Вплив контралатеральної нефректомії та ішемічних станів на фіброз нирки після односторонньої ішемії-реперфузії нирки Ⅱ
Oct 27, 2023
Результати
Протокол 1: вплив інтервалу між контралатеральною нефректомією та uIRI на перехід ГУН ХХН Рівень виживаності знизився зі збільшенням інтервалу між контралатеральною нефректомією та iri
Як згадувалося в експерименті 1, тривалість ішемії була зафіксована на 24 хвилинах з внутрішньою температурою тіла 37 C в uIRI. Ми спостерігаємо вплив часу контралатеральної нефректомії після uIRI на виживання мишей. Дані показали, що в групі 7-го дня (контралатеральна неушкоджена нирка була резектована через 7 днів після UIRI) усі вісім мишей вижили. У групі 10-го дня одна миша померла на наступний день після контралатеральної нефректомії з рівнем виживання 87,5%. У групі 14-го дня одна миша померла в перший день після контралатеральної нефректомії, а дві миші померли через два дні після контралатеральної нефректомії з рівнем виживання 62,5%. Ці результати показали, що рівень виживаності мишей поступово знижувався з подовженням контралатеральної нефректомії, коли інші два фактори впливу були фіксованими (рис. 2(A)).
НАТИСНІТЬ ТУТ, ЩОБ ОТРИМАТИ ТРАВ’ЯНИЙ СОСТАВ CISTANCHE ДЛЯ НИРОК
Функція нирок погіршилася із збільшенням інтервалу між контралатеральною нефректомією та UIRI
Порівняно з фіктивним контролем SCr і BUN були значно вищими у всіх мишей після контралатеральної нефректомії (p < {{0}}.05), що вказує на те, що всі вони страждали від пошкодження нирок. Крім того, рівні SCr і BUN збільшувалися зі збільшенням інтервалу між контралатеральною нефректомією та uIRI (p < 0,05) (Рисунок 2 (B, C))
Гістологічне ураження нирки погіршилося зі збільшенням інтервалу між контралатеральною нефректомією та UIRI
Фарбування HE продемонструвало, що ниркова тканина фіктивної групи була структурно нормальною через 8 тижнів після uIRI. У всіх групах UIRI було виявлено декілька патологічних змін після ГПН у нирці (рис. 3(A)), включаючи різний ступінь вакуольної дегенерації канальцевих епітеліальних клітин, відшарування щіткової кайми, вогнищевий некроз розпаду, дилатацію деяких просвітів канальців і нирки. набряк канальцевих епітеліальних клітин зі змінною морфологією. Крім того, деякі клубочки були зморшкуватими та склерозованими, з гіперплазією мезангіальних клітин та розширеною капсулою Боумена. Запальну клітинну інфільтрацію також спостерігали в інтерстиціальній частині нирок. Показники патологічного ураження канальців і клубочків пошкодженої нирки були вищими, ніж фіктивні (p < 0.05), що вказує на те, що UIRI з контралатеральною нефректомією значно пошкодило нирку. Показники патологічного ураження нирок збільшувалися з розширенням контралатеральної нефректомії (p < 0,05) (рис. 3(B,C)). Ці дані вказують на те, що вік патологічного ураження нирок поступово збільшувався з розширенням контралатеральної нефректомії після UIRI.
Рисунок 2. Вплив часових інтервалів між контралатеральною нефректомією та одностороннім ішемічно-реперфузійним пошкодженням (uIRI) на рівень виживання та функцію нирок. Ліва нирка була піддана IRI в день 0, а резекція правої нирки була проведена в різні моменти часу (день 7, день 10 і день 14) з тривалістю ішемії, зафіксованою на 24 хвилинах з при ішемії нирки температура тіла фіксується на рівні 37 С. (A): Виживаність мишей у кожній групі оцінювали та представляли у відсотках. (B і C): Функцію нирок оцінювали за рівнем креатиніну сироватки (SCr) і азоту сечовини крові (BUN). n ¼ 5–8/група. p < 0,05.
