Апоцинін покращує індуковане глутаматом натрію пошкодження яєчок через порушення гематогенного бар’єру та параметрів окисного стресуⅡ

Результати

3.1. Рівні сироваткового тестостерону, ФСГ і ЛГ

Рівень тестостерону в групі MSG був нижчим порівняно з контрольною групою. Хоча група MSG плюс APO показала підвищення рівня тестостерону порівняно з групою MSG, це збільшення не було статистично значущим (Малюнок 1A). Рівень FSH був вищим у групі MSG порівняно з контрольною групою. Рівень ФСГ у групі MSG плюс APO був знижений порівняно з групою MSG (рис. 1B). Зниження рівня ЛГ у групі MSG та підвищення рівня LH у групі MSG плюс APO не були статистично значущими порівняно з експериментальними групами (рис. 1C).

3.2. Рівні MDA, GSH і SOD в яєчках

Рівень MDA в тканинах був підвищений у групі MSG порівняно з контрольною групою. З іншого боку, при порівнянні групи MSG плюс APO з групою MSG спостерігалося значне зниження MDA (рис. 1D). Рівні GSH і SOD значно знизилися в групі MSG порівняно з контрольною групою та APO відповідно. Значне підвищення рівнів GSH і SOD було виявлено в групі MSG плюс APO порівняно з групою MSG (рис. 1E, F).

Натисніть, щоб отримати капсули cistanche tubulosa для тестостерону

3.3. Кількість, рухливість і морфологія сперматозоїдів

Нормальну морфологію спостерігали у зразках сперми в контрольній групі та групах APO (рис. 2A, B). Велика кількість сперматозоїдів з морфологічними аномаліями спостерігалася в групі MSG (рис. 2C). У групі MSG плюс APO було виявлено небагато аномальних сперматозоїдів, оскільки більшість сперматозоїдів мали нормальну морфологію (рис. 2D).

Кількість і рухливість сперматозоїдів були нижчими в групі MSG порівняно з контрольною групою та групами APO. Ці параметри були значно збільшені в групі MSG плюс APO порівняно з групою MSG (рис. 2E, F).

3.4. Співвідношення маса яєчка/маса тіла

Незважаючи на те, що співвідношення маси яєчок/маси тіла в групі MSG було нижчим порівняно з іншими експериментальними групами, це зниження не було статистично значущим. Не було статистичної різниці у співвідношенні маса яєчка/маса тіла між експериментальними групами (рис. 3E).

3.5. Гістопатологічні результати

Світлове мікроскопічне дослідження тканини яєчка шляхом фарбування H&E виявило нормальну морфологію сім’яних канальців у контрольній групі. (Малюнок 3(A1)). Інтактна морфологія яєчок спостерігалася в групі APO (рис. 3(B1)). У групі MSG зародковий епітелій сім'яних канальців був дезорганізований. Вакуолі, що вказують на значне пошкодження тканин, були виявлені в базальному відділі сім’яних канальців (Рис. 3(C1)). Ці морфологічні порушення були відображені у значно високій гістопатологічній оцінці для цієї групи. У групі MSG плюс APO більшість сім’яних канальців відображали нормальну морфологію з обмеженою кількістю дегенерованих сім’яних канальців (рис. 3(D1)).

Порівняно з групою MSG, гістопатологічний бал був значно низьким у контрольній групі та групах APO. Гістопатологічна оцінка значно зросла в групі MSG і була значно знижена в групі MSG плюс APO порівняно з групою MSG (рис. 3F). Крім того, товщина сім'яних канальців у групі MSG була низькою порівняно з іншими експериментальними групами. У групі MSG плюс APO спостерігалося значне збільшення товщини канальців порівняно з групою MSG (рис. 3G). Контрольна та APO групи демонстрували сильну PAS-позитивність (рис. 3(A2, B2)) для базальних мембран сім’яних канальців із правильною морфологією. Зруйновані базальні мембрани сім’яних канальців MSG призвели до зниження PAS-позитивності зрізів. (Малюнок 3(C2)). PAS-позитивність у групі MSG плюс APO була майже еквівалентною контрольній групі, з невеликою кількістю порушених сім’яних канальців з відшаруванням базальних мембран (рис. 3(D2)). Морфологія канальців яєчок і білкової оболонки була нормальною в контрольній групі (Малюнок 3(A3)), групі APO (Малюнок 3(B3)) і групі MSG плюс APO (Малюнок 3(D3)). Однак у групі MSG (рис. 3(C3)) жирова тканина спостерігалася в білковій оболонці, і морфологія трубчастої строми також була нормальною.

3.6. Результати для PCNA

Велика кількість PCNA-позитивних клітин в сім’яному епітелії, як темно-коричневі, спостерігалася в контрольній і APO групах (рис. 4(A1, B1)). У групі MSG було помічено зменшення кількості PCNA-позитивних клітин сім’явиносного епітелію (рис. 4(C1)). Крім того, PCNA-позитивні сперматогенні клітини в просвіті сім’яних канальців спостерігаються в групі MSG. Індекс проліферації, найнижчий у групі MSG, був підвищений у групі MSG плюс APO порівняно з групою MSG (Малюнок 4E). Група MSG плюс APO також продемонструвала збільшення кількості PCNA-позитивних клітин в сім’яному епітелії (рис. 4(D1)).

