Захисний вплив ехінакозиду на функцію нирок, ниркову тканину та пошкодження мезангіальних клітин у щурів при діабетичній нефропатії

Чи знаєте ви, що вживання Цистанчі може живити нирки, полегшити діабет і поліпшити сексуальну функцію?

ХЕ Цінь, ЛЮ Фан, ВАН Хунлі, ЛІ Цзяньпін, ДУАН Цзюнь (кафедра кадрової медицини, палата Каотанг, Народна лікарня Сичуань, Сичуаньська академія медичних наук, Ченду 610072 Сичуань, Китай)

Абстрактний:Мета Дослідити захисний вплив ехінакозиду (ECH) на дисфункцію нирок, гістопатологію та пошкодження мезангіальних клітин у щурів діабетичної нефропатії (DN) та її механізм. Методи Шістдесят СД щурів випадковим чином поділялися на контрольну групу, модельну групу, групу ECH (високі, середні та низькі дози ECH, 100, 50, 20 мг·кг- 1 ·d- 1)і лозартанову групу калію (лозартан калію, 16 мг·кг- 1 ·d- 1), по 10 щурів у кожній групі. Модельну групу, групу ECH і лосартанову групу калію годували дієтою з високим вмістом жиру і високим вмістом цукру, а також інтраперитонеально вводили стрептозотоцин (40 мг ·кг- 1) для встановлення моделей щурів DN. Через 2 тижні лікування організмбула зафіксована вага, 24-годинний водозабір та об'єм сечі щурів. Визначено вміст глюкози в крові натщесерце, креатиніну сироватки, азоту сечовини, мікропротеїну сечі, гіалуронової кислоти(ГК), інгібітора тканинної металопротеїнази- 1(ТІМП-1) та ламініну(ЛН). Фарбування HE і фарбування TUNEL проводилося для спостереження патологічних змін в тканинах нирок. ЗТ-ПЛР проводився для виявлення експресії В-клітинної лімфоми(Bcl-2), Bcl2-асоційованого білка Х(Bax), каспази- 3 мРНК. Вестерн Блот був виконаний для визначення рівнів експресії молекули адгезії судинних клітин-1(VCAM-1), трансформуючого фактора росту (TGF-β), α-актину гладкого м'язів (α-СМА). Результати У порівнянні з контрольною групою значно зменшилася маса тіла модельної групи(P< 0.05），="" water="" intake，="" urine="" volume，="" fasting="" blood="" glucose，="" urine="" microalbumin，="" urea="" nitrogen，="" creatinine，="" ha，="" timp-1="" and="" ln="" were="" significantly="">P< 0.05）.="" bax，="" caspase-="" 3="" mrna，="" and="" expression="" of="" vcam-="" 1，="" tgf-="" β,="" and="" α-="" sma="" protein="" were="" significantly="" up-regulated="">P < 0.05），="" expression="" of="" bcl-="" 2="" mrna="" was="" significantly="">P < 0.05）.="" compared="" with="" the="" model="" group，="" the="" body="" weight="" of="" rats="" was="" significantly="" increased="" in="" the="" medium-dose="">група, група високих доз ECH та група калію лозартану(P< 0.05），="" water="" intake，="" urine="" volume，="" fasting="" blood="" glucose，="" urine="" microalbumin，="" urea="" nitrogen，="" creatinine，="" ha，="" timp-="" 1="" and="" ln="" were="" significantly="">P< 0.05）.="" bax，="" caspase-="" 3="" mrna，="" expression="" of="" vcam-="" 1，="" tgf-="" β,="" and="" α-="" sma="" protein="" were="" significantly="">P< 0.05）；="" and="" expression="" of="" bcl-="" 2="" mrna="" was="" significantly="">P< 0.05）.="" he="" and="" tunel="" staining="" showed="" that="" pathological="" changes="" in="" renal="" tissue="" were="" significantly="" decreased.="" conclusion="" medium="" and="" high="" doses="" of="" ech="" can="" protect="" renal="" tissue="" damage，="" and="" improve="" renal="" function="" in="" dn="" rats="" by="" inhibiting="" protein="" expression="" of="" tgf-β="" and="" vcam-1="" and="" inhibiting="" renal="" interstitial="" fibrosis="" and="" renal="" cell="">

Ключові слова:Cistanches herba；Ехінакозид； діабетична нефропатія; нирковий інтерстиціальний фіброз; апоптоз; щури

За додатковою інформацією звертайтеся:emily.li@wecistanche.com

Cistanche deserticola має багато ефектів, натисніть тут, щоб дізнатись більше

Діабетична нефропатія (Діабетична нефропатія, ДН) - поширене діабетичне мікросудинне ускладнення, яке може не тільки викликати ураження нирок, але і вражати інші органи. Нирковий тубулоінтерстиціальний фіброз є основною патологічною ознакою в клінічних [1]. Ускладнився патогенез діабетичної нефропатії. Попередні дослідження [2-3] вважали, що захворювання в основному було викликано гіперглікемією у хворих на цукровий діабет, що викликало ниркові гемодинамічні зміни і аномальний обмін речовин. Клінічними проявами були протеїнурія і зниження швидкості клубочкової фільтрації. Чекати. В даний час у хворих на діабетичну нефропатію все ще відсутні ефективні методи клінічного лікування, а пошук нових ефективних препаратів є запорукою лікування діабетичної нефропатії.

Ехінакозид(ECH) є одним з витягівCistanche Tubulosa, що має ефект живлення нирок і зміцнення ян [4]. Сучасні фармакологічні дослідження [5] показують, що ехінакозид має антиокислювальну, протиапоптозну, протизапальну та фармакологічну дію, таку як поліпшення кровотоку та мікроциркуляції. Він також може регулювати метаболізм глюкози в організмі і покращувати толерантність до глюкози. В останні роки дослідження [6] показали, що ехінакозид може пригнічувати нирковий фіброз щурів-нефропатії, пригнічуючи сигнальний шлях трансформуючого фактора росту (TGF-β) і захищаючи тканину нирки щурів. Однак повідомлень в літературі про лікування діабетичної нефропатії ехінацеєю небагато, а її специфічний механізм захисту діабетичної нефропатії у щурів до сих пір неясний. Тому це дослідження також досліджувало вплив та можливі механізми ехінакозиду на фіброз нирок та апоптоз клітин ниркової тканини у щурів діабетичної нефропатії та мало на меті забезпечити теоретичну основу для клінічного застосуванняехінакозид.

Причини цукрового діабету і народні методи лікування

Початок діабетичної нефропатії приховано, а патогенез складний і різноманітний. