Зв’язок між сироватковими Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 та нирковим інтерстиціальним фіброзом у щурів із хронічною хворобою нирок

Анотація:

Мета: дослідити взаємозв’язок між індукованим аденіном Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 і нирковоюінтерстиціальний фіброз у щурів з хронічною хворобою нирок. Методи Двадцять щурів-самців класу SPF випадковим чином розділили на контрольну групу (n=10) і модельну групу (група ХХН, n=10), і модельній групі вводили аденін через зонд, а контрольній групі — давали рівний об’єм фізіологічного розчину через зонд, і щурів страчували на 3-му та 6-му тижнях, відповідно, і залишали кров для визначення азоту сечовини, креатиніну та Bcl-3, Gal-3 та ниркової патологічні зміни спостерігали за фарбуванням HE, тяжкість інтерстиціального фіброзу за фарбуванням за Массоном і експресію білка -SMA в тканинах нирок за допомогою імуногістохімічного фарбування. Порівняно з контрольною групою рівні сечовини кровіазот,креатинін, Bcl{{0}}, Gal-3 і TGF- 1 були значно вищими в групі ХХН у всі моменти часу (P＜0.0 5). Відносна площа інтерстиціальних колагенових волокон у групі ХХН була значно вищою, ніж у контрольній групі (P < 0.05). Кореляційний аналіз показав позитивну кореляцію між рівнями Bcl-3, Gal-3, TGF- 1 крові та відносною площею ниркового інтерстиціального фіброзу (rs=0.776, P < 0,001 ; rs=0.58, P < 0,001; rs=0.52, P=0.001).

Висновок Рівні Bcl-3, Gal-3 і TGF- 1 у сироватці крові були значно підвищені у щурів із моделлю ХХН, спричиненою аденіном, і тісно корелювали з тяжкістюфіброз нирок, який, як очікується, стане новим біомаркером для оцінкифіброз нирок.

Ключові слова:хронічні захворювання нирок; інтерстиціальний фіброз; Bcl-3; Гал-3; TGF- 1

Натисніть тут, щоб отримати більше інформації про лікування CistancheХронічна хвороба нирок

Хронічна хвороба нирок(ХХН) є глобальною суспільною проблемою, поширеність якої зростає з кожним роком [1].Хронічна хвороба нирок(ХХН) є глобальною суспільною проблемою, і її поширеність зростає з року в рік [1]. Навпаки, фібриляція нирок є основною патологією прогресування ХХН до термінальної стадії. ХХН є основною патологічною зміною та загальним шляхом для прогресування всіх видів ХХН до кінцевої стадії. Тяжкість фіброзу нирок тісно пов'язана з вибором лікування та прогнозом пацієнтів. Тому дуже важливо точно оцінити ступінь фіброзу нирок [2]. Тому важливе значення має точна оцінка ступеня фіброзу нирок [2]. Біопсія нирки є золотим стандартом для діагностики фіброзу нирок і дозволяє точно та візуально зрозуміти патологічні зміни в нирці та визначити ступінь фіброзу нирки. Однак він інвазивний і має деякі обмеження у застосуванні. B УЗД, КТ, МРТ та інші неінвазивні методи можна певною мірою використовувати для визначення фіброзу нирок. Однак ці тести можуть лише опосередковано відображати нирковий фіброз через анатомічні зміни в нирці. Однак ці тести можуть лише опосередковано відображати нирковий фіброз через анатомічні зміни в нирці, і важко виявити та судити про його тяжкість на ранній стадії [3]. Однак ці тести можуть лише опосередковано відображати нирковий фіброз через анатомічні зміни в нирці, що ускладнює раннє виявлення та визначення його тяжкості [3]. Навпаки, біомаркери можуть оцінювати або кількісно вимірювати як біологічні, так і патологічні процеси захворювання. біомаркери можуть оцінити або кількісно визначити біологічні та патологічні процеси захворювання, а також служать терапевтичними мішенями для захворювання [4]. Біомаркери можуть оцінити або кількісно визначити біологічні та патологічні процеси захворювання, а також слугувати терапевтичними мішенями для захворювання [4]. Було ідентифіковано кілька біомаркерів для діагностики фіброзу нирок. Однак загальновизнаного маркера для визначення фіброзу нирок не існує. Тому важливо досліджувати та перевіряти цінні біомаркери.

Bcelllymphoma3 (Bcl-3), Bcl-3 у щурів і Bcl-3 у щурів визначено як найважливіші біомаркери для діагностики фіброзу нирок. Bcl-3 (Bcl-3) і галектин-3 (Gal-3) є багатообіцяючими потенційними нирковими маркерами в останні роки. років, але їх цінність Однак її цінність потребує подальшого дослідження. У цьому дослідженні ми мали на меті створити модель ХХН щурів, індуковану аденіном, і дослідити значення галектину 3. У цьому дослідженні ми створили модель ХХН щурів, індуковану аденіном, і виміряли сироватковий Bcl-3, Gal -3, трансгенний фактор 1 та інші біомаркери у щурів. Метою цього дослідження було створити модель ХХН у щурів, індуковану аденіном, і виміряти сироваткові рівні Bcl-3, Gal-3, трансформуючого фактора росту- 1 (TGF{{16) }}) і TGF- 1.

(TGF- 1) та проаналізувати їх зв’язок із інтерстиціальним фіброзом нирок, щоб з’ясувати, чи можуть вони бути основою для визначення фіброзу нирок. Рівні TGF- 1, Gal-3 і TGF- 1 були проаналізовані, щоб визначити, чи можуть вони бути новими біомаркерами фіброзу нирок.