Рисунок 3. Вплив інтервалів часу між контралатеральною нефректомією та одностороннім ішемічно-реперфузійним пошкодженням (uIRI) на гістологічне пошкодження нирки. Ліва нирка була піддана IRI в день 0, а резекція правої нирки була проведена в різні моменти часу (день 7, день 10 і день 14) з тривалістю ішемії, зафіксованою на 24 хвилинах з фіксована внутрішня температура тіла 37 С при ішемії нирки. Гістологічне пошкодження нирки визначали за допомогою фарбування гематоксилін-еозином (HE). (A): Репрезентативне фарбування пошкодженої нирки HE, яке показало типові гістопатологічні ознаки патологічних змін після ГПН, включаючи різний ступінь вакуольної дегенерації епітеліальних клітин канальців, відшарування щіткової облямівки, вогнищевий некроз розпаду, розширення деяких просвітів канальців (# ), набряк епітеліальних клітин ниркових канальців із змінною морфологією та запальна клітинна інфільтрація (%). Деякі клубочки були зморшкуватими та склерозованими, з гіперплазією мезангіальних клітин (&) та розширеною капсулою Боумена (збільшення 400). (B): Напівкількісна оцінка пошкодження канальців. (C): Напівкількісна оцінка пошкодження клубочків. n ¼ 5–8/група. p < 0,05.
Фіброз нирки посилювався зі збільшенням інтервалу між контралатеральною нефректомією та вагою нирки UIRI.
Трансформація ГПН у ХХН зазвичай характеризується фіброзом нирки [19], а зменшення маси нирки є макроскопічним показником фіброзу нирки [2]. Таким чином, ми виміряли вагу нирки (вага дитини, відкалібрована за масою тіла), щоб попередньо дослідити вплив інтервалів часу між uIRI та відстроченою контралатеральною нефректомією на перехід AKI-CKD. Порівняно з фіктивною групою всі групи uIRI показали значне зменшення ваги нирок (p < 0.05), що вказує на те, що всі миші в групах uIRI мали фіброз нирок. Різниця у вазі нирки значно змінилася, коли різниця в часовому інтервалі між контралатеральною нефректомією та uIRI становила 3 дні, і вага нирки поступово зменшувалася зі збільшенням інтервалу (Рис. 4(A)).
Трихромна пляма Массона.
Трихромне фарбування за Массоном було виконано для подальшого спостереження за впливом часових інтервалів між контралатеральною нефректомією та uIRI на фіброз нирки. Значного інтерстиціального фіброзу нирок у фіктивній групі не спостерігалося, тоді як через 8 тижнів після uIRI спостерігалися різні ступені фіброзних змін у нирках у всіх групах uIRI (Малюнок 4(B)). Напівкількісний аналіз фіброзної ділянки показав, що фіброзна ділянка нирки в групах uIRI була значно збільшена порівняно з такою в групі плацебо (p < 0.05), що вказує на те, що була успішно виконана перехідна модель AKI CKD. Крім того, із затримкою контралатеральної нефректомії фіброз нирки ставав все більш вираженим (p <0,05), що вказує на те, що ступінь фіброзу нирки значно змінювався, коли інтервал між контралатеральною нефректомією та uIRI становив 3 дні. З подовженим часовим інтервалом між контралатеральною нефректомією та UIRI ступінь фіброзу нирки посилювався (рис. 4(C)).
Рисунок 4. Вплив інтервалів часу між контралатеральною нефректомією та однобічним ішемічно-реперфузійним пошкодженням (uIRI) на фіброз нирки. Ліва нирка була піддана IRI в день 0, а резекція правої нирки була проведена в різні моменти часу (день 7, день 10 і день 14) з тривалістю ішемії, зафіксованою на 24 хвилинах з при ішемії нирки температура тіла фіксується на рівні 37 С. Фіброз нирок оцінювали за масою нирки, трихромним фарбуванням за Массоном і експресією фібронектину (FN), колагену I (COL-I) і α-актину гладких м’язів (a-SMA). (A): Маса нирок до маси тіла. (B): Репрезентативне трихромне фарбування пошкодженої нирки за Массоном, яке показало типові фіброзні зміни (%) (збільшення, 200). (C): Напівкількісна оцінка фіброзної ділянки, виявленої трихромним фарбуванням за Массоном. (D): Кількісні аналізи RT-PCR на експресію FN у нирках. (E): Кількісні аналізи RT-PCR на експресію COL-I у нирках. (F): репрезентативні вестерн-блот зображення для FN, COL-I та a-SMA. (G): Гістограма, що показує експресію білка FN, нормалізовану b-актином. (H): Гістограма, що показує експресію білка COL-I, нормалізовану b-актином. I: Гістограма, що показує експресію білка a-SMA, нормалізовану b-актином. n ¼ 5–8/група. p < 0,05.