3.7. Результати TUNEL Immunocytochemistry

У контрольній групі та групах APO кількість TUNEL-позитивних клітин була низькою (рис. 4(A2, B2)). Кількість TUNEL-позитивних клітин була вищою в групі MSG, ніж в інших експериментальних групах (рис. 4(C2)). TUNEL-позитивних клітин було менше в групі MSG плюс APO, ніж у групі MSG (Малюнок 4(D2)). Індекс апоптозу був вищим у групі MSG, ніж в інших експериментальних групах. Спостерігалося порівняльне зниження цього індексу в групі MSG плюс APO (рис. 4F).

3.8. Результати імунофлуоресценції NOX-2

Слабкий імунопозитивний вплив на NOX-2 спостерігався в контрольній (Рис. 5A–C) і APO групах (Рис. 5D–F). Найвища імунореактивність спостерігалася в групі MSG (Малюнок 5G–I), тоді як зниження було виявлено в групі MSG плюс APO (Малюнок 5J–L). Негативні контролі імунофлуоресцентного аналізу NOX-2 показані на малюнку S1.

3.9. Результати для ZO-1 та Occludin Immunohistochemistry

Позитивність ZO-1 та оклюдину була виявлена ​​у вигляді темно-червоного кольору в базолатеральній цитоплазмі клітин Сертолі, розташованих у сім’яних канальцях зародкового епітелію. У той час як інтенсивність імунореактивності ZO-1 та оклюдину була найвищою в контрольній групі (рис. 6A–C, рис. 7A–C, рис. 8(A1, A2) і рис. 9A, B) та групі APO (рис. 6D– F, малюнок 7D–F та малюнок 8(B1, B2)), а також спостерігалося зниження розподілу імунореактивності в групі MSG (малюнок 6G–I, малюнок 7G–I та малюнок 8(C1, C2)). Збільшення ZO-1 та оклюдинової позитивності спостерігалося в групі MSG плюс APO порівняно з групою MSG (Малюнок 6J–L, Малюнок 7J–L та Малюнок 8(D1, D2)).

3.10. Результати трансмісійної електронної мікроскопії

У контрольній групі та групах APO спостерігалася нормальна ультраструктура зародкового епітелію сім’яних канальців із численними сперматозоїдами та клітинами Сертолі, з’єднаними щільними з’єднаннями (Рис. 10A). Група APO мала подібну ультраструктуру, як і контрольна група (рис. 10B). У групі MSG спостерігалася вакуолізація та краплі ліпідів у зародкових епітеліальних клітинах сім’яних канальців, роз’єднання між з’єднаннями клітин Сертолі–Сертолі та пошкодження базальної пластинки сім’яних канальців (Малюнок 10C). Ультраструктура групи MSG плюс APO відображала нормальну організацію сім’яних канальців з невеликою кількістю ліпідних крапель у цитоплазмі (рис. 10D)

Як Cistanche підвищує тестостерон?

Цистанхе - це трава, яка традиційно використовується в китайській медицині для підвищення енергії, лібідо та загальної життєвої сили. Вважається, що Cistanche може підвищити рівень тестостерону шляхом пригнічення активності ферменту під назвою ароматаза, який перетворює тестостерон в естроген. Було також виявлено, що цистанхе збільшує виробництво лютеїнізуючого гормону (ЛГ) в організмі. ЛГ відіграє вирішальну роль у регуляції вироблення тестостерону в яєчках. Підвищуючи рівень ЛГ, Cistanche може опосередковано підвищувати вироблення тестостерону. Крім того, Cistanche також містить кілька фітохімічних речовин, таких як ехінакозид і актеозид, які мають антиоксидантні властивості. Ці сполуки можуть допомогти захистити яєчка та інші репродуктивні органи від окисного пошкодження, тим самим покращуючи їхню функцію та збільшуючи вироблення тестостерону. Загалом, точні механізми, за допомогою яких Cistanche підвищує рівень тестостерону, до кінця не вивчені, але, ймовірно, це взаємодія інгібування ароматази, збільшення виробництва ЛГ та надання антиоксидантної підтримки репродуктивній системі.

Далі буде...

Мерве Ачікель-Елмас 1,*, Салва Асма Алгілані 1, Бегум Шахін 1, Озлем Бінгол Озакпінар 2, Мерт Гечім 2, Кутай Кероглу 3 і Серап Арбак 1

1 Кафедра гістології та ембріології, Медичний факультет, Університет Аджибадема Мехмета Алі Айдінлара, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. No. 32, Atasehir, Стамбул 34752, Туреччина

2 Кафедра біохімії, Факультет фармації, Університет Мармара, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, Istanbul 34854, Turkey

3 Кафедра гістології та ембріології, Школа медицини, Університет Мармара, Basibuyuk Yolu No. 9 D:2, Maltepe, Istanbul 34854, Turkey