1 Матеріали та методи

1.1 Піддослідні тварини

Двадцять самців щурів SD класу SPF, маси тіла (200±10) г, віком 8 тижнів були придбані в Центрі експериментальних тварин Південно-Західного медичного університету [SCXK (Chuan) 2018-17]. Щурів помістили та зібрали в кімнаті для тварин Дослідницького центру інтегративної медицини Афілійованої лікарні традиційної китайської медицини Південно-Західного медичного університету [SYXK (Chuan) 2018-065]. Експеримент дотримувався принципу гуманного догляду «3R». Комітет з етики експериментальних тварин Південно-Західного медичного університету схвалив дослідження (swmu20220018).

1.2 Основні прилади та реактиви

Аденін (Sigma, США); Набір Gal-3 ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Китай), набір щурів TGF- 1 ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co.

Ltd., Китай), набір щурів Bcl-3 ELISA (Jiangsu Enzyme Free Industry Co., Ltd., Китай); Розчин для фарбування по Массону (Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd., Китай); -SMA антитіла (Wuhan PhD Bioengineering Co., Ltd., Китай); високошвидкісна морозильна центрифуга (Eppendorf Co. Ltd.

Ltd., Німеччина); автоматичний біохімічний аналізатор (Siemens, Німеччина); парафіновий мікроскоп (Thermo, США); світловий мікроскоп (Nikon, Японія); прилад для стандартизації ферментів (Rayto, RT-6100).

1.3 Експериментальні методи

1.3.1 Експериментальне групування та підготовка моделі Двадцять самців щурів SD класу SPF були випадковим чином розділені на контрольну (n=10) і модельну групи (CKD, n=10) після 1 тижня адаптивного годування. Аденін розчиняють у дистильованій воді, щоб отримати 2,5-відсоткову суспензію. 250 мг/(кг-день) суспензії аденіну давали групі ХХН через зонд регулярно з 1-го по 4-й тиждень, а 125 мг/(кг-день) суспензії аденіну давали контрольній групі з 5-го по 6 тиждень; той самий об’єм фізіологічного розчину давався контрольній групі через зонд, і обидві групи отримували звичайну їжу. Усіх щурів годували та поїли вільно, половину світлого часу та половину темряви, а кімнатна температура становила 18 градусів -25 градусів.

1.3.2 Збір зразків

Щурів забивали в кінці 3-го і 6-го тижня відповідно, і кров відбирали з черевної аорти; ниркові тканини фіксували в 10-відсотковому розчині нейтрального формаліну і робили парафінові зрізи, а іншу частину ниркових тканин заморожували і зберігали при 80 градусах. Іншу частину ниркових тканин заморожували і зберігали при 80 градусах у холодильнику.

1.3.3 Показники азоту сечовини крові, креатиніну, Bcl-3, Gal-3 і TGF- 1

Функцію нирок щурів вимірювали повністю автоматичним біохімічним аналізатором. Для визначення Bcl-3, Gal-3 і TGF- 1 сироватки використовували імуноферментний аналіз ELISA. Кількість Bcl-3, Gal-3 і TGF- 1 визначали методом ELISA. Усі набори були придбані у Jiangsu Enzyme Free Industrial Co. Усі набори були придбані у Jiangsu Enzyme Free Industrial Co.

1.3.4 Фарбування ниркової тканини HE. Фіксовані ниркові тканини були зневоднені, вкладені, розділені та депарафіновані.

Фіксовані ниркові тканини були зневоднені, закладені, розділені та депарафінізовані до води

Таблиця 1. Порівняння функції нирок між двома групами щурів (&x±s)

2.2 Порівняння сироваткових рівнів Bcl-3, Gal-3 і TGF- 1 між двома групами Порівняно з контрольною групою Bcl-3, Gal-3 крові і рівні TGF- 1 у групі ХХН були вищими, ніж у контрольній групі. Порівняно з контрольною групою рівні Bcl-3, Gal-3 і TGF{{10}} крові були значно вищими в групі ХХН у всі моменти часу (P < {{14 }}.05). Рівні TGF- 1 були значно вищими в групі ХХН (P <0,05); у групі ХХН рівні рівнів Bcl-3 3 були значно вищими через 6 тижнів порівняно з 3 тижнями в групі ХХН (P <0,05). Дивіться малюнок 1

2.3 Фарбування HE тканини нирок у двох групах Не було очевидних патологічних змін у тканинах нирок контрольної групи в кожній точці часу, тоді як тканини нирок групи ХХН спостерігалися в кожній точці часу. Не було очевидних патологічних змін у тканинах нирок контрольної групи в кожну точку часу, тоді як у групі ХХН ниркові епітеліальні клітини нирок у групі ХХН показали дегенеративний некроз, дилатацію, проліферацію інтерстиціальної фіброзної тканини та інфільтрацію клітин запалення. Зміни були більш очевидними на тижні 6, ніж на тижні 3, див. Малюнок 2

2.4 Фарбування за Массоном ниркових тканин і показники фібриляції інтерстицію у двох групах щурів Інтерстицій щурів контрольної групи наприкінці 3-го та 6-го тижня Не спостерігалося явного відкладення колагенових волокон в інтерстиції щурів контрольної групи наприкінці 3-й і 6-й тиждень. Збільшення відкладення колагенових волокон в інтерстиції щурів із ХХН наприкінці 6-го тижня порівняно з кінцем 3-го тижня (відносна площа інтерстиціальних колагенових волокон у групі із ХХН також була значно вищою, ніж у контрольній групі). . Відносна площа інтерстиціальних колагенових волокон у групі ХХН також була значно вищою, ніж у контрольній групі, і була вищою наприкінці тижня 6, ніж наприкінці тижня 3 (P < {{10} }.05). (P <0,05). Дивіться малюнок 3.

Рисунок 3 Результати фарбування за Массоном і відносна оцінка площі колагенових волокон у нирковому інтерстиції