Накопичення позаклітинного матриксу (ECM).
Інтерстиціальний фіброз нирки характеризується відкладенням ECM [2], таких як FN і COL-I, в інтерстиціальній зоні нирки. Вестерн-блоттинг і RT-PCR аналіз показали, що експресія FN і COL-I в нирках була значно збільшена в усіх групах uIRI порівняно з імітаційною групою (p < 0.05), що вказує на що всі малюки зазнали фіброзних змін. Рівні експресії FN і COL-I у нирці були вищими із затримкою контралатеральної нефректомії (p <0,05) (Рис. 4(D–H)).
Міофібробласти в нирці.
Фіброз нирок характеризується накопиченням міофібробластів і подальшим утворенням ECM [20]. a-SMA використовували для визначення кількості міофібробластів через 8 тижнів після IRI. Вестерн-блот аналіз показав, що експресія a-SMA в тканинах нирок значно зросла в усіх групах uIRI порівняно з групою плацебо (p < 0.05), що вказує на те, що міофібробласти були виражено більшими в нирках у всіх постраждалих. миші. Експресія a-SMA була вищою із затримкою резекції контралатеральної нирки (p <0,05) (рис. 4(F,I)). Ці результати показали, що міофібробласти в нирковій тканині uIRI значно змінилися протягом 3 днів між uIRI та контрлатеральною нефректомією, і що міофібробласти поступово збільшувалися з довшими інтервалами.
Протокол 2: вплив внутрішньої температури тіла під час ішемії на перехід AKI-CKD
Рівень виживаності знижувався з підвищенням внутрішньої температури тіла під час ішемії
Як згадувалося в експерименті 2, щоб дослідити вплив внутрішньої температури тіла під час ішемії на перехід AKI-CKD, тривалість ішемії була зафіксована на 24 хвилинах, а контралатеральна інтактна нирка була видалена через 14 днів після UIRI. Дані показали, що в групі 36 C (температура тіла мишей під час ішемії контролювалася на рівні 36 C) одна миша померла в перший день після контралатеральної нефректомії, а рівень виживання становив 87,5%. У групі 36,5 C двоє мишей загинули в перші 2 дні після контралатеральної нефректомії, виживаність склала 75%. Порівняно з групою 36,5 C, на другий день після контралатеральної нефректомії загинула одна миша більше з виживаністю 62,5% у групі 37 C. У групі 37,5 C, за винятком трьох мишей, які померли в перші 2 дні після контралатеральної нефректомії, одна миша померла через 3 дні після контралатеральної нефректомії з відсотком виживання 50%. На додаток до того, що сталося в групі 37,5 C, одна миша померла через 5 днів після контрлатеральної нефректомії в групі 38 C, і рівень виживання становив 37,5%. Ці результати показали, що рівень виживаності мишей поступово знижувався зі збільшенням внутрішньої температури тіла під час ішемії (рис. 5(A)).
Зниження функції нирок з підвищенням внутрішньої температури тіла під час ішемії
Порівняно з фіктивною групою, uIRI призвело до значного збільшення SCr і BUN у всіх групах uIRI (p < {{0}}.05), що свідчить про те, що всі миші в групах uIRI розвинули порушення функції нирок після контралатеральної нефректомії. Порівняння між двома групами з сусідніми температурами показало, що SCr і BUN у мишей збільшувалися зі збільшенням ішемічної температури тіла на 0,5 C, але статистичної різниці не було (p > 0,05). , що свідчить про менш виражені зміни у функції нирок з різницею внутрішньої температури в 0,5 C під час ішемії. Однак SCr і BUN значно підвищувалися, коли температура тіла підвищувалася на 1 °C або вище під час ішемії (p <0,05), що свідчить про те, що функція нирок значно змінювалася з різницею в температурі тіла під час ішемії на 1 °C. Функція нирок погіршувалася більш значно з підвищенням ішемічної температури тіла (рис. 5(B,C)).
