Статеві відмінності в плазмових аутоантитілах до білків центральної нервової системи у ветеранів війни в Перській затоці порівняно зі здоровими та симптоматичними контрольними групами
Mar 22, 2022
Контакт: Одрі Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Електронна пошта:audrey.hu@wecistanche.com
Мохамед Б. Абу-Донія 1,*, Максін Х. Кренгель 2, Елізабет С. Лападула 1, Клара Г. Зундел 2, Джессіка ЛеКлер 3, Джозеф Массаро 3, Емілі Квінн 3, Ліза А. Конбой 4, Ефі Коккоту 4, Деніел Д. Нгуєн 5, Марія Абреу 6,7, Ненсі Г. Клімас 6,7 і Кімберлі Салліван 5,*
1 Відділ фармакології та біології раку, Медичний центр Університету Дьюка, Дарем, NC 27710, США;
2 кафедра неврології, Медична школа Бостонського університету, Бостон, Массачусетс 02118, США;
3 Департамент біостатистики, Бостонська школа громадської охорони здоров’я, Бостон, Массачусетс 02118, США;
4 факультет медицини Гарвардської медичної школи, Бостон, Массачусетс 02115, США;
5 Департамент охорони навколишнього середовища, Школа громадської охорони здоров'я Бостонського університету, Бостон, Массачусетс 02118, США;
6 Коледж остеопатичної медицини доктора Кірана С. Пателя, Інститут нейроімунної медицини, Південно-східний університет Нова, Форт-Лодердейл, Флорида 33314, США;
7 Department of Imunology, Miami VA Medical Center, Miami, FL 33125, USA
Анотація:
Ветерани війни в Перській затоці (GW) 1991 року страждали від хвороби війни в Перській затоці (GWI) протягом майже 30 років. Ця хвороба охоплює кілька систем організму, включаючи центральну нервову систему (ЦНС). Діагностика та лікування GWI складні, оскільки не було об’єктивного діагностичного біомаркера. Нещодавно ми повідомили про нещодавно розроблений біомаркер крові, який відрізняє GWI від здорових контрольних груп GW та симптоматичних контрольних груп із синдромом подразненого кишечника (IBS) та міалгічним енцефаломієлітом/синдромом хронічної втоми (ME/CFS). Це дослідження було розроблено для порівняння рівнів цих біомаркерів між чоловіками та жінками з GWI, а також ефектів, що залежать від статі, у порівнянні зі здоровими ветеранами GW та симптоматичним контролем (IBS, ME/CFS). Результати показали, що чоловіки та жінки з GWI відрізняються у 2 з 10 плазмових аутоантитіл, причому у чоловіків рівень аутоантитіл значно вищий. Чоловіки та жінки з GWI показали суттєво різні рівні аутоантитіл у 8 із 10 біомаркерів до нейрональних і гліальних білків у плазмі порівняно з контрольною групою. Підводячи підсумок, у цьому дослідженні було розглянуто корисність використання плазмових аутоантитіл до білків ЦНС для розрізнення чоловіків і жінок-ветеранів з GWI та інших здорових і симптоматичних контрольних груп.
Ключові слова: аутоантитіла ЦНС; хвороба війни в Перській затоці; Стать; біомаркери; білки; міалгічний енцефаломієліт/синдром хронічної втоми; синдром подразненої товстої кишки
1. Введення
Ветерани війни в Перській затоці (GW) страждали від захворювання, відомого як хвороба війни в Перській затоці (GWI), яка охоплює кілька систем організму, включаючи центральну нервову систему (ЦНС) [1–3]. Цей хронічний стан вражає приблизно 250000 ветеранів GW, включаючи значну частину з 40000 жінок, які брали участь у війні. Симптоми GWI перекриваються, але відрізняються від інших розладів, які також вражають жінок, включаючи міалгічний енцефаломієліт/синдром хронічної втоми (ME/CFS) і синдром подразненого кишечника (IBS). Відсутність об’єктивних діагностичних маркерів звела до мінімуму можливість узгодженої діагностики та лікування безлічі симптомів GWI. Нещодавно ми оцінили потенційний біомаркер плазми для GWI, і ми показали відмінності в осіб, які відповідають критеріям GWI, порівняно зі здоровими GW та контрольними особами без ветеранів із IBS та CFS. Враховуючи різні симптоми GWI у чоловіків і жінок, нашою наступною метою було оцінити можливі відмінності в цих плазмових біомаркерах між статями [4–8]. Визначення того, чи відрізняються аутоантитіла ЦНС між чоловіками та жінками з GWI та їхніми відповідними контролями, допоможе у подальшому вдосконаленні діагностичної користі цих як біомаркерів плазми. Жінки, які служили в GW 1991 року, повідомили про численні проблеми зі здоров'ям, багато з яких пов'язані зі статтю. Деякі дослідження свідчать про підвищення частоти проблем зі здоров’ям у жінок та інфекцій сечового міхура порівняно з контрольною групою ветеранів епохи GW [9]. У Ft. Встановлено, що когорта Девенса (FDC) ветеранів GW, жінок GW порівняно з контрольною групою без ветеранів має вищий ризик розвитку діабету, але нижчий ризик гіпертонії порівняно з даними Національного дослідження здоров’я та харчування (NHANES) за віком і статтю. збігається когорта [8].
Навпаки, чоловіки, які застосовували GW, повідомили про підвищення частоти семи хронічних станів здоров’я порівняно з чоловіками NHANES, включаючи значно вищі шанси повідомити про гіпертонію, високий рівень холестерину, серцевий напад, діабет, інсульт, артрит і хронічний бронхіт [8]. Оскільки це дослідження показало, що чоловіки РВ мають підвищений ризик захворювань, які є відомими факторами ризику подальших серцево-судинних і цереброваскулярних захворювань (наприклад, гіпертонія, високий рівень холестерину, діабет), чоловіки РВ можуть демонструвати підвищені показники біомаркерів ЦНС порівняно з їхніми жінками-ветеранами відповідники. Однак у недавньому дослідженні з використанням великої когорти біосховищ епохи GW (GWEBC) жінки, які застосовували GW, значно частіше повідомляли про симптоми, пов’язані з когнітивними, неврологічними проблемами та проблемами настрою, ніж жінки епохи GW [4]. Таким чином, у жінок із тілесним телом можуть також виявлятися підвищені біомаркери, пов’язані з ЦНС, порівняно з іншими когортами жінок. Крім того, при порівнянні чоловіків-ветеранів GW проти жінок було виявлено, що жінки-ветерани GW частіше користуються амбулаторною та стаціонарною медичною допомогою через 5 років після розгортання [10]. Було також виявлено, що у жінок із ГВ частіше трапляються тяжкі та помірні випадки ГВТ порівняно з їхніми колегами-чоловіками [5,11–13]. Декілька факторів можуть пояснити спостережувані статеві відмінності в GWI та індивідуальні симптоми, включаючи статеві відмінності у сприйнятливості до впливу нейротоксикантів у театрі та/або вищому впливі серед чоловічого персоналу. Ще в 1996 році ми припустили, що вплив хімічних речовин під час GW був провокуючим фактором GWI [14,15].
наслідкиекстракт цистанки трубчастої
В експериментальних дослідженнях ми продемонстрували, що комбінований вплив пестицидів і піридостигміну броміду (ПБ) спричиняє нейротоксичні ефекти, які перешкоджають функціонуванню нейронів і гліальних клітин, що призводить до довготривалих і потенційно нейродегенеративних ефектів [14–16]. Нейродегенерація включає загибель нейронів і гліальних клітин і вивільнення їх вмісту в кровообіг через порушений гематоенцефалічний бар’єр (ГЕБ), який потім можна виявити за допомогою аутоантитіл ЦНС у плазмі [17]. Раніше ми показали зміни BBB у наших тваринних моделях впливу GWI [18]. Раніше ми також показали, що ці плазмові маркери можуть бути виявлені на низьких рівнях в осіб без серйозних захворювань, але підвищуються в тих, хто має більше симптомів [16,19]. ЦНС складається з двох типів клітин: нейронів і опорних гліальних клітин. Нейрональні клітини містять декілька цитоскелетних білків, включаючи тау та нейрофіламенти [20,21]. Разом з мікротрубочками, виготовленими з тубуліну, вони утворюють кістяк цитоскелета аксонів. Ці білки беруть участь в аксональному транспорті основних поживних речовин, амінокислот і органел вниз по аксону [22]. Білки, асоційовані з мікротрубочками (MAP) -2 і тау, сприяють полімеризації та стабілізації мікротрубочок в аксонах, нейрофіламентах поперечного моста та мікротрубочках, що з’єднуються одна з одною; це допомагає підтримувати цитоскелет для аксонального транспорту [23]. Тау-білки локалізовані переважно в аксоні нейронних клітин. Підтримуючі гліальні клітини, олігодендроцити в ЦНС і шванівські клітини в периферичній нервовій системі (ПНС), продукують основний білок мієліну (MBP) і асоційований з мієліном глікопротеїн (MAG), які є мембранними протеоліпідами [24]. Гліальні астроцитарні білки продукують гліальний фібрилярний кислий білок (GFAP), компонент цитоскелета астроглії, який є високоспецифічним для ЦНС і вивільняється з астроцита в позаклітинний простір після пошкодження ЦНС [25]. Білок S100B, що зв’язує кальцій, також вивільняється астроцитними гліальними клітинами (рис. 1).
