно з модельною групою експресія білків SYN, PSD{{0}} і BDNF у групі GCs була значно збільшена (P < 0. 05); порівняно з модельною групою. Порівняно з групою, експресія білка PSD-95 у групі GCs + F і групі GCs + ICI була значно знижена (P < 0. 05); експресія білка SYN у групі GCs + F була значно збільшена (P < 0,05); Експресія білка BDNF у групі GC + F і групі GC + ICI була значно знижена (P <0,05). Дивіться малюнок 4.

Рисунок 3. Траєкторії плавання кожної групи в дослідженні космосу

Примітка: A: Модельна група, B: GC група, C: GC + F група, D: GC + ICI група, E: F група, F: ICI група

Рисунок 4 Вестерн-блот виявлення експресії білка PSD-95, SYN і BDNF в гіпокампі кожної групи

Примітка: A: експресія білка SYN, B: експресія білка BDNF, C: експресія білка PSD-95.

Порівняно з групою моделі, * P < {{0}}. 05; Порівняно з групою GCs, # P < 0,05

2. 3 ГХ на тканині гіпокампу миші

Вплив на експресію SYN, PSD{{0}} і BDNF mＲNA Порівняно з модельною групою група GCs мала значно вищі рівні експресії SYN, PSD-95 і BDNF mＲNA (P＜{ {7}}. {{10}}5); порівняно з групою GCs, групою GCs + F, рівень експресії мРНК PSD-95 у групі GCs + ICI був значно знижений (P < 0,05); експресія мРНК SYN у групі GCs + F була значно збільшена (P < 0,05); група GCs + F, GCs + Експресія мРНК BDNF у групі ICI була значно знижена (P < 0,05). Дивіться малюнок 5.

Рисунок 5 RT-PCR виявлення експресії PSD-95, SYN і BDNF mＲNA в гіпокампі кожної групи. Примітка: A: експресія SYN mＲNA, B: експресія PSD-95 mＲNA, C: експресія BDNF mＲNA . Порівняно з групою моделі, * P < 0. 05; Порівняно з групою GCs, # P < 0,05

3 Обговорення

У структурі між нейронами немає протоплазматичного зв’язку, і вони покладаються лише на синаптичний контакт для передачі інформації. Аномальні зміни синаптичної структури та функції впливатимуть на ефективну передачу інформації між нейронами, тому зазвичай вважається, що когнітивна дисфункція AD тісно пов’язана з патологічними змінами в синапсах [6]. Синаптична пластичність в основному відноситься до структурної та функціональної модифікації синаптичних зв'язків, включаючи збільшення або зменшення кількості синапсів і зміни фізіологічних функцій. Синаптична пластичність є основою навчання і пам'яті, а її зниження є одним з основних патогенних факторівКогнітивна дисфункція AD. Попередні дослідження показали, що ГК можуть регулювати синаптичну пластичність за допомогою кількох механізмів для покращення когнітивних функцій. Варто зазначити, що ГК також можуть підвищувати рівень андрогенів у тварин, а тестостерон може покращувати когнітивну дисфункцію AD [7]. Тому існує припущення, що ГК можуть покращувати когнітивні функції, надаючи андрогеноподібні ефекти.

Це дослідження виявило, що GCs можуть значно скоротити затримку втечі мишей SAMP8 і збільшити кількість перетинів платформи, припускаючи, що GCs можуть покращити когнітивну дисфункцію мишей SAMP8; і введення тваринам флутаміду (антагоніст AR) може блокувати дію GC на мишей SAMP8. Вплив на когнітивні функції у мишей свідчить про те, що після введення флутаміду повна комбінація ГК і АРＲ може бути заблокована, і ефект не може проявлятися, тобто ГК можуть проявляти свою дію, специфічно опосередковуючи АРＲ.

У фізіологічних умовах тестостерон може ароматизуватися в дигідротестостерон (ДГТ) і естрадіол (Е2) в організмі. У цьому експерименті введення фулвестранту (антагоніста ER) тваринам може значно покращити когнітивну дисфункцію мишей SAMP8. Причиною може бути те, що фулвестрант блокує специфічне зв’язування E2 і ER в організмі, що призводить до дисоціації E2 в організмі. Рівні Е2 зростають і накопичуються, пригнічуючи метаболізм тестостерону до Е2. Навпаки, ароматизація тестостерону в DHT компенсаторно збільшується, а комбінація з ARＲ збільшується, таким чином значно покращуючи когнітивну дисфункцію мишей SAMP8. Цей результат додатково підтверджує, що GC можуть діяти, опосередковуючи певний ARＲ.

Добре відомо, що когнітивна дисфункція у пацієнтів з AD тісно пов’язана із синаптичною пластичністю. Попередні дослідження показали, що експресія пов’язаних із синапсами білків SYN, PSD-95 і BDNF у модельних тварин AD значно знижена [8].