Ураження ниркової тканини посилилося підвищенням внутрішньої температури тіла при ішемії
Згідно з фарбуванням HE, структура ниркової тканини мишей у фіктивній групі була нормальною. Патологічні зміни, викликані IRI, спостерігалися в усіх групах користувачів, такі як різний ступінь вакуольної дегенерації епітеліальних клітин канальців, відшарування щіткової кайми, вогнищевий некроз деінтеграції, розширення просвіту деяких канальців і набряк епітеліальних клітин ниркових канальців зі змінною морфологією, а також як зморшкуваті та склеротичні клубочки, гіперплазія мезангіальних клітин і розширена капсула Боумена, запальна клітинна інфільтрація в інтерстиціальній нирці (рис. 6(A)).
Оцінка патологічного ураження ниркових канальців і клубочків показала, що порівняно з фіктивною групою патологічне ураження нирки в усіх групах uIRI було значно серйознішим (p < {{0}}.05 ), що свідчить про те, що очевидне патологічне ураження нирки виявилося в усіх групах uIRI і що модель AKI-CKD була успішно розроблена. Порівняння між двома групами із суміжними температурами показало, що спостерігалося збільшення показників патологічного ураження нирок із підвищенням внутрішньої температури тіла на 0,5 C під час ішемії, але це не мало статистичної значущості (p > 0,05), тоді як нирки патологічне ушкодження значно збільшувалося при підвищенні внутрішньої температури тіла на 1 С і вище під час ішемії (p < 0,05) (рис. 6(B,C)). Ці результати показали, що гістопатологічне пошкодження нирки суттєво змінювалося з різницею внутрішньої температури тіла на 1°C під час ішемії та поступово зростало з підвищенням внутрішньої температури тіла під час ішемії.
Фіброз нирок посилюється з підвищенням внутрішньої температури тіла під час ішемії Маса нирок.
Порівняно з фіктивною групою, uIRI викликав значне зниження ваги нирок у всіх групах uIRI, і миші з різною ішемічною температурою тіла розвинули різні ступені фіброзу нирок. Порівняння між двома групами із суміжними температурами показало, що зменшення ваги нирок не мало суттєвої різниці, коли основна температура тіла підвищувалася на {{0}}.5 C під час ішемії (p > 0.{{ 7}}5), що свідчить про те, що різниця в 0,5 °C у внутрішній температурі тіла під час ішемії не мала істотного впливу на зміну ваги нирки. Коли основна температура тіла під час ішемічного періоду мала різницю на 1 C, вага нирки значно змінювалася (p < 0,05), і вона поступово знижувалася в міру підвищення ішемічної температури тіла (рис. 7(A)).
Рисунок 7. Вплив внутрішньої температури тіла під час ішемії на фіброз нирок у мишей з UIRI та відстроченою контралатеральною нефректомією. Ліва нирка була піддана ІРІ в 0 день, а резекція правої нирки була проведена за різних температур тіла (36 C, 36,5 C, 37 C, 37,5 C і 38 C) з часом ішемії лівої нирки фіксували на 24 хв, а праву нирку видаляли через 14 днів після ІРІ лівої нирки. Фіброз нирок оцінювали за масою нирки, трихромним фарбуванням за Массоном і експресією фібронектину (FN), колагену I (COL-I) і α-актину гладких м’язів (a-SMA). (A): Маса нирок до маси тіла. (B): Репрезентативне трихромне фарбування пошкодженої нирки за Массоном, яке показало типові фіброзні зміни (%) (збільшення, 200). (C): Напівкількісна оцінка фіброзної ділянки, виявленої трихромним фарбуванням за Массоном. (D): Кількісні аналізи RT-PCR на експресію FN у нирках. (E): Кількісні аналізи RT-PCR на експресію COL-I у нирках. (F): репрезентативні вестерн-блот зображення для FN, COL-I та a-SMA. (G): Гістограма, що показує експресію білка FN, нормалізовану b-актином. (H): Гістограма, що показує експресію білка COL-I, нормалізовану b-актином. (I): Гістограма, що показує експресію білка a-SMA, нормалізовану b-актином. n ¼ 3–7/група. p < 0,05. NS: незначний.