Багато з цих нейронних цитоскелетних і особливо гліальних білків знаходяться лише в ЦНС, а їхні аутоантитіла виявляються в периферичній крові, якщо ці білки в якийсь момент просочилися через ГЕБ і імунна система виробляє відповідь на них аутоантитіл [18,26] . Тимчасовий перебіг цього порушення BBB міг мати місце колись у минулому у цих осіб, що призвело до витоку цих білків із нейронів та/або глії. Таким чином, хоча S100B, маркер поточного компромісу ГЕБ, не відрізнявся в нашому попередньому дослідженні ветеранів з GWI, це не означає, що порушення ГЕБ не відбулося колись у минулому, спричиняючи тривалі виявлені аутоантитіла до цих білків ЦНС у крові. . Brain Sci. 2020, 10, x ДЛЯ РЕЦЕНЗІЇ 3 з 16, який є високоспецифічним для ЦНС і вивільняється з астроцита в позаклітинний простір після пошкодження ЦНС [25]. Білок S100B, що зв’язує кальцій, також вивільняється астроцитними гліальними клітинами (рис. 1). Багато з цих нейронних цитоскелетних і особливо гліальних білків знаходяться лише в ЦНС, а їхні аутоантитіла виявляються в периферичній крові, якщо ці білки в якийсь момент просочилися через ГЕБ і імунна система виробляє відповідь на них аутоантитіл [18,26] . Тимчасовий перебіг цього порушення BBB міг мати місце колись у минулому у цих осіб, що призвело до витоку цих білків із нейронів та/або глії. Таким чином, хоча S100B, маркер поточного компромісу ГЕБ, не відрізнявся в нашому попередньому дослідженні ветеранів з GWI, це не означає, що порушення ГЕБ не відбулося колись у минулому, спричиняючи тривалі виявлені аутоантитіла до цих білків ЦНС у крові. .
У цьому дослідженні досліджується вплив статі на наявність циркулюючих аутоантитіл класу імуноглобуліну G (IgG) проти специфічних для ЦНС нейрональних і гліальних білків у плазмі ветеранів GW з і без GWI, а також у контрольній групі не ветеранів із симптомами (СРК, і ME/CFS). Зокрема, ми припустили, що чоловіки та жінки-ветерани з GWI будуть відрізнятися один від одного за розподілом білків аутоантитіл ЦНС і що чоловіки та жінки GW матимуть вищі рівні білків аутоантитіл ЦНС, ніж інші симптоматичні групи з хронічними захворюваннями, включаючи IBS та ME/CFS. . Через вплив під час війни всі ветерани GW могли мати певний рівень компромісу BBB, про що свідчать аутоантитіла до ЦНС у плазмі, але ми припустили, що ті з GWI матимуть вищі рівні цих маркерів крові.
2. Матеріали та методи
2.1. Дослідження населення
Методи ті самі, що й у нашому нещодавно опублікованому дослідженні [19]. Коротко кажучи, плазму від ветеранів GW надали Консорціум досліджень хвороб війни у Перській затоці (GWIC), дослідження Dynamic Modeling of GWI від Nova Southeastern University, дослідження, що фінансується Конгресом під керівництвом Програми медичних досліджень (CDMRP), для Фонду досліджень у справах ветеранів Південної Флориди. і Education, Inc., випробування лікування акупунктурою та біорепозиторій дослідження подразненого кишечника в Гарварді/BIDMC. Схвалення інституційної ревізійної ради (IRB) було отримано від Бостонського університету, Нова Південно-Східного університету, Майамі VAMC і Гарвардського університету. Ті самі стандартні операційні процедури використовували для кожного місця дослідження для флеботомії, відділення плазми та аліквотування. Зразки плазми отримували від суб’єктів натще та зберігали при –80 ◦C. Вони залишалися замороженими до аналізів. Учасники дали згоду на відповідні дослідження з використанням рекомендацій Міжнародної конференції з гармонізації належної клінічної практики (ICH GCP). Канзаські критерії GWI використовувалися для визначення випадків GWI та контролю [27]. Критерії GWI штату Канзас вимагають, щоб ветерани GW схвалили симптоми принаймні в 3 із 6 доменів симптомів (втома, біль, когнітивні/неврологічні/настрій, шлунково-кишкові, дихальні та шкірні). Контроль ветеранів включав розгорнутих ветеранів з GW 1991, які не відповідали Канзаському GWI або критеріям виключення. Критерії виключення GWI Канзасу виключають осіб, які повідомляють про інший медичний стан, який міг би пояснити їхні хронічні медичні симптоми, включно з ветеранами з анамнезом центральної нервової системи або серйозними психічними розладами, які можуть вплинути на когнітивні функції (наприклад, епілепсія, інсульт, мозок пухлина, розсіяний склероз, хвороба Паркінсона, хвороба Альцгеймера, шизофренія). Зразки плазми з симптоматичних контролів були взяті з попередніх досліджень осіб із МЕ/СХУ та СРК [28,29]. Випадки ME/CFS визначали за критеріями Центру з контролю та профілактики захворювань (CDC) 1994 року [28]. Учасники IBS відповідали Римським критеріям III [29]. Повні когорти були описані в попередніх роботах (підвибірка GWIC, CFS, IBS, GWIC [16,30–33]).
2.2. Матеріали
Джерела білка також були описані раніше [19]: тубулін (людський рекомбінантний, Prospec Cat. # PRO-982), Microtubule-Associated Protein 2 (MAP-2, людський рекомбінантний, Origene, кат. # TP316775, людський рекомбінант), Tau-381 (людський рекомбінант, Millipore Cat. #AG952), нейрофіламентний білок (NFP, Prospec, Cat #PRO-523), кальмодулінкіназа II (людський рекомбінантний, CaMKII, Novus Біологічні препарати, кат. №H000000H15-P01), альфасинуклеїн (рекомбінантний людський, AnaSpec кат. №AS-55555), основний білок мієліну (MBP, людини, Фіцджеральд кат. №30R- AM030), асоційований з мієліном глікопротеїн (MAG, людський рекомбінантний, Sinobiological Cat. 131-86 H02H), гліальний фібрилярний кислий білок (GFAP, людина, CalBiochem Cat. #345996), білок S100B (людський, Millipore Cat. #30R). -AS002). Козячий антилюдський IgG, кон'югований з пероксидазою хрону, і покращений хемілюмінесцентний реагент був отриманий від Amersham Pharmacia Biotech (Піскатавей, Нью-Джерсі, США). Гелі додецилсульфату натрію (SDS) з градієнтом 2–20 відсотків (8 × 8) і 15 мМ трис-гліцину були отримані від Invitrogen (Карлсбад, Каліфорнія, США). Всі інші матеріали були закуплені в компанії Amersham.
переваги екстракту цистанки трубчастої
2.3. Заява про етику
Схвалення на використання збережених зразків крові з усіх дослідницьких центрів для цього дослідження було отримано від Комісії з клінічних досліджень системи охорони здоров’я Університету Дьюка 09.10.2017 та від Ради з огляду інституцій Медичного кампусу Бостонського університету 19.01. 2018 рік. Конкретними компонентами протоколу для Університету Дьюка були: Ідентифікатор протоколу: Pro00003202, Ідентифікатор посилання: 335940, Головний дослідник: Мохамед Абу Донія, Назва протоколу: «Пошкодження нервової системи». Спеціальними компонентами протоколу для Бостонського університету були ідентифікатор протоколу: H-34334, ідентифікатор посилання: 1288716, головний дослідник: Кімберлі Салліван, назва протоколу: «Нові біомаркери сироватки аутоантитіл і цереброспинальної рідини у ветеранів із хворобою війни в Перській затоці». Зразки плазми були надіслані зі схвалених IRB сховищ із досліджень Бостонського університету (IRB # H-32768), Південно-східного університету NOVA/Медичного центру Маямі VA (IRB № 4987.76 та IRB № 4987.75), лікарні Бет Ізраїль/Гарвардського університету ( IRB # 2011P-000124) і Школа акупунктури Нової Англії (IRB # 09-204).
