UPLC-Q-Orbitrap HRM в поєднанні з молекулярним стикуванням для дослідження матеріальної основи гіркого смаку та взаємозв'язку смаку в Cistanchia desertica

Абстрактний

 

На основі ультрапродуктивної рідинної хроматографії-квадруполе-електростатичного поля Orbitrap мас-спектрометрія високої роздільної здатності та молекулярного стикування UPLC-Q-orbitrap) та молекулярні стики, що представляють речовини, що представляють екстракту DeSerticola Cistanchis, були досліджені на те, щоб дослідити фонд, що займається розбиттям. По-перше, UPLC-Q-Orbitrap HRMS використовували для характеристики складових C. deserticola та було виявлено 69 хімічних компонентів. Молекулярне стикування цих хімічних компонентів з гірким смаковим рецептором призвело до скринінгу 20 гірких речовин, включаючи 6 фенілетанольних глікозидів, 5 флавоноїдів, 3 фенольних кислот, 2 циклоалкеніл-ефірних терпенів, 2 алкалоїдів та 2 інші компоненти. Екстракти того ж походження були зібрані з того ж місця походження, а гірко-презентуючі речовини досліджували за допомогою молекулярного стикування. Other components, nine batches of fresh C. deserticola samples were collected from different months of the same origin, divided into different months and different parts, and the quantitative value of bitterness of the samples was determined by the electronic tongue method, and the contents of six components in the samples (pineconotyloside, trichothecene glycoside, tubulin A, iso-trichothecene glycoside, Джиншихуаозид та джиннипінозид) визначали за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ), а загальні фенілетанол глікозиди у зразках визначали за допомогою спектрофотометричного методу УВЗ. photometric method to determine the contents of total phenylethanol glycosides, total polysaccharides, total alkaloids, total flavonoids, and total phenolic acids in the samples, and will be combined with chemometrics analysis on this basis, and verified by Pearson's correlation analysis, gray correlation analysis, and orthogona l partial least squares-discriminant analysis to verify the bitter components in C. Deserticola, які узгоджувались з результатами молекулярного стикування; і нарешті, з гірко-презентаційними речовинами як об'єктом дослідження.

Екстракт Cistanchis deserticola

 

Нарешті, мережевий фармакологічний прогноз та аналіз проводилися з гіркою речовиною як ціль, і було досліджено IP -адресу між цією гіркої речовини та гіркою ефективністю. Результати показали, що ключовими цілями речовини B ITTER були EGFR, PIK3CB та PTK2, і що гірка речовина може здійснювати гірку ефективність через дію на відповідних цілях захворювання, що означає, що гірка речовина C. Desertica є матеріальною основою гіркої ефективності. На закінчення це дослідження показало, що фенілетанол глікозиди, в основному пінеалозид, Мавритіана глікозид та Гіббе Реллін, є матеріальною основою гіркого смаку C. desertica, і технологія молекулярної док -ранку відіграє роль у скринінгу гірких речовин у традиційній китайській медицині, а також для того, щоб гайкі підсновки C. desertica мають стратість "Смак-ефективність" традиційної китайської медицини в майбутньому. Гіркі речовини в C. desertica мають гіркий смак та ефект, що забезпечить ідеї та посилання на майбутні дослідження щодо IP -адреси між смаком та наслідком у традиційній китайській медицині

 

 

 

Ключові слова Екстракт Cistanchis deserticola; UPLC-Q-Orbitrap HRMS; мережева фармакологія; молекулярне стикування; електронний язик; гіркі речовини;Смак-ефект відносини

 