Трихромна пляма Массона.
Через 8 тижнів після uIRI результати трихромного фарбування за Массоном показали, що порівняно з плацебо групою фіброзна ділянка ниркових тканин у всіх групах uIRI була значно збільшена (p < 0.05), що вказує на те, що фіброзний результат мав місце в усіх групах UIRI. Порівняння між двома групами із суміжними температурами показало, що площа фіброзу нирки збільшилася, але без статистичної значущості, коли основна температура тіла підвищилася на 0,5 C під час ішемії (p > 0.{{10} }5), що свідчить про те, що різниця в 0,5 °C у внутрішній температурі тіла під час ішемії не мала істотного впливу на фіброз нирок. Для кожного підвищення внутрішньої температури тіла на 1°C під час ішемії площа інтерстиціального фіброзу нирки значно збільшувалася (p <0,05), що вказує на те, що підвищення внутрішньої температури тіла на 1°C під час ішемії мало значний вплив на інтерстиціальний фіброз нирки та фіброз нирки. поступово погіршується з підвищенням внутрішньої температури тіла під час ішемії (рис. 7(B,C)).
ЕКМ в тканині нирок. Дані показали, що порівняно з фіктивною групою експресія FN та COL-I у тканинах нирок у всіх групах uIRI була значно збільшена (p < 0.05), що узгоджувалося з Результати фарбування за Массоном. Порівняння двох груп із суміжними температурами показало, що експресія FN та COL-I у тканинах нирок зросла на 0. Підвищення внутрішньої температури тіла на 5°C під час ішемії, але не було статистично значущої різниці (p > {{8 }}.05), що вказує на те, що різниця внутрішньої температури тіла на 0,5 °C під час ішемії не мала суттєвого впливу на відкладення ECM, тоді як експресія FN і COL-I значно зростала при збільшенні на 1 °C внутрішньої температури тіла під час ішемії (p < 0,05), і вони мали більш виражене підвищення з підвищенням температури тіла. На закінчення, відкладення ECM або фіброзний результат у тканинах нирки збільшувався з вищою внутрішньою температурою тіла під час ішемії (рис. 7(D–H)).
Міофібробласти в тканині нирок.
Порівняно з фіктивною групою, експресія a-SMA в нирковій тканині в усіх групах uIRI була значно збільшена (p < 0.05), що свідчить про те, що міофібробласти були значно збільшені в усіх групах uIRI . Порівняння між двома групами з сусідніми температурами показало, що експресія a-SMA в нирках збільшувалася, коли температура тіла підвищувалася на 0,5 C під час ішемії, але не було істотної різниці (p > 0 .05), що свідчить про те, що різниця в ішемічній температурі тіла на 0,5 °C не мала істотного впливу на зміни міофібробластів нирок. Крім того, експресія a-SMA в тканинах нирок значно зростала при підвищенні ішемічної температури тіла на 1°C, а збільшення експресії a-SMA було більш значущим при підвищенні температури тіла (p <0,05), що свідчить про те, що міофібробласти значно змінювалися, коли різниця внутрішньої температури тіла під час ішемії становила 1 С і більше. Поряд із підвищенням внутрішньої температури тіла під час ішемії поступово збільшувалися міофібробласти в тканинах нирок (рис. 7(F,I)).
