Дослідження впливу цистанхе на вільні радикали

Для отримання додаткової інформації:Ali.ma@wecistanche.com

Другий хмарний ліс An Old Zhang Hongjing

В даний час вважається, що зниження імунної функції машини пов'язане зі старінням. На підставі дослідження, щоЦистанхеможе посилити гуморальні та клітинні імунні функції мишей і боротися з моделлю старіння, спричиненою d-галактозою, ми додатково вивчили вплив препарату на мишей. Вдихання озону<. 3)="" induces="" strong="" antagonistic="" effects="" of="" aging="" and="" aging="" caused="" by="" strong="">вільні радикалив організмі. Швидкість експресії хемілюмінесценції мишей у групі препарату зросла, SOD Підвищена життєздатність «Зменшився вміст пероксидів ліпідів у плазмі, тканинах коліна та стегна та життєздатність MAOB коридорних тканин; спостерігався зв’язок доза-ефект між різними групами доз. Ефект старіння мишей проти підгострого старіння узгоджується з дослідженнямЦистанхепосилення імунної функції у мишей.Цистанхеможе посилити імунну функцію, покращити антистресову здатність організму, і це доцільно отримати або опосередковано усунути пошкодженнявільні радикалидо тіла. , Пригнічує життєдіяльність 1WMAO-B. Щоб досягти ефекту уповільнення старіння. Цей експеримент забезпечує експериментальну основу для застосуванняЦистанхедля боротьби зі старінням і лікування деяких старечих захворювань.

Click to cistanche переваги та побічні ефекти для вільних радикалів

1 Матеріал і методи

1.1 Матеріал

1.1.1 Препарат і реактиви:Цистанхеdeserticola YC Ma відварювали у воді 3 рази, відвари об’єднували, концентрували до відповідного об’єму та додавали певну кількість етанолу. Після відстоювання протягом 24 годин фільтрують. Фільтрат упарюють до відсутності спирту. Перед використанням приготуйте воду з парою 0.25% ~0.5% концентрації. мл містить неочищені препарати близько lg). Luminol (luminol), ®National E Merck company products Huang Howling Oxidation 88 (HO), Hypochromatic Howling (HX), стандартний тетраетоксипропан, усі є продуктом компанії Sigma The, сіль, бензалконій, Changzhou Guangming Biochemical Research Institute; циклогексан, продукт Шанхайського реагенту № 1; Тіобарбітурова кислота, продукт від Shanghai Reagent No. 2, LuzhanСупероксидДисмутаза, Китайська академія наук Шанхаю Продукти Інституту біохімічних продуктів.

Цистанхе

1.1. 2 Інструмент Beckman LS-98OO33 тільки рідинний сцинтиляційний підрахунок, Shimadzu RF-540 флуоресцентний спектрофотометр, 752 ультрафіолетові гратки спектрофотометр-G1-20Високошвидкісна центрифуга з охолодженням, CPS-1A ультразвуковий пульверизатор.

1.1.3 Тварини ICR миші, 2 місяці, вагою 20±2 г, надані Jiangsu Experimental Animal Center.

1.2 метод

Мишей поділяли на контрольну (не потрапляють у середовище Q), модельну та лікарську групу, у кожній по 10 мишей, які швидко харчувалися водою без обмежень. Групу ліків було поділено на дві групи доз, Том 2, Випуск 7, 1994, Китайський журнал китайської Materia MedicaЦистанхеекстракт 100 та 200 мг/кг (еквівалент необроблених препаратів 20 та 4 мкг/кг) згодовували відповідно. Контрольній групі та групі моделі щодня давали однакову кількість фізіологічного розчину. Адміністративна група та модельна група отримали O, середовище (0,9 X 10-^Oaft градуса), безперервний 2. День. Перевірку кожного натягу пальця проводили на 21-й день експерименту.

1. 2.1 Тест на витривалість Помістіть мишей у кожній із зазначених вище груп у воду на глибину 40 см і 12 ± л. У контейнері Water®L почніть відраховувати час, доки він не опуститься на дно й не зрушиться з місця, що є часом плавання для мишей.

   
   

1.2.2 Тест на термостійкість Миша спочатку налаштована на 15. Поплавайте у воді 2 хвилини, а потім помістіть у морозильну камеру 15P, щоб спостерігати за часом повного замерзання.

1.2.3 Тест на стійкість до атмосферної гіпоксії Помістіть невеликий глютен у пляшку з широким горлом об’ємом 250 мл, наповнену натрієвим вапном, і зафіксуйте час виживання мишей у кожній групі після закупорювання.