2.4. Процедури
2.4.1. Плазмові процедури
Усі сайти дотримувалися однакового протоколу: для венепункції, обробки крові, розділення плазми, аліквотування та зберігання при -80 ◦C. Той самий протокол флеботомії та зразка були розіслані в письмовому вигляді на всі сайти та включали голодування перед забором крові вранці. Усі проаналізовані зразки були базовими зразками крові, зібраними до втручання. Зразки, використані в цьому дослідженні, попередньо не розморожувалися і були вільні від гемолізу за візуальним оглядом.
2.4.2. Вестерн-блот аналіз
У цьому дослідженні використовувався Вестерн-блот аналіз для визначення аутоантитіл проти специфічних білків у зразках плазми пацієнтів із ГВІ та здорових і симптоматичних осіб контролю за статтю. Цей аналіз дозволив визначити аутоантитіла та асоційовані ізоформи антигену. Як описано раніше, кожен зразок плазми аналізували в трьох примірниках [19]. Усі білки завантажували по 10 нг/доріжку, за винятком IgG, який завантажували як 100 нг/доріжку. Білки денатурували та піддавали електрофорезу на SDS-PAGE (градієнт від 4% до 20%), придбаному в Invitrogen (Карлсбад, Каліфорнія, США). Для кожного зразка сироватки використовували один гель. Білки переносили на мембрани з полівініліденфториду (PVDF) (Amersham). Неспецифічні сайти зв’язування блокували трис-буферизованим фізіологічним розчином Tween (TBST) (40 мМ трис (pH 7,6), 300 мМ NaCl і 0,1 відсотка Tween 20), що містить 5 відсотків знежиреного сухого молока, протягом 1 години при 22 ◦C. Мембрани інкубували зі зразками сироватки при розведенні 1:100 у TBST з 3-відсотковим знежиреним сухим молоком протягом ночі при 4 ◦C. Після п’яти промивань у TBST мембрани інкубували з розведенням 1:2000 козячого антитіла до людини IgG, кон’югованого з пероксидазою хрону (Amersham). Мембрани були розроблені за допомогою посиленої хемілюмінесценції з використанням протоколу виробника (Amersham) і реєстратора змінної моделі Typhoon 8600 (GE Lifesciences, Мальборо, Массачусетс, США). Інтенсивність сигналу кількісно визначали за допомогою програмного забезпечення для аналізу зображень Bio-Rad версії 4.5 (Hercules, CA, США). Усі тести проводилися з дослідниками, не враховуючи випадок-контроль і гендерний статус зразків.
2.4.3. Специфічність плазмових аутоантитіл
Раніше ми перевіряли специфічність плазмових і сироваткових аутоантитіл, виконуючи аналіз конкуренції пептид/антиген, під час якого в сироватку і плазму додавали цільовий білок або пептид [34]. Сироватку від випадкових здорових контрольних пацієнтів змішували з або без тау, MAP2 або MBP. Білкову суміш центрифугували при 15,000 об/хв, щоб видалити будь-які імунні комплекси. Потім супернатанти обережно видаляли та використовували в вестерн-блоттингу. Специфічність аутоантитіл проти всіх досліджуваних білків була підтверджена в подальшому дослідженні [35].
2.5. Статистика
Об’єднані дані представлені як середнє ± стандартне відхилення для безперервних змінних та кількість і відсоток учасників у кожній категорії для категоріальних змінних. Демографічні значення суб’єктів порівнювали з контрольними групами за допомогою безперервного t-критерію Стьюдента та хі-квадрат для категоріальних змінних. Середні значення аутоантитіл чоловіків і жінок GWI порівнювали за допомогою коваріаційного аналізу (ANCOVA) з поправкою на вік і расу. Раса використовувалася дихотомічно (кавказька чи ні). Далі середні значення GWI жінок порівнювали зі здоровими жінками GWI, а потім повторювали для чоловіків GWI та здорових чоловіків GW. Нарешті, середні значення GWI жінок порівнювали з об’єднаними 3 контрольними групами (контроль GW, IBS, ME/CFS) за допомогою ANCOVA з поправкою на вік і расу; цей аналіз потім повторили для чоловіків. Двостороннє значення p < 0.05="" було="" прийнято="" як="" статистично="" значуще="" для="" всіх="" аналізів,="" і="" аналізи="" не="" були="" скориговані="" для="" багатьох="" порівнянь.="" аналізи="" проводили="" за="" допомогою="" sas="" версії="" 9.4="" (sas="" institute="" inc.="" 2013.="" cary,="" nc,="">
Користь екстракту цистанки тубулозної
2.6. Розрахунки
Вимірювання оптичної щільності для випадків і контролю ділили на концентрацію сироваткового IgG; це значення для кожного суб'єкта було нормалізовано до контрольної групи та виражено як зміна порівняно зі здоровою контрольною групою. Таким чином, результати виражаються як середні значення довільних одиниць оптичної щільності в трьох примірниках, нормалізованих до оптичної щільності IgG, порівняно зі здоровими особами контролю.
2.7. Індекс аутоантитіл ЦНС (CAI)
Цей показник визначає загальний нейродегенеративний стан індивіда на основі рівня аутоантитіл у плазмі. Він розраховується шляхом додавання всіх значень аутоантитіл для кожного нейронного білка, а потім ділення суми на кількість використаних аутоантитіл. Нарешті, значення множиться на 10 для отримання легкої оцінки CAI, як повідомлялося раніше під попередньою назвою індекс нейродегенерації [19].
3. Результати
3.1. Демографія учасників
Вибірка дослідження включала загалом 171 ветерана з GWI (137 чоловіків, 34 жінки), загалом 56 здорових чоловіків із GW та 4 здорових жінок-ветеранів із контрольної групи, загалом 3 чоловіків та 32 жінки із СРК та загалом 5 чоловіків і 45 жінок із симптоматичним контролем CFS (табл. 1). Деякі з груп (чоловіки проти GWI жінок та GWI проти всіх комбінованих контрольних груп) суттєво відрізнялися за віком і расою (кавказька чи ні), тому всі подальші аналізи контролювали ці демографічні змінні.
Це дослідження повідомляє про результати використання наших нещодавно розроблених плазмових нейродегенеративних біомаркерів для диференціації чоловіків і жінок військовослужбовців, які служили в 1990/1991 GW і розвинули симптоми GWI або залишилися здоровими. Крім того, було проведено аналізи для виявлення відмінностей між жінками з GWI проти жінок з GW, а потім об’єднаною контрольною групою жінок (здорові ветерани GW, IBS, ME/CFS), а також між чоловіками з GWI проти здорових чоловіків GW, а потім з комбінованою групою GW. контрольна чоловіча група. Рівні 10 циркулюючих аутоантитіл проти нейронних білків були проаналізовані в плазмі чоловіків і жінок-ветеранів з GWI, у здорових чоловіків і жінок з GW, а також у чоловіків і жінок із симптомами CFS і IBS, які використовувалися як контроль.
3.2. Вплив статі на рівні аутоантитіл проти нейронних білків плазми
3.2.1. Результати аналізу аутоантитіл за статтю для випадків GWI та лише здорових GW
Це дослідження охоплювало 171 зразок плазми ветеранів з GWI, у тому числі 137 (80,2 відсотка) чоловіків (середній вік 492- років) і 34 жінки (19,9 відсотка) (із середнім віком 46,9 років) (Таблиця 1). ). Відмінності між чоловіками та жінками щодо аутоантитіл у плазмі в групах GWI були виявлені такими, що чоловіки з GWI продемонстрували значно вищі рівні тубуліну та MAG порівняно з жінками-ветеранами з GWI (табл. 2, рис. 2). Там, де жінки мали вищі середні значення, ніж чоловіки, антитіл не було. Ми також порівняли здорових чоловіків вагою 56 ГВт (середній вік 50,5 років) із здоровими жінками вагою 4 ГВт (середній вік 56,5 років). Хоча нам не вистачало статистичної потужності, не було виявлено суттєвих відмінностей між здоровими контрольними групами чоловічої та жіночої статі щодо будь-яких аутоантитіл (дані не показані).
3.2.2. Результати аутоантитіл у плазмі чоловіків-ветеранів із GWI проти здорових чоловіків-ветеранів, а потім жінок із GWI проти здорових жінок-ветеранів
Другий аналіз порівнював чоловіків-ветеранів із GWI (N=137) зі здоровими чоловіками GWI (N=56) і жінок GWI (N=34) зі здоровими жінками GW (N=4 ). У порівнянні зі здоровими чоловіками, чоловіки GWI мали значно вищі значення аутоантитіл для 9 із 10 аутоантитіл, за винятком S100B. Порівняно зі здоровими жінками, жінки з GWI мали значно вищі значення аутоантитіл для 2 з 10 аутоантитіл, включаючи GFAP і тубулін (таблиця 3).