Cistanche deserticola yc ma.є багаторічним кореневим паразитом родини Orobanchaceae, рід Cistanche, широко відомий як пустеля Кістанча [1]. Трав'яний класичний Шеннг стверджує, що Кістанш скуштує солодкий і злегка теплий. Однак він насправді має постійний і легкий гіркий смак після того, як його взяли. "Аромат" п’яти ароматів традиційної китайської медицини спочатку визначався на основі фактичного смаку ліків при смаці, але оскільки смак ліків тісно пов'язаний з його ефектом, він поступово перетворився на пояснення та узагальнення впливу ліків на "аромат" [2]. Cistanche записаний у багатьох класичних старовинних медичних книгах. Це впливає на живлення нирок та поповнення сутності, зволоження кишечника та полегшення запор. З давніх часів він використовувався для лікування захворювань, пов'язаних з дефіцитом нирок, включаючи сексуальну дисфункцію, жіноче безпліддя, втрату сутності та кров, хворобливість талії та колін, сухий кишечник та запор тощо [3]. Гіркота традиційної китайської медицини є одним із п’яти ароматів традиційної теорії китайської медицини і є важливою теоретичною основою для керівництва клінічним використанням традиційної китайської медицини. Гіркота - один із п’яти ароматів традиційної китайської медицини. Її характеристики є чистими, сушінням та зміцненням [4], і він відіграє важливу роль у керованому клінічному використанні традиційної китайської медицини. Більшість традиційних китайських лікарських засобів та традиційних препаратів китайської медицини мають гіркий смак. Традиційна китайська медицина вважає, що гіркі ароматизуючі речовини (далі, які називаються гіркими речовинами) у гірких лікарських засобах є ефективними речовинами [5]. Однак взаємозв'язок між гіркими речовинами у традиційних китайських лікарських засобах та їх гіркою ефективністю досі незрозумілий. Досі бракує відповідних наукових досліджень щодо того, чи гіркі речовини в гірких традиційних китайських лікарських засобах мають гірку ефективність. Cistanche містить різноманітні хімічні компоненти, в основному фенілетанол -глікозиди, циклопентанові ефірні терпени, лігнани та їх глікозиди, цукри тощо. Крім того, він також містить флавоноїди, фенольні кислоти, алкалоїди, летючі олії, амінокислоти, неорганічні кольки та інші компоненти [6]. Серед них фенілетанольні глікозидні сполуки вважаються основними ефективними компонентами Cistanche [7]. Cistanche Deserticola має два сезони збирання: весна та осінь. Дослідження показали, що вміст полісахариду весняного цистанш -десертикола низький, вміст фенілетанолу глікозид високий, а смак гіркий, але його антиоксидантна здатність сильна [8]. Можна побачити, що його гіркі компоненти мають певну кореляцію з ефективністю препарату, але матеріальна основа гіркого смаку Cistanche Deserticola досі є незрозумілою, що може обмежити його подальший розвиток.

Для того, щоб вивчити основу гіркої речовиниCistanche deserticolaі його взаємозв'язок з гіркою ефективністю (співвідношення смакових ефектів), це дослідження взяло екстракт Cistanche Deserticola як об'єкт дослідження та перевіряло гіркі речовини в Cistanche Deserticola за допомогою ультра-високої продуктивної рідинної хроматографії-чотириквіноле-електростатичного поля Орбіта з високою роздільною здатністю та Molecular Malecular (UPLC-Q-Quertrap HRMS) та MOLECURING MOLECURING DOVINGURIN; Вміст основних гірких лікарських компонентів визначали за допомогоюВисокопродуктивна рідинна хроматографія (ВЕРХ), а вміст кожної основної категорії гірких речовин визначався ультрафіолетовим спектрофотометрії. Ступінь гіркоти оцінювали електронною мовою, а гіркі компоненти були виявлені в поєднанні з хіміометрикою; і мережева фармакологічна технологія була використана для проведення шляху Kegg та аналізу збагачення на цілях гірких речовин у традиційній китайській медицині, а цілі гірких речовин були співвіднесені з цілями їх гіркої ефективності, щоб вивчити взаємозв'язок між гіркими речовинами та гіркою ефективністю в традиційній китайській медицині. Ідеї ​​досліджень показані на рисунку 1. Це дослідження повне використання сучасних методів дослідження технологій для вивчення смаку інформації Cistanche Deserticola, виявляючи його гіркі матеріальні основи та відносини смаку. Очікується, що він надасть посилання на науковий аналіз матеріальної основи смаку традиційної китайської медицини та дасть основу для поглибленого та точного розвитку та використання Cistanche Deserticola Resources Resources, що робить п’ять ароматів чіткішими, більш об'єктивними та стандартизованими, науковими вивченням наукової конотації та діючих відносин та маніфінгу, що стосується того, що вони мають раковину, млявці, млявці, млявці, що мають значення, млявість, млявці, млявці, що мають значення, млявість, млявці, млявих відносин, млявих відносин, млявих відносин, що мають відношення до власних сил. традиційної китайської медицини.

 

 

Рис.

 

1 матеріали

1.1 Лікарські матеріали

Свіжі зразки Deserticola Cistanche були зібрані в Аксу, Сіньцзян з квітня по грудень 2023 року. Зразки були ідентифіковані Лі Мінгджі, фармацевтом у лікарні народної округи Шая, як сушені м’ясисті, стебла з масштабами Cistanche Deserticola, пластинки гена Cistanche в сімействі Orobanchace. Зразки ваучерів зберігалися в лабораторії досліджень аптеки медичного університету Сіньцзян. Зразки очищали від домішок, нарізали свіжими та бланшрованими у воді протягом 5 хв відповідно до літератури, а потім обробляли, сушили на 60 градусах, подрібнювали та просіювали через сітку {3}}, див. Таблицю 1.