1.2.4 Визначення моноаміноксидази головного мозку типу В (MACXB) Відповідно до літературного перорального методу, візьміть весь мозок миші, додайте відповідну кількість попередньо охолодженого 0.2 моль/л фосфатного буфера (PH7,4 ), гомогенізувати та ультразвук (24 кС). Подрібнити 3 рази, загалом два рази, з інтервалом 30sr1000об/хв, 0C протягом 30 хв, взяти супернатант при 17000 об/хв, 4°С протягом 30 хв, відкиньте супернатант, візьміть осад і використовуйте відповідну кількість. .2mo(/L PH7.4) Кислоту забуферюють і ресуспендують, щоб отримати неочищений розчин для бродіння. Візьміть необхідну кількість неочищеного ферментаційного розчину, додайте 16 ммоль/л бензамідину в 0,3 мл, використовуйте вищевказаний фосфатний буфер, щоб додати 3 мл, і використовуйте бочку з фосфорною кислотою, 3 мл буферного розчину використовуйте як порожню пробірку. Усі пробірки поміщають при 37°С. Збовтують на водяній бані протягом 3 годин, виймають, додають 6% пероксикислоти, щоб припинити реакцію, потім додають 3М [циклогексан, збовтують для перемішування, центрифугують при 1000 об/хв протягом 1 Омін, і візьміть його. Поглинання прозорого розчину вимірюється при 242 нм, і порожню пробірку слід тримати в теплі перед додаванням китайського аміну. Каламутність білка визначають фоліно-фенольним методом, стандартним білком є ​​телячий сироватковий альбумін. Одна одиниця активності ферменту та одна одиниця активності ферменту визначаються як 37P, що виробляє кількість ферменту зі зміною поглинання 0,01/3 год.'

1. 2. 5 Сироваткасупероксиддисмутаза(SOD) визначення активності (5 мкл, мишача сироватка 10M, додана до люмінесцентної суміші (змішана з 0, 1 ммоль/л люмінолу та 0,1 ммоль/л гіпоксантину) У 980", зберігати в інкубаторі при 37°C протягом 20 хвилин. Після виймання додайте оксидазу Huang Guanyin, щоб почати реакцію. У рідкому спалаховому середовищі Beckman LS~98OO число люмінесценцій в кінці 1 хвилини розраховується на основі ступеня виявлення одного фотона. Com використовується як одиниця. Швидкість інгібування люмінесценції розраховується з нижчою групою сироватки як порожньою. Крім того, стандартсупероксиддисмутаціяконцентрація (абсциса) і швидкість інгібування люмінесценції (координата) використовуються як стандартне визначення вмісту білка, як і раніше. 1. 2.6 Визначення пероксиду ліпідів (LPO) у плазмі, мозку та печінці ④ Візьміть 50 банок плазми миші, гомогенізуйте печінку та мозок (використовуйте 0.2моль/л фосфатного буфера pH7,4 , в гомогенізаторі Зроблено в 10 відсотковій концентрації) кожні 50 предків, додають л/24моль/л сірчаної кислоти 4 мл, 1 відсоток фосфорної кислоти 0,5 мл, змішують і поміщають на 5 хвилин, центрифугують при 1000 об/мм протягом 10 хвилин, і аспірували супернатант. Додайте до осаду 2 мл л/24 моль/л сірчаної кислоти та 0,3 мл 10% фосфату кальцію, добре перемішайте, центрифугуйте при 1000 об/хв, додайте до осаду 1 мл стійкої трусливої ​​води, добре перемішайте до утворення суспензії, додайте Реагент розбитої барбіталової кислоти 1 мл, при 95. Після охолодження протягом 14 °С на масляній бані додайте 5 мл н-бутанолу, добре перемішайте *100Or/хв, центрифугування 10 мтн, візьміть фазу н-бутанолу та виміряйте інтенсивність флуоресценції на RF{{ 33}}Спектрофотометр OS (довжина хвилі збудження 515 мн, довжина випромінювання 553 нм), Крім того, використовуйте стандартний тетраетоксипропан і відносну інтенсивність флуоресценції як стандартну криву.

   
   

2. 

2 результати

2.1 Вплив на тест на витривалість мишей, уражених вільними радикалами

Час плавання мишей у модельній групі був значно коротшим, ніж у контрольній групі, тоді як час плавання в групі введення тривав довше, а в групі з високою дозою був подібний до контрольної групи (табл. 1).