3.2.3. Результати аутоантитіл у плазмі чоловіків-ветеранів GWI проти всіх чоловіків контрольної групи та жінок-ветеранів GWI проти всіх жінок контрольної групи
У третьому аналізі порівнювали ветеранів-чоловіків із GWI (n {{0}}) і комбінованим СРК, ME/CFS і здорових контрольних чоловіків-ветеранів GW (n=64) і ветеранів-жінок з GWI (n=34) і комбіновані СРК, ME/CFS і контроль здоров’я жінок-ветеранів GW (n=81) (Таблиця 4). У порівнянні з усіма чоловіками контрольної групи, чоловіки з GWI показали значно вищі (p < 0,01)="" середні="" рівні="" 9="" із="" 10="" аутоантитіл="" проти="" нейронних="" білків="" (тубуліну,="" тау,="" map-2,="" mbp,="" nfp,="" mag,="" camkii,="" -syn="" і="" gfap).="" для="" s100b="" не="" спостерігалося="" істотної="" різниці.="" жінки-ветерани="" з="" gwi="" показали="" значно="" підвищені="" (p="">< 0,01)="" середні="" рівні="" 8="" із="" 10="" аутоантитіл="" у="" порівнянні="" з="" комбінованою="" жіночою="" контрольною="" групою="" (срк,="" me/cfs,="" здорові="" ветерани="" контрольної="" gw),="" включаючи="" тубулін,="" тау,="" map{{17}="" },="" mbp,="" mag,="" nfp,="" camkii="" і="" -syn="" (таблиця="">
3.2.4. Значення CAI за статтю у чоловіків і жінок у випадках GWI порівняно з контрольною групою чоловіків і жінок
Коли всі аутоантитіла були об’єднані в бал CAI, чоловіки з GWI мали найвищі значення сумарних об’єднаних аутоантитіл, як вказує бал CAI 41,1, а у жінок з GWI показник CAI становив 32,4. Ці значення статистично значно відрізнялися за ANCOVA з поправкою на вік і расу (p=0.007). Показник CAI контрольної групи чоловіків мав середнє значення 21,4, що було статистично нижче, ніж у чоловіків GWI (p < 0.0001)="" (рис.="" 3).="" показник="" cai="" контрольних="" жінок="" із="" gw="" мав="" середній="" бал="" 12,0,="" який="" був="" статистично="" нижчим,="" ніж="" у="" жінок="" з="" gwi="" (p=""><0,021). об’єднана="" контрольна="" група="" чоловіків="" мала="" середній="" cai="" 21,5,="" що="" було="" статистично="" значно="" нижчим,="" ніж="" група="" чоловіків="" gwi="" (p=""><0,0001). крім="" того,="" комбінована="" контрольна="" група="" жінок="" мала="" середній="" cai="" 18,7,="" що="" також="" було="" значно="" нижчим,="" ніж="" група="" жінок="" gwi="" (p=""><0,0001). у="" цьому="" дослідженні="" наші="" результати="" як="" чоловіків,="" так="" і="" жінок="" з="" gwi="" показали,="" що="" їхні="" значення="" cai="" були="" вищими="" за="" 90="" відсотків="" контрольної="">
4. Обговорення
Це дослідження з використанням наших раніше підтверджених плазмових біомаркерів аутоантитіл до ЦНС показує, що існує різниця між чоловіками та жінками-ветеранами з GWI, причому у ветеранів-чоловіків рівень 2 із 10 аутоантитіл (тубулін, MAG), пов’язаних з аксональними захворюваннями, значно вищий. і функції олігодендроцитів (рис. 2). При поєднанні всіх аутоантитіл у нейродегенеративний індекс аутоантитіл ЦНС (CAI) значний
спостерігалася різниця між чоловіками з GWI та жінками з GWI, так що чоловіки з GWI мали більший загальний білковий тягар аутоантитіл і значно вище значення CAI. У нашому другому наборі аналізів порівнювали ветеранів-чоловіків із GWI зі здоровими контрольними групами чоловіків, а потім повторили аналізи для жінок-ветеранів із GWI порівняно зі здоровими жінками з GW. Наш наступний аналіз порівнював ветеранів-чоловіків з GWI з усіма чоловіками контрольної групи з нашого попереднього дослідження (здорові ветерани GW, не ветерани з IBS або ME/CFS) [19]. Потім ми провели той самий аналіз, порівнюючи жінок-ветеранів із GWI з комбінованою контрольною групою, що складалася лише з жінок (не ветерани з IBS та ME/CFS). Результати показали, що чоловіки з GWI мали значно вищі рівні аутоантитіл для 9 з 10 аутоантитіл порівняно зі здоровими чоловіками-ветеранами GW або з комбінованою контрольною групою чоловіків.
Жінки з GWI показали значно вищі значення для 2 з 10 аутоантитіл у порівнянні зі здоровими жінками-ветеранами GW та з 8 з 10 аутоантитіл у порівнянні з їх відповідною комбінованою жіночою контрольною групою (не ветерани з IBS та ME/CFS). Аналіз CAI, у якому порівнювали чоловіків GWI з контрольною групою чоловіків і жінок GWI з відповідною контрольною групою, також показали значно вищі значення для чоловіків і жінок GWI, у два рази перевищуючи значення порівняно з відповідними контрольними. Ці результати доповнюють наші попередні висновки, згідно з якими використання граничного значення 30 або більше балів CAI дозволить відрізнити GWI від інших хронічних розладів. Ці результати вказують на те, що це обмеження відповідає як чоловікам, так і жінкам-ветеранам з GWI. Хоча чоловіки та жінки-ветерани з GWI мали вищі рівні аутоантитіл, ніж їхні відповідні контрольні групи, вони відрізнялися один від одного лише двома білками аутоантитіл ЦНС. Однак загальний комбінований бал CAI був значно вищим для чоловіків з GWI. Два суттєво різні білки включали тубулін і MAG, які пов’язані з функціонуванням аксонів і олігодендроцитів, які були пов’язані з історією легких черепно-мозкових травм (mTBI) і впливу хімічної зброї. Ці результати збігаються з нашими попередніми дослідженнями, які показали підвищення рівня mTBI та впливу хімічної зброї під час війни, особливо у чоловіків-ветеранів із GWI [30,36,37].
Насправді ця гіпотеза багаторазового ураження припускала, що ті, хто зазнає як mTBI, так і хімічної зброї, повідомлятимуть про більше хронічних симптомів здоров’я, які можуть бути пов’язані з цими аксональними та мієліновими патобіологічними маркерами. Відповідно, Carney et al. порівняли досвід бойових дій, професійне та інше опромінення, пов’язане зі службою, і використання медичних послуг ветеранами GW чоловіків і жінок і повідомили про подібний військовий досвід, але ветерани-чоловіки частіше беруть участь у бойових діях. Однак не було виявлено жодних суттєвих гендерних відмінностей щодо впливу розчинників/нафтохімікатів, інфекційних захворювань, нейротоксинів, теплового стресу, травми чи радіації [38]. Крім того, жінки-ветерани з GWI відрізнялися від здорових жінок GW за двома маркерами, включаючи гліальний маркер (GFAP) і нейрональний цитоскелетний маркер (Тубулін). Ці результати свідчать про те, що жінки з GWI, схоже, демонструють більше цитоскелетних і нейрозапальних змін нейронів у порівнянні зі здоровими контрольними GW або жінками з IBS або ME/CFS. Чоловіки-ветерани з GWI відрізнялися від здорових чоловіків GW вищими значеннями всіх аутоантитіл, за винятком гострого гліального маркера BBB S100B та значення CAI, яке було вдвічі вище, ніж у контрольній групі.