Протокол 3: вплив тривалості ішемії на перехід ГПН-ХНН
Рівень виживаності зменшувався зі збільшенням тривалості ішемії. Як зазначалося в експерименті 3, щоб дослідити вплив тривалості ішемії на перехід AKI-CKD, ішемічну температуру тіла фіксували на рівні 37 C під час UIRI, а контралатеральну нирку видаляли 14 днів після uIRI. Результати показали, що в 21-хвилинній групі (тривалість ішемії становила 21 хв) одна миша померла через 1 і 2 дні після видалення контралатеральної нирки відповідно, з виживаністю 75%, і ще одна миша померла через 2 дні після контралатеральної нефректомії. у 24-хвилинній групі з виживаністю 62,5%. У 27-хвилинній групі чотири миші, дві миші, одна миша та одна миша померли на 1 день, 3 дні, 5 днів та 7 днів відповідно після контралатеральної нефректомії, а рівень виживання становив {{ 18}}%. Аналогічно, п’ять мишей, дві миші та одна миша загинули через 1 день, 2 дні та 3 дні після контралатеральної нефректомії в 30-хвилинній групі, а рівень виживання становив 0%. Це вказує на те, що рівень виживаності зменшився зі збільшенням тривалості ішемії, оскільки всі миші в групі 27 хвилин і групі 30-min померли через 7 днів і 3 дні відповідно після контралатеральної нефректомії (Малюнок 8(A)).
З більшою тривалістю ішемії знижується функція нирок
Дані показали, що порівняно з фіктивною групою як у 21-хвилинній, так і в 24-хвилинній групі спостерігалося значне збільшення SCr і BUN (p < 0.05), що вказує на погіршення функції нирок. Порівняно з 21-хвилинною групою, 24-хвилинна група продемонструвала більш виражене збільшення SCr і BUN (p <0,05), що вказувало на те, що функція нирок значно змінилася з різницею в 3 хвилини тривалості ішемії та більш очевидним зниженням функції нирок можна спостерігати при більшій тривалості ішемії (рис. 8(B,C)).
Рисунок 8. Вплив тривалості ішемії на рівень виживаності та функцію нирок у мишей з UIRI та відстроченою контралатеральною нефректомією. Ліва нирка була піддана ІРІ в день 0, а резекція правої нирки була проведена з різною тривалістю ішемії (21 хв, 24 хв, 27 хв і 30 хв) з фіксованою внутрішньою температурою тіла при 37 С під час ішемії нирки, а праву нирку видалили через 14 днів після ІРІ лівої нирки. (A): Виживаність мишей у кожній групі оцінювали та представляли у відсотках. (B і C): Функцію нирок оцінювали за рівнем креатиніну сироватки (SCr) і азоту сечовини крові (BUN). п ¼ 5–6/ група. p < 0,05.
Гістопатологічне пошкодження нирки погіршувалось із збільшенням тривалості ішемії
Згідно з фарбуванням HE, структура ниркової тканини мишей у фіктивній групі була нормальною. Порівняно з фіктивною групою, у групі 21 хвилини та 24 хвилини були патологічні зміни різного ступеня, включаючи вакуольну дегенерацію канальцевих епітеліальних клітин, відшарування щіткової кайми, фокальний некроз розпаду, розширення просвіту деяких канальців, набряк канальцевих епітеліальних клітин із змінною морфологією , зморшкуваті та склеротичні клубочки, гіперплазія мезангіальних клітин і розширена капсула Боумена, а також запальна клітинна інфільтрація в інтерстиціалі (рис. 9(A)). Показники патологічного ураження ниркових канальців і клубочків були значно вищими як у групах 21 хв, так і в 24 хв порівняно з групою імітації (p < 0.05), що вказує на те, що значне патологічне ураження нирок розвинулося в обидві групи користувачів. Крім того, 24-хвилинна група мала вищі показники патологічного ураження нирок і більш серйозне патологічне ураження порівняно з 21-хвилинною групою (p < 0,05) (Малюнок 9 (B, C)), що свідчить про те, що патологічне ураження нирок мало значні зміни з 3 мінімальна різниця в тривалості ішемії. Чим більше тривалість ішемії, тим важче патологічне ураження нирки
Фіброз нирки посилюється з більшою тривалістю ішемії Вага нирки.