Таблиця 1: ВпливЦистанхена тесті на витривалість у плаванні моделі миші з травмою вільної могили

2.2 Вплив на здатність зберігати тепло

Миші в модельній групі швидко заморожуються при низьких температурах, і час менший, ніж у контрольній групі, тоді як час заморожування у групах із двома дозамиЦистанхене тільки довший за модельну групу, але й довший за контрольну групу, вказуючи на цеЦистанхене тільки має ефект проти вільних радикалів, але також має очевидний ефект. Підвищують здатність зігріватися від холоду (табл. 2).

Таблиця 2: Ефект відЦистанхена здатність Сенхана в моделі мишей вільного доброго травмування

2.3 Вплив на здатність протистояти гіпоксії при атмосферному тиску

Після введенняЦистанхе, миші вижили за нормального тиску та гіпоксії.ЦистанхеВплив на здатність вільної травми моделі миші Senhan був значно довшим, ніж у модельної групи, а також вищий, ніж у контрольної групи, що вказує на те, щоЦистанхеможе підвищити стійкість мишей до гіпоксії. Сила (Таблиця 3)

Таблиця 3:Цистанхе's мишача модель пошкодження вільними радикалами

2.4 Вплив на життєдіяльність МАО-В

Після вдихання O активність MAO-B у тканині головного мозку в модельній групі була значно вищою, ніж у аналогічній групі, а підвищення активності MAO-B у групі введення було значно пригнічено.

Таблиця 4: ВпливЦистанхена активність моноамінооксиду 1SB типу vine (MAO~B) у мишачій моделі пошкодження гробниці

2. 5 Вплив на життєздатність СОД

Швидкість інгібування хемілюмінесценції сироватки в модельній групі була значно нижчою, ніж в інших групах, а активність СОД значно знижувалася. Активність SOD групи препаратів була значно збільшена, а група високих доз була вищою, ніж у контрольній групі (див. таблицю 5 нижче).

Таблиця 5: Модель сироваткисупероксидактивність дисмутази (СОД) найгучніша2.6 Вплив на вміст перекису ліпідів (ЗЛПО)

2.6 Вміст пероксиду ліпідів (LFO) у плазмі, печінці та тканині головного мозку в модельній групі був значно підвищений, а вміст LPO значно зменшився після введення. Велика доза та група доз знизили ПОЛ у тканині мозку до рівня контрольної групи (табл. 6).

Таблиця 6: Вплив м’яса Axun на рівні плазми, печінки та перекису ліпідів (LPO) у мишачій моделі пошкодження вільними радикалами

3 Обговорення

Старіння - це позитивне явище в процесі життя. Традиційна медицина батьківщини накопичила багатий досвід і лікувальні джерела в роки боротьби зі старінням. В останні роки вітчизняні вчені зосередилися на пошуку ефективних засобів від старіння традиційної китайської медицини. В даний час все частіше розглядається вільнорадикальна теорія старіння організму. Хочавільні радикалигенеруються в організмі за нормальних умов, клітини тканини захищені завдяки безперервному видаленню СОД та інших ферментних систем проти кисневої токсичності. Оа — сильний окислювач. , Може почати реакцію вільних радикалів в організмі. Надмірне вдихання кисню викликає утвореннявільні радикалив організмі, що перевищує очисну здатність системи антитолерантності організму, спричиняючи пошкодження нуклеїнових кислот, білків, амінокислот, вуглеводів і ліпідних сполук, тим самим пошкоджуючи формування та функціонування клітин і призводячи до старіння ⑶. Цей експеримент показує, що після вдихання кисню7 фізична сила мишей, здатність зберігати тепло та стійкість до гіпоксії знижуються, подібно до зниження фізіологічних функцій у старих тварин. Це показує, що молоді миші можуть викликати модель старіння після отримання d-стимуляції.Цистанхесуттєво покращив зміни зазначених вище показників.

Супероксидвільні радикалиіснують в організмі недовго і в основному виводяться за допомогою СОД. Як правило, рівень або відображається вимірюванням активності СОД. Різні антиоксиданти в організмі мишей, які природно старіють, і мишей, уражених вільними радикалами, зменшуються. Активність дерну знижується, тим самим зменшуючи здатність очищативільні радикали, що призводить до збільшення вмісту перекисів ліпідів. Активність моноаміноксидази типу B (MA0-B) у мозку зростає з віком. MAOB є основним контролем старіння біологічного годинника в центральному гіпоталамусі Механізм годинника тісно пов'язаний зі старінням. ⑴. Активність MA0-B у мозку мишей у цій групі експериментальної моделі підвищується, демонструючи біохімічні зміни, що відповідають змінам у старіючих тварин.