Коли жінок з GWI порівнювали з комбінованою контрольною групою, вони показали вищі рівні аутоантитіл за всіма маркерами, крім гліальних маркерів GFAP і S100B. Знову ж таки, їх значення CAI було майже вдвічі більше, ніж у комбінованих контрольних. Подібно до попереднього аналізу, ветерани-чоловіки з GWI не відрізнялися від своїх відповідних контрольних груп щодо гліальної активації та гострого BBB маркера S100B. Це свідчить про те, що чоловіки-ветерани GWI можуть демонструвати більшу хронічну гліальну активацію, пошкодження нейронів і нейрозапалення, ніж їхні чоловічі контрольні здорові та симптоматичні колеги з IBS та ME/CFS, оскільки S100B є маркером поточного порушення ГЕБ, а GFAP є маркером поточного нейрозапалення [39,40]. Це тому, що GFAP секретується активованими астроцитами, що призводить до нейрозапалення [41–43]. Що стосується інтеграції наших висновків у більший обсяг досліджень GWI, пов’язаних із статевими відмінностями, було показано, що існують відмінності в імунних запальних маркерах і в загальній частоті симптомів здоров’я між чоловіками та жінками-ветеранами GW [5,8,13]. ,44–46]. Поточне дослідження доповнює літературу тим, що чоловіки-ветерани GW мають вищі загальні значення аутоантитіл (як оцінено за коефіцієнтом CAI), і що результати узгоджуються з тим, що чоловіки та жінки потенційно можуть відчувати підвищення аутоантитіл до подібного ступеня, але з меншою збільшення аутоантитіл у жінок, пов’язане з більшим тягарем симптомів. Ці результати свідчать про необхідність подальшого вивчення чутливості граничного показника CAI 30 як для чоловіків, так і для жінок-ветеранів із GWI. Аутоантитіла до нейронних білків, окрім того, що є біомаркерами крові, також є ознаками нейродегенерації та можуть пояснити механізми захворювань мозку та ефекти старіння [26,47].
Переваги екстракту cistanche tubulosa
Наразі єдиними постійними факторами ризику GWI є вплив хімічних речовин та mTBI в анамнезі [30,36,37,48–51]. Ці хімічні речовини включають піридостигміну бромід, пестициди, включаючи інсектициди перметрин і ліндан, а також засіб від комах, DEET (N, N-діетил-м-толуамід), фосфорорганічні інсектициди та нервово-паралітичні гази, зарин і циклозарин, які зараз відомо, що вони негативно впливають на ЦНС у незначних або комбінованих дозах [3,14,15,48,51–58]. Дослідження механізмів, за допомогою яких сполуки OP викликають нейродегенерацію, встановили, що OP підвищують активність і експресію кальцій-кальмодулін кінази II (CaMKII), яка викликає гіперфосфорилювання нейронних білків, що призводить до їх агрегації та уповільнення аксонального транспорту, що призводить до загибелі нейронних клітин. [51,59–62]. З цим погоджується наш попередній висновок про те, що екіпажі авіакомпаній, які зазнали впливу ОП, виробили аутоімунні антитіла до нейронних білків [34]. Збільшення аутоантитіл до нейрональних білків, таких як Tau, NFP, MAG, MBP і GFAP, узгоджується з дослідженням візуалізації мозку в іншій когорті екіпажів авіакомпаній, яке показало зниження мікроструктури білої речовини мозку та церебральної перфузії, що може бути потенційною причиною когнітивних порушень і дефіцит настрою, про який повідомляли екіпажі [63]. Значення цього висновку полягає в тому, що GFAP є маркером активації астроцитів, і астроцити можуть безпосередньо взаємодіяти та обмежувати судинну мережу мозку, включаючи капіляри, які беруть участь у церебральній перфузії та нейрозапаленні. Скарги на симптоми здоров'я, про які повідомляють ветерани GW, узгоджуються з наслідками після впливу пестицидів, таких як органофосфати, піретроїди та DEET [51,64,65].
Підвищена кількість аутоантитіл проти нейрофіламентів, тау, тубуліну та основних білків мієліну, які є біомаркерами мієлінових і нейрональних цитоскелетних порушень, включаючи нестабільність мікротрубочок, дегенерацію аксонів і змінений аксональний транспорт, було виявлено в багатьох дослідженнях клітин і тварин на моделях індукованих токсикантами GWI [66–74]. Наші результати узгоджуються з попередніми звітами, які показують збільшення різних аутоантитіл у меншому, а потім більшому дослідженні зразків крові ветеранів GW [16,19,75–78]. Наскільки нам відомо, це перше дослідження для оцінки статевих ефектів цих аутоантитіл у ветеранів із GWI порівняно зі здоровими та симптомними групами порівняння. Таким чином, результати нинішнього дослідження впливу статі на біомаркери крові показали, що рівні аутоантитіл були значно вищими як для чоловіків, так і для жінок-ветеранів GW порівняно з контрольною групою [19]. За наявності статевої різниці ветерани-чоловіки з GWI демонстрували вищі рівні аутоантитіл, а також загальний бал CAI, ніж жінки-ветерани з GWI. Це узгоджується з ситуацією на театрі військових дій: хоча чоловіки та жінки мали подібний військовий досвід, чоловіки частіше брали участь у боях і мали вищі показники mTBI [30,36–38]. Це не означає, що жінки-ветерани не мають підвищених рівнів інших симптомів цього багатофакторного розладу, а скоріше те, що чоловіки-ветерани демонструють більше відмінностей у аутоантитілах до ЦНС, ніж жінки-ветерани, на що вказують вищі загальні значення CAI.
Обмеження
Як і більшість досліджень, наше дослідження мало обмеження. У деяких аналізах ми мали невеликі розміри груп, що зменшувало нашу здатність бачити відмінності між групами. Особливо це стосувалося порівнянь жінок. Оскільки основна увага цього дослідження була спрямована на оцінку GWI проти симптоматичних контрольних груп, у нас не було здорової контрольної групи без ветеранів для порівняння, яка, можливо, надала б більшої ясності результатам, якби цю групу включили. У цьому дослідженні ми використовували критерії Канзасу для GWI, які повинні були виключити відомі випадки розладів, включаючи хворобу Альцгеймера (БА), хворобу Паркінсона (ХП) та інші хронічні захворювання, які могли бути причиною їх хронічних симптомів [27]. У цьому дослідженні ми продемонстрували зв’язок між аутоантитілами, особливо у ветеранів GWI, у порівнянні зі здоровими та симптоматичними контрольними групами за статтю. Однак тимчасовий зв’язок між цими станами та виробленням аутоантитіл залишається неясним. Потрібні додаткові дослідження, щоб визначити, чи є це білки ЦНС крові, отримані від контакту 30 років тому, чи є поточні зміни ЦНС, які викликають ці білки аутоантитіл. Інші більш масштабні дослідження з жінками-ветеранами також допомогли б у подальшому підтвердити патобіологічний вплив GWI на жінок-ветеранів. Основною перевагою нашого дослідження є те, що воно представляє як здорові, так і симптоматичні групи ветеранів GW, а також симптоматичні не ветерани контрольної групи з ME/CFS або IBS. Це свідчить про те, що як чоловіки, так і жінки-ветерани з GWI відрізняються не тільки від своїх здорових ветеранів GW, але також мають більше відмінностей у ЦНС, ніж інші групи чоловіків і жінок з хронічними захворюваннями з кількома симптомами. Крім того, проводився аналіз аутоантитіл до ЦНС, коли співробітники лабораторії не знали про статус усіх учасників.
5. Висновки
Цього року виповнюється 30 років війни в Перській затоці 1990/1991 років. Протягом більшої частини цього часу не вистачало діагностичних інструментів для точної діагностики розладу, що перешкоджало як точній діагностиці, так і вкрай необхідному лікуванню ветеранів. Наша лабораторія була однією з перших, хто запропонував і задокументував, що GWI пов'язаний з впливом хімічних речовин під час війни і що ці впливи негативно вплинули на ЦНС. Крім того, ми задокументували відмінності в аутоантитілах між GWI та GWhealthy та симптоматичним контролем. У цьому дослідженні підтверджено наявність статевого ефекту для цих груп: чоловіки та жінки з GWI демонструють вищі рівні аутоантитіл, ніж їхні відповідні контрольні групи, а також чоловіки-ветерани з GWI, які демонструють найбільший тягар аутоантитіл. Після подальшої перевірки ми сподіваємось, що наш нещодавно розроблений сумарний показник індексу нейродегенерації аутоантитіл до ЦНС (CAI) 30 або більше може бути використаний для розробки об’єктивних діагностичних маркерів GWI та порівняння ефективності випробувань лікування чоловіків і жінок-ветеранів GW.
Це наш продукт проти втоми! Натисніть на картинку, щоб дізнатися більше!
Список літератури
1. Ракгві, Р. Хвороби війни в Перській затоці та здоров’я ветеранів війни в Перській затоці: рекомендації щодо дослідження; Урядова друкарня США: Вашингтон, округ Колумбія, США, 2008.
2. Racgwi, R. Gulf War Illness and the Health of Gulf War Veterans: Research Update and Recommendations, 2009–2013; Урядова друкарня США: Вашингтон, округ Колумбія, США, 2014.