 

Зразки таблиці Інформація про Cistanche Deserticola

 

Ні	Кодування	Час збору	Попередня обробка перед висиханням	Місце виявлення
1	M1	2023-04-10	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
2	M2	2023-05-08	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
3	M3	2023-06-15	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
4	M4	2023-07-10	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
5	M5	2023-08-11	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
6	M6	2023-09-10	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
7	M7	2023-10-09	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
8	M8	2023-11-14	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
9	M9	2023-12-10	Цілі - шматочки рослин	Ціла рослина
10	P1	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Верхній епідерміс
11	P2	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Верхня кора
12	P3	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Верхня піт
13	P4	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Середній епідерміс
14	P5	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Середня кора
15	P6	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Середня котика
16	P7	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Нижчий епідерміс
17	P8	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Нижня кора
18	P9	2023-08-11	Розділ - конкретні шматочки	Нижня курка

 

1.2 Бази даних та програмне забезпечення

Tcmsp (https://tcmspw.com/tcmsp.php), GeneCards (https://www.gecards.org), omim (https://www.omim.org), uniprot (https://www.uniprot.org), pdb (http://www.rcsb.org), String (https://string-db.org), pubchem (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/), David (https://david.ncifcrf.gov/), alphafold structure database.ncifcrf.gov/) (https://alphafold.ebi.ac.uk/), alphafold2 та autodockvina (https://alphafold.ebi.ac.uk/) використовувались для молекулярного стикування. IBM SPSS Statistis 25 використовувався для аналізу Пірсона. Програмне забезпечення: Аналіз асоціації сірого проводили за допомогою Інтернет-веб-сайту spsspro (https://www.spsspro.com), ортогональний частковий аналіз найменших квадратів (OPLS-DA) проводили за допомогою програмного забезпечення Simca14.1 та мережевого фармакологічного аналізу за допомогою програмного забезпечення Cytoscape.

 

1.3 Інструменти та реагенти

Рідкий хроматограф з vanquish Ultra-Head, Orbitrap Exploris 120 мас-спектрометр високої роздільної здатності (Thermofisher Scientific, США); Sa -402 b електронний язик (вставка, Японія); LC -20 Високопродуктивний рідкий хроматограф (Шимадзу, Японія); УФ-видимий спектрофотометр (Shanghai Youke Instrument Co., Ltd.); Електронний баланс AUW2200 (фабрика Шимадзу Філіппіни); SK250 Ultrasonic Cleaner (Shanghai Kedao Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); DHG -9246 Електрична постійна температура вибуху сушіння (Shanghai Jinghong Експериментальне обладнання Co., Ltd.); Plusel+Horusl Ultrapure Water Instrument (Veolia, France).
The reference substances echinacoside (purity Greater than or equal to 98%, batch number PCL-#-A003), verbascoside (purity Greater than or equal to 98%, batch number PCL-#-M235), tubuloside A (purity Greater than or equal to 99%, batch number PCL-#-T003), scutellarin (purity Greater than or equal to 99%, batch number PCL-#-D005) та ISOvalascoside (чистота більше або дорівнює 98%, номер партії PCL-#-I236) були придбані у Standard Material Technology Sichuan Puxi'ao, Ltd; еталонні речовини геніпозид (чистота більше або дорівнює 98%, числа партії WP23120502), Rutin (чистота, що перевищує або дорівнює 98%, числа партії WP32110405), галлова кислота (чистота, що перевищує або дорівнює 98%, числа партії WP32140706), і бетаїн (чистота, що більше або дорівнює 98%, BEATCH, і Бетан (чистота, що більше або дорівнює 98%, BUTHARD, BETLATH номер, 98%, Номер 98%, Номер, 98%, Номер, 98%, Номер 98%, Номер 98%, Батчіть 98%, Батчіть 98%, Батчіть 98%, Батчіть 98%, Батчіть 98%, Набір. WP33654874) були придбані у Sichuan Weikeqi Biotechnology Co., Ltd.; Сіль, безводна глюкоза (аналітичний ступінь), ацетонітрил, метанол (хроматографічний ступінь) та фосфорну кислоту, були придбані у Sinopharm Chemical Re., Ltd.