Результати цього експерименту показали, що після введення GC експресія пов’язаних із синапсами білків SYN, PSD-95 і BDNF збільшилася, що свідчить про те, що GC можуть покращити синаптичну пластичність. Дослідження показали, що BDNF може взаємодіяти з рецепторами нейротрофіну, впливаючи на вивільнення везикул і нейромедіаторів, тим самим впливаючи на навчання такогнітивні функції[9]. Результати цього експерименту показали, що порівняно з групою GCs експресія BDNF була знижена в групі GCs+F і GCs+ICI, що свідчить про те, що GCs можуть опосередковувати участь ARＲ у вищезазначеному процесі, впливаючи на навчання та когнітивні функції. Синаптофізин (SYN) - кальційзв'язуючий білок, розташований на мембрані синаптичної везикули.

Він існує в центральних і периферичних нервових закінченнях майже всіх тварин і може брати участь у формуванні синаптичних везикул-специфічних каналів, а також пов’язаний з транспортом везикул і вивільненням нейромедіаторів [10]. Білок постсинаптичної щільності (PSD-95) розташований у постсинаптичній мембрані та відповідає за прийом нейромедіаторів, що вивільняються з пресинаптики, і бере участь у регуляції передачі синаптичного сигналу та синаптичної пластичності. Тому SYN і PSD -95 вважаються маркером для оцінки синаптичної активності та функціональної пластичності [11]. Результати цього експерименту показали, що порівняно з групою GCs експресія SYN збільшилася, а експресія PSD-95 зменшилася після того, як тваринам дали флутамід, що свідчить про те, що GCs можуть спеціально опосередковувати AR для регулювання постсинаптичної мембрани, але не пресинаптичної мембрани. Ефект не опосередковує ARＲ. Порівняно з групою GCs рівні експресії BDNF і PSD-95 знизилися після того, як тваринам дали фулвестрант, і це зниження було більш значним, ніж у групі GCs + F, що додатково підтвердило, що GCs можуть відігравати певну роль шляхом посередництва певного ARＲ.

Таким чином, ГК можуть опосередковувати специфічні АРＲ для регулювання синаптичної пластичності, тим самим покращуючи когнітивну дисфункцію AD, що дасть нові ідеї щодо використання ГК у профілактиці талікування AD.

Список літератури

[1] Soria Lopez JA, González HM, Léger GC. хвороба Альцгеймера

хвороба［M］/ /Довідник з клінічної неврології． Амстердам: Elsevier, 2019: 231-255.

[2] Lašaitè L, Cˇeponis J, Preikša RT та ін. Ефекти двох -

рік замісної терапії тестостероном на когнітивні функції, емоції та якість життя у чоловіків молодого та середнього віку з гіпогонадами［J］． Andrologia, 2017, 49(3): e12633.

[3] Jia JX, Yan XS, Song W та ін. Захисний механізм, що лежить в основі дії фенілетаноїдних глікозидів (PHG) на синаптичну пластичність у моделі хвороби Альцгеймера у щурів, індукованої бета-амілоїдом 1 - 42［J］． J Toxicol EnvironЗдоров'я A, 2018, 81(21): 1098-1107．

[4] Liu Xinlang, Zhou Lili, Yang Zhanjun та ін. Вплив загальних глікозидів Cistanche deserticola на здатність до навчання, пам'яті та синаптичну пластичність мишей SAMP8［J］. Китайський журнал традиційної китайської медицини, 2022, 40(1): 110-115, 276-277.

[5] Song Wei, Bai Yumeng, Li Xiaoyu та ін. Вплив тестостерону на експресію синаптофізину в гіпокампі кастрованих щурів у поєднанні з -амілоїдними 1-42 олігомерами［J］. Journal of Anatomy, 2019, 42(6): 547-550.

[6] Chen L, Huang ZL, Du YH та ін. Капсаїцин послаблюєамілоїд{0}}індукована втрата синапсів і когнітивні порушення у мишей［J］． J Alzheimers Dis, 2017, 59(2): 683–694.

[7] Kische H, Gross S, Wallaschofski H та ін. Асоціаціїандрогенів із симптомами депресії та когнітивним статусом у загальній популяції［J］． PLoS One, 2017, 12(5): e0177272.

[8] Wang Lu, Bai Yumeng, Li Xiaoyu та ін. Вплив загальних глікозидів Cistanche deserticola на навчання, когнітивні функції та окислювальний стрес у модельних щурів із хворобою Альцгеймера［J］. Journal of Anatomy, 2020, 43(3): 194-199, 275．

[9] Nguyen VT, Hill B, Sims N та ін. Однонуклеотидний поліморфізм нейротрофічного фактора rs6265 (Val66Met), отриманого з мозку, як основний модифікатор патофізіології людини［J］． Neural Ｒgen Ｒs, 2023, 18(1): 102-106.

[10] Кузен М.А. Синаптофізин-залежний синаптобревін -2 транспортування в пресинапсі - механізм і функція［J］． J Neurochem, 2021, 159(1): 78-89.

[11] Liang HZ, Wang HQ, Wang SS та ін. 3D-зображення PSD-95 у мозку миші за допомогою передового методу CUBIC［J］． Mol Brain, 2018, 11(1): 50.