3. Білий Р.Ф.; Стіл, Л.; О'Каллаган, Дж.П.; Салліван, К.; Бінс, Дж. Х.; Голомб, Б.А.; Блум, Ф.Е.; Бункер, JA; Кроуфорд, Ф.; Грейвс, Дж. К.; та ін. Останні дослідження хвороб та інших проблем зі здоров’ям під час війни в Перській затоці 1991 року ветеранів війни в Перській затоці: вплив токсичних речовин під час розгортання. Cortex 2016, 74, 449–475. [CrossRef] [PubMed]
4. Салліван, К.; Кренгель, М.; Хебоян, В.; Шілдрот, С.; Вілсон, CC; Іобст, С.; Клімас, Н.; Кафлін, С. С. Поширеність і характер симптомів серед жінок-ветеранів епохи війни в Перській затоці 1991 року: 25 років потому. J. Жіноче здоров'я 2020, 29, 819–826. [CrossRef] [PubMed]
5. Хебоян В.; Кренгель, М.; Салліван, К.; Іобст, С.; Клімас, Н.; Вілсон, CC; Кафлін, С. С. Статеві відмінності у захворюваннях, які виникають у війні в Перській затоці: повторний аналіз даних дослідження ВПС США з використанням CDC та модифікованих визначень випадків у Канзасі. Ж. Оккуп. Навколишнє середовище. Мед. 2019, 61, 610–616. [CrossRef] [PubMed]
6. Кафлін, С.С.; Хебоян, В.; Салліван, К.; Кренгель, М.; Вілсон, CC; Іобст, С.; Клімас, Н. Серцево-судинні захворювання серед жінок-ветеранів епохи війни в Перській затоці 1991 року. J. Environ. Health Sci. 2019, 5, 24–25. [CrossRef] [PubMed]
7. Кафлін, С.С.; Кренгель, М.; Салліван, К.; Пірс, П.Ф.; Хебоян, В.; Wilson, CC Огляд епідеміологічних досліджень здоров'я жінок-ветеранів війни в Перській затоці. J. Environ. Health Sci. 2017, 3. [CrossRef] [PubMed]
8. Зундел, CG; Кренгель, MH; Херен, Т.; Yee, MK; Грассо, CM; Янулевич Ллойд, Пенсільванія; Кафлін, СС; Салліван, К. Частота хронічних медичних захворювань у ветеранів війни в Перській затоці 1991 року порівняно з населенням у цілому. Міжн. J. Environ. рез. Public Health 2019, 16, 949. [CrossRef] [PubMed]
9. Пірс, П. Ф. Моніторинг здоров'я жінок-ветеранів війни в Перській затоці. Федеральна премія медсестер. Mil. Мед. 2005, 170, 349–354. [CrossRef]
10. Пірс, П. Ф.; Антонакос, К.; Дероба, Б. А. Використання медичної допомоги та задоволення від гендерних проблем зі здоров'ям серед жінок-військових. Mil. Мед. 1999, 164, 98–102. [CrossRef]
11. Вулф, Дж.; Проктор, С.П.; Еріксон, DJ; Hu, H. Фактори ризику багатосимптомної хвороби у ветеранів армії США під час війни в Перській затоці. Ж. Оккуп. Навколишнє середовище. Мед. 2002, 44, 271–281. [CrossRef]
12. Стіл, Л.; Састре, А.; Юркович, М.М.; Кук, М. Р. Комплексні чинники в етіології хвороби війни в Перській затоці: вплив воєнного часу та фактори ризику в підгрупах ветеранів. Навколишнє середовище. Перспектива здоров'я. 2012, 120, 112–118. [CrossRef]
13. Дурса Є.К.; Барт, С.К.; Портер, BW; Шнайдерман, А. І. Стан здоров’я жінок і чоловіків, ветеранів війни в Перській затоці та епохи Перської затоки: популяційне дослідження. Проблеми жіночого здоров'я 2019, 29, S39–S46. [CrossRef] [PubMed]
14. Абу-Донія, MB; Вілмарт, КР; Абдель-Рахман, А.А.; Дженсен К. Ф.; Oehmen, FW; Kurt, TL Підвищена нейротоксичність після одночасного впливу піридостигміну броміду, DEET і хлорпірифосу. Фундамент. апл. Токсикол. 1996, 34, 201–222. [CrossRef] [PubMed]
15. Абу-Донія, MB; Вілмарт, КР; Дженсен К. Ф.; Oehmen, FW; Курт, Т. Л. Нейротоксичність в результаті спільного впливу піридостигміну броміду, діета та перметрину: наслідки хімічного впливу війни в Перській затоці. J. Toxicol. Навколишнє середовище. Здоров'я 1996, 48, 35–56. [CrossRef] [PubMed]
16. Абу-Донія, MB; Конбой, Луїзіана; Коккотоу, Е.; Якобсон, Е.; Елмасрі, Е.М.; Елкафраві, П.; Нілі, М.; Бас, CRD; Салліван, К. Скринінг нових біомаркерів центральної нервової системи у ветеранів із хворобою війни в Перській затоці. Нейротоксикол. Тератол. 2017, 61, 36–46. [CrossRef]
17. Боуєр, Дж. Ф.; Саркар, С.; Беркс, С.М.; Гесс, JN; Толані, С.; О'Каллаган, Дж.П.; Hanig, JP Мікрогліальна активація та реакція на васкулатуру в результаті гострого впливу LPS. Нейротоксикологія 2020, 77, 181–192. [CrossRef]
18. Абдель-Рахман, А.; Шетті, А. К.; Абу-Донія, М. Б. Порушення гематоенцефалічного бар’єру та загибель нейрональних клітин у поясній корі, зубчастій звивині, таламусі та гіпоталамусі в щурячій моделі синдрому війни в Перській затоці. нейробіол. дис. 2002, 10, 306–326. [CrossRef]
19. Абу-Донія, MB; Лападула, Е.С.; Кренгель, MH; Квінн, Е.; ЛеКлер, Дж.; Массаро, Дж.; Конбой, Луїзіана; Коккотоу, Е.; Абреу, М.; Клімас Н.Г.; та ін. Використання плазмових аутоантитіл білків центральної нервової системи для відрізнення ветеранів із хворобою війни в Перській затоці від здорових і симптоматичних контрольних груп. Brain Sci. 2020, 10, 610. [CrossRef]
20. Лі, Г.; Кован, Н.; Кіршнер, М. Первинна структура та гетерогенність білка тау з мозку миші. Наука 1988, 239, 285–288. [CrossRef]
21. Тальяферро, П.; Рамос, AJ; Onaivi, ES; Еврард, С.Г.; Lujilde, J.; Brusco, A. Нейрональний цитоскелет і синаптична щільність змінюються після тривалого лікування агоністом канабіноїдних рецепторів WIN 55, 212-2. Brain Res. 2006, 1085, 163–176. [CrossRef]
22. Laferrière, NB; MacRae, TH; Браун, Д. Л. Синтез та збірка тубуліну в диференціюючих нейронах. Біохім. Cell Biol. 1997, 75, 103–117. [CrossRef]
23. Хоші, М.; Акіяма, Т.; Шинохара, Ю.; Міята, Ю.; Огавара, Х.; Нісіда, Е.; Sakai, H. Протеїн-кінас-C-каталізоване фосфорилювання домену зв'язування мікротрубочок білка 2, пов'язаного з мікротрубочками, пригнічує його здатність індукувати полімеризацію тубуліну. Євро. J. Biochem. 1988, 174, 225–230. [CrossRef] [PubMed]
24. Яух, ЄС; Ліндселл К.; Бродерік, Дж.; Фаган, SC; Тіллі, BC; Levine, SR Асоціація серійних біохімічних маркерів із гострим ішемічним інсультом: дослідження інсульту Національного інституту неврологічних розладів та інсульту з рекомбінантним тканинним активатором плазміногену. Інсульт 2006, 37, 2508–2513. [CrossRef] [PubMed]
25. Кевесді, Е.; Люкль, Дж.; Буковікс, П.; Фаркаш, О.; Пал, Дж.; Цайтер, Е.; Szellár, D.; Доці, Т.; Комолі, С.; Büki, A. Оновлення білкових біомаркерів при черепно-мозковій травмі з акцентом на клінічне використання у дорослих і педіатрії. Acta Neurochir. 2010, 152, 1–17. [CrossRef] [PubMed]
26. Мейн, К.; Білий, JA; McMurran, CE; Рівера, FJ; де ла Фуенте, А. Г. Старіння та нейродегенеративні захворювання: адаптивна імунна система – друг чи ворог? Фронт. Старіння Neurosci. 2020, 12, 572090. [CrossRef] [PubMed]
27. Стіл, Л. Поширеність і характер хвороби війни в Перській затоці у ветеранів Канзасу: зв'язок симптомів з характеристиками особи, місцем і часом військової служби. Am. J. Epidemiol. 2000, 152, 992–1002. [CrossRef] [PubMed]