Порівняно з імітаційною групою, як у групах, які приймали 21 хвилину, так і в групі 24 хвилини, спостерігалося значне зниження ваги нирки (p < 0.05), а в групі 24 хвилини спостерігалося більш помітне зниження маси нирки. порівняно з групою 21 хв (p <0,05). Вони показали, що 3-хвилинна різниця в тривалості ішемії призвела до значної зміни ваги нирки, і більш очевидне зменшення ваги нирки можна спостерігати при більшій тривалості ішемії (Малюнок 10(A)).
Трихромна пляма Массона. Трихромне фарбування за Массоном і напівкількісний аналіз фіброзних ділянок показали, що не було суттєвих фіброзних змін інтерстиціального каналу в групі плацебо, в той час як різні ступені фіброзних змін спостерігалися в інтерстиціальному відділі нирок як у 21-хвилинній, так і в 24-хвилинній групах (p < { {3}}.05). Порівняно з 21-хвилинною групою, 24-хвилинна група мала вищий ступінь фіброзу ниркової тканини (p < 0,05), що вказує на те, що фіброз нирки суттєво змінився з 3-хвилинною різницею в тривалості ішемії та що нирковий фіброз стане більш важким із тривалішою ішемією тривалість (рис. 10(B,C)).
ЕКМ в тканині нирок. Вестерн-блот і RT-PCR аналіз показали, що порівняно з фіктивною групою експресія FN і COL-I значно зросла як у 21-хвилинній, так і в 24-хвилинній групах (p < 0.05). , що вказує на те, що спричинена IRI ECM значно збільшилася в групах uIRI, і нирка зазнала значного фіброзного прогресування. Порівняно з 21-хвилинною групою, експресія FN і COL-I була більш вираженою в нирковій тканині в 24-хвилинній групі (p <0,05), що вказує на те, що відкладення ECM у ниркових тканинах значно змінилося з різницею в 3 хв. тривалість ішемії та відкладення ECM збільшувалися разом із подовженою тривалістю ішемії (рис. 10(D–H)).
Міофібробласти в тканині нирок. Вестерн-блот-аналіз показав, що порівняно з фіктивною групою експресія a-SMA нирки в групах 21 та 24 хвилин значно зросла (p < 0.05), що свідчить про те, що міофібробласти спостерігалося значне збільшення нирки в групах uIRI та значне прогресування фіброзу. Експресія a-SMA значно зросла зі збільшенням тривалості ішемії на 3 хвилини (p <0,05), і було виявлено більше міофібробластів із подовженою тривалістю ішемії (Рис. 10(F,I)).
Рисунок 9. Вплив тривалості ішемії на гістологічне пошкодження нирок у мишей з UIRI та відстроченою контралатеральною нефректомією. Ліва нирка була піддана ІРІ в день 0, а резекція правої нирки була проведена з різною тривалістю ішемії (21 хв, 24 хв, 27 хв і 30 хв) з фіксованою внутрішньою температурою тіла при 37 С під час ішемії нирки, а праву нирку видалили через 14 днів після ІРІ лівої нирки. Гістологічне пошкодження нирки визначали за допомогою фарбування гематоксилін-еозином (HE). (A): Репрезентативне фарбування пошкодженої нирки HE, яке показало типові гістопатологічні ознаки патологічних змін після ГПН, включаючи різний ступінь вакуольної дегенерації епітеліальних клітин канальців, відшарування щіткової облямівки, вогнищевий некроз розпаду, розширення деяких просвітів канальців (# ), набряк епітеліальних клітин ниркових канальців із змінною морфологією та запальна клітинна інфільтрація (%). Деякі клубочки були зморшкуватими та склерозованими, з гіперплазією мезангіальних клітин (&) та розширеною капсулою Боумена (збільшення 400). (B): Напівкількісна оцінка тубулоінтерстиціального ушкодження. (C): Напівкількісна оцінка пошкодження клубочків. n ¼ 5–6/група. p < 0,05.
Служба підтримки Wecistanche - найбільшого експортера cistanche в Китаї:
Електронна адреса:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Тел.:+86 15292862950
Зверніться в магазин, щоб дізнатися більше про технічні характеристики:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