28. Фукуда, К.; Страус, SE; Гікі, І.; Шарп, MC; Доббінс, Дж. Г.; Комарофф А. Синдром хронічної втоми: Комплексний підхід до його визначення та вивчення. Міжнародна група з вивчення синдрому хронічної втоми. Енн Інтерн. Мед. 1994, 121, 953–959. [CrossRef]
29. Лонгстрет, Г.Ф.; Томпсон, WG; Чей, В.Д.; Хоутон, Луїзіана; Мерін, Ф.; Шпіллер Р.Ц. Функціональні розлади кишечника. Гастроентерологія 2006, 130, 1480–1491. [CrossRef]
30. Янулевич, П.; Кренгель, М.; Квінн, Е.; Херен, Т.; Тумі, Р.; Кілліані, Р.; Зундел, К.; Аджама, Дж.; О'Каллаган, Дж.; Стіл, Л.; та ін. Гіпотеза множинних влучень для захворювання, пов’язаного з війною в Перській затоці: самооцінка впливу хімічної/біологічної зброї та легка черепно-мозкова травма. Brain Sci. 2018, 8, 198. [CrossRef]
31. Янулевич П.А.; Сет, РК; Карлсон, Дж. М.; Аджама, Дж.; Квінн, Е.; Херен, Т.; Клімас, Н.; Ласлі, С.М.; Хорнер, Р.Д.; Салліван, К.; та ін. Мікробіом кишечника ветеранів війни в Перській затоці: попередній звіт. Міжн. J. Environ. рез. Public Health 2019, 16, 751. [CrossRef]
32. Конбой, Л.; Сент-Джон, М.; Schnyer, R. Ефективність акупунктури в лікуванні хвороби війни в Перській затоці. Сучасна клініка. Випробування 2012, 33, 557–562. [CrossRef]
33. Конбой, Л.; Герке, Т.; Хсу, Кентукки; Сент-Джон, М.; Гольдштейн, М.; Schnyer, R. Ефективність індивідуалізованих протоколів акупунктури в лікуванні хвороби війни в Перській затоці: прагматичне рандомізоване клінічне дослідження. PLoS ONE 2016, 11, e0149161. [CrossRef]
34. Абу-Донія, MB; Абу-Донія, М.М.; Елмасрі, Е.М.; Монро, Дж.А.; Малдер, МЗС. Аутоантитіла до специфічних для нервової системи білків підвищені в сироватці крові членів льотного екіпажу: біомаркери пошкодження нервової системи. J. Toxicol. Навколишнє середовище. Health A 2013, 76, 363–380. [CrossRef] [PubMed]
35. Абу-Донія, MB; Суліман, HB; Сініскалко, Д.; Антонуччі, Н.; ElKafrawy, P. De novo Blood Biomarkers in Autism: Autoantibodies against Neuronal and Glial Proteins. поведінка. Sci. 2019, 9, 47. [CrossRef] [PubMed]
36. Йі, М.К.; Сейчепін, DR; Янулевич П.А.; Салліван, К.А.; Проктор, С.П.; Кренгель, М. Х. Черепно-мозкова травма, стан здоров’я та частота хронічної багатосимптомної хвороби у ветеранів 1990-1991 війни в Перській затоці. J. Реабілітація після травми голови. 2016, 31, 320–328. [CrossRef]
37. Йі, М.К.; Янулевич П.А.; Сейчепін, DR; Салліван, К.А.; Проктор, С.П.; Krengel, MH Множинні легкі черепно-мозкові травми пов’язані з підвищеною частотою симптомів здоров’я та хворобами війни в Перській затоці у когорти 1990-1991 ветеранів війни в Перській затоці. Brain Sci. 2017, 7, 79. [CrossRef]
38. Карні, CP; Семпсон, Т.Р.; Фолькер, М.; Вулсон, Р.; Торн, П.; Doebbeling, BN Жінки у війні в Перській затоці: Бойовий досвід, експозиції та наступне медичне обслуговування нас. Mil. Мед. 2003, 168, 654–661. [CrossRef]
39. Капурал, М.; Кризанак-Бенгез, Л.; Барнетт, Г.; Перл, Дж.; Масарик, Т.; Аполлон, д.; Расмуссен, П.; Майберг, М.Р.; Janigro, D. Сироватка S-100beta як можливий маркер порушення гематоенцефалічного бар’єру. Brain Res. 2002, 940, 102–104. [CrossRef]
40. Сіракузи, Р.; Фуско, Р.; Куззокреа, С. Астроцити: роль і функції в патологіях мозку. Фронт. фарм. 2019, 10, 1114. [CrossRef]
41. O'Callaghan, JP; Дженсен К. Ф.; Міллер, Д. Б. Кількісні аспекти астрогліозу, спричиненого лікарськими засобами та токсикантами. Нейрохім. Міжн. 1995, 26, 115–124. [CrossRef]
42. Інж Л.Ф.; Гірнікар, Р. С. ГФАП і астрогліоз. Патол головного мозку. 1994, 4, 229–237. [CrossRef]
43. Аурелл, А.; Rosengren, LE; Карлссон, Б.; Олссон, JE; Зборнікова В.; Haglid, KG Визначення концентрації S-100 і гліальних фібрилярних кислих білків у спинномозковій рідині після інфаркту мозку. Інсульт 1991, 22, 1254–1258. [CrossRef] [PubMed]
44. Браун, MC; Сімс, К. Дж.; Гіффорд, Е. Дж.; Гольдштейн К.М.; Джонсон, MR; Вільямс, CD; Provenzale, D. Гендерні відмінності серед ветеранів війни в Перській затоці 1990–1991 років: демографія, спосіб життя та стан здоров’я. Проблеми жіночого здоров'я 2019, 29 (Додаток 1), S47–S55. [CrossRef] [PubMed]
45. Креддок, Т.Дж.; Фріч, П.; Райс, М. А., молодший; дель Росаріо, РМ; Міллер, Д.Б.; Флетчер, Массачусетс; Клімас Н.Г.; Бродерік, Г. Роль гомеостатичного приводу в увічненні складних хронічних захворювань: хвороба війни в Перській затоці та синдром хронічної втоми. PLoS ONE 2014, 9, e84839. [CrossRef]
46. Смайлі, А.Л.; Бродерік, Г.; Фернандес, Х.; Раздан, С.; Барнс, З.; Кольядо, Ф.; Соль, К.; Флетчер, Массачусетс; Клімас, Н. Порівняння статево-специфічних імунних сигнатур при хворобі війни в Перській затоці та синдромі хронічної втоми. BMC Immunol. 2013, 14, 1–14. [CrossRef] [PubMed]
47. Лобо, П.І. Роль природних аутоантитіл IgM (IgM-NAA) і антитіл IgM до лейкоцитів (IgM-ALA) у регулюванні запалення. Curr. Топ. мікробіол. Immunol. 2017, 408, 89–117.
48. Салліван, К.; Кренгель, М.; Бредфорд, В.; Стоун, К.; Томпсон, ТА; Херен, Т.; Уайт, Р. Ф. Нейропсихологічне функціонування військових аплікаторів пестицидів часів війни в Перській затоці: вплив на швидкість обробки інформації, увагу та зорову пам’ять. Нейротоксикол. Тератол. 2018, 65, 1–13. [CrossRef]
49. Чао, Л.Л.; Ротлінд, JC; Карденас, Вірджинія; Меєрхофф, ді-джей; Weiner, MW Вплив низького рівня впливу зарину та циклозарину під час війни в Перській затоці 1991 року на функцію мозку та структуру мозку ветеранів США. Нейротоксикологія 2010, 31, 493–501. [CrossRef]
50. Чао, Л.Л.; Абаджян, Л.; Hlavin, J.; Меєрхофф, ді-джей; Weiner, MW Вплив низького рівня зарину та циклозарину та хвороби Перської затоки на структуру та функції мозку: дослідження на 4T. Нейротоксикологія 2011, 32, 814–822. [CrossRef]
51. Golomb, BA Інгібітори ацетилхолінестерази та хвороби війни в Перській затоці. Proc. Natl. акад. Sci. США 2008, 105, 4295–4300. [CrossRef]
52. Міхалович, Л.Т.; Келлі, К.А.; Салліван, К.; O'Callaghan, JP Вплив інгібіторів ацетилхолінестерази як ініціюючий фактор у розвитку хвороби війни в Перській затоці, хронічного нейроімунного розладу у розгорнутих ветеранів. Нейрофармакологія 2020, 171, 108073. [CrossRef]
53. О'Каллаган, Дж. П.; Келлі, К.А.; Локер, АР; Міллер, Д.Б.; Ласлі, С. М. Кортикостерон стимулює нейрозапальну реакцію на DFP у мишей: потенційна тваринна модель хвороби війни в Перській затоці. J. Neurochem. 2015, 133, 708–721. [CrossRef] [PubMed]
54. Winkenwerder, W. Звіт про вплив на навколишнє середовище: остаточний звіт про пестициди Міністерство оборони США, офіс спеціального помічника заступника міністра оборони (персонал і готовність) від хвороб війни в Перській затоці, медичної готовності та військового розгортання; Урядова друкарня США: Вашингтон, округ Колумбія, США, 2003.
55. Вишня, Н.; Крід, Ф.; Сільман, А.; Данн, Г.; Бакстер, Д.; Смедлі, Дж.; Тейлор, С.; Macfarlane, GJ Здоров'я та вплив ветеранів війни в Перській затоці Сполученого Королівства. Частина II: Зв'язок здоров'я з впливом. займати. Навколишнє середовище. Мед. 2001, 58, 299–306. [CrossRef] [PubMed]
56. Хейлі, RW; Курт, Т. Л. Самостійний вплив нейротоксичних хімічних комбінацій під час війни в Перській затоці. Перехресне епідеміологічне дослідження. JAMA 1997, 277, 231–237. [CrossRef] [PubMed]
57. Нізенбаум Р.; Барретт, Д.Х.; Рейес, М.; Рівз, WC. Стресори розгортання та хронічна багатосимптомна хвороба серед ветеранів війни в Перській затоці. Я. Нерв. Мент. дис. 2000, 188, 259–266. [CrossRef]
58. Салліван, К.; Кренгель, М.; Проктор, С.П.; Дівайн, С.; Херен, Т.; Вайт, РФ Когнітивне функціонування у ветеранів війни в Перській затоці, які шукають лікування: використання піридостигміну броміду та посттравматичний стресовий розлад. Ж. Психопатолог. поведінка. Оцінити. 2003, 25, 95–103. [CrossRef] 59. Patton, SE; О'Каллаган, Дж.П.; Міллер, Д.Б.; Abou-Donia, MB Вплив перорального введення три-о-крезилфосфату на in vitro фосфорилювання мембранних і цитозольних білків з головного мозку курки. J. Neurochem. 1983, 41, 897–901. [CrossRef]
60. Лападула, Е.С.; Лападула Д.М.; Abou-Donia, MB Біохімічні зміни в сідничному нерві курей, які отримували три-о-крезилфосфат: посилення фосфорилювання цитоскелетних білків. Нейрохім. Міжн. 1992, 20, 247–255. [CrossRef]
61. Абу-Донія, М. Б. Участь цитоскелетних білків у механізмах уповільненої нейротоксичності, індукованої фосфорорганічним ефіром. Clin. Exp. фарм. фізіол. 1995, 22, 358–359. [CrossRef]
62. Торрес-Альторо, Мічиган; Матур, Б.Н.; Дреруп, Дж.М.; Томас, Р.; Ловінгер, Д.М.; О'Каллаган, Дж.П.; Bibb, JA Органофосфати порушують регуляцію сигналізації дофаміну, глутаматергічну нейротрансмісію та індукують маркери пошкодження нейронів у смугастому тілі. J. Neurochem. 2011, 119, 303–313. [CrossRef]
63. Ренеман, Л.; Шаген, С.Б.; Малдер, М.; Муцаертс, Х.Дж.; Хагеман, Г.; de Ruiter, MB. Когнітивні порушення та пов'язана з ними втрата білої мікроструктури головного мозку в членів екіпажу, які зазнали впливу парів моторного масла. Поведінка зображення мозку. 2016, 10, 437–444. [CrossRef]
64. Петрас, Дж. М. Соман нейротоксичність. Фундамент. апл. Токсикол. 1981, 1, 242. [CrossRef]
65. Абдель-Рахман, А.А.; Шетті, А. К.; Abou-Donia, MB Гострий вплив зарину підвищує проникність гематоенцефалічного бар'єру та індукує нейропатологічні зміни в мозку щура: залежність доза-реакція. Neuroscience 2002, 113, 721–741. [CrossRef]
66. Белград, Дж.; Де Пейс, Р.; Філдс, Р. Д. Аутофагія в мієлінізації глії. J. Neurosci. 2020, 40, 256–266. [CrossRef] [PubMed]
67. Нотон, SX; Бек, В.Д.; Вей, З.; Ку, Г.; Terry, AV, Jr. Багатофункціональні сполуки хлорид літію та метиленовий синій послаблюють негативний вплив диізопропілфторфосфату на транспорт аксонів у кортикальних нейронах щурів. Токсикологія 2020, 431, 152379. [CrossRef]
68. Нотон, SX; Terry, AV, Jr. Нейротоксичність при гострій і повторній експозиції фосфорорганічних кислот. Токсикологія 2018, 408, 101–112. [CrossRef]
69. Нотон, SX; Ернандес, CM; Бек, В.Д.; Поддар І.; Янасак, Н.; Лін, П.-К.; Terry, AV, Jr. Повторне вплив диізопропілфторфосфату призводить до структурних порушень мієлінових аксонів і стійких порушень аксонального транспорту в мозку щурів. Токсикологія 2018, 406, 92–103. [CrossRef]
70. Гао, Дж.; Нотон, SX; Бек, В.Д.; Ернандес, CM; Ву, Г.; Вей, З.; Ян, X.; Бартлетт, М.Г.; Террі, А. В., молодший. Хлорпірифос і хлорпірифос оксон погіршують транспорт пов'язаних з мембраною органел в аксонах кори головного мозку щурів. Нейротоксикологія 2017, 62, 111–123. [CrossRef]
71 Цян Л.; Рао, А. Н.; Мостославський Г.; Джеймс, М.Ф.; Комфорт, Н.; Салліван, К.; Baas, PW Перепрограмування клітин ветеранів війни в Перській затоці в нейрони для вивчення хвороби війни в Перській затоці. Неврологія 2017, 88, 1968–1975. [CrossRef]
72. Ернандес, CM; Бек, В.Д.; Нотон, SX; Поддар І.; Адам, Б.-Л.; Янасак, Н.; Міддлтон, К.; Terry, AV, Jr. Повторний вплив хлорпірифосу призводить до тривалого порушення аксонального транспорту в мозку живого гризуна. Нейротоксикологія 2015, 47, 17–26. [CrossRef]
73. Рао, А. Н.; Патил, А.; Броднік З.Д.; Цян, Л.; Іспанія, РА; Салліван, К.А.; Чорний, М.М.; Баас, П. В. Фармакологічне збільшення ацетилювання мікротрубочок коригує вплив органофосфатів на нейрони, що посилюється стресом. Трафік 2017, 18, 433–441. [CrossRef]
74. Terry, AV, Jr. Функціональні наслідки повторного впливу фосфорорганічних кислот: потенційні нехолінергічні механізми. Pharmacol. Тер. 2012, 134, 355–365. [CrossRef] [PubMed]
75. Джоші, У.; Пірсон, А.; Еванс, JE; Ланглуа, Х.; Saltiel, N.; Оджо, Дж.; Клімас, Н.; Салліван, К.; Кіган, А.П.; Оберлін, С.; та ін. Метаболіт перметрину пов'язаний з адаптивними імунними реакціями при хворобі війни в Перській затоці. Поведінка мозку. Імунна. 2019, 81, 545–559. [CrossRef] [PubMed]
76. Войдані, А.; Thrasher, JD. Аномалії клітинного та гуморального імунітету у ветеранів війни в Перській затоці. Навколишнє середовище. Перспектива здоров'я. 2004, 112, 840–846. [CrossRef] [PubMed]
77. Сковера, А.; Стюарт, Е.; Девіс, ET; Клір, AJ; Анвін, К.; Халл, Л.; Ісмаїл, К.; Хоссейн, Г.; Wessely, SC; Пікман, М. Антинуклеарні аутоантитіла (ANA) у пацієнтів із захворюваннями, пов’язаними з війною в Перській затоці, і синдромом хронічної втоми (CFS). Clin. Exp. Immunol. 2002, 129, 354–358. [CrossRef] [PubMed]
78. Хокама, Ю.; Empey-Campora, C.; Хара, К.; Хіга, Н.; Сіу, Н.; Лау, Р.; Курібаяші, Т.; Ябусакі, К. Фосфоліпіди гострої фази, пов’язані з кардіоліпіном мітохондрій у сироватці пацієнтів із синдромом хронічної втоми (CFS), хронічним отруєнням рибою Ciguatera (CCFP) та іншими захворюваннями, пов’язаними з хімікатами, війною в Перській затоці та морськими токсинами. Дж. Клін. Лабораторія. анальний 2008, 22, 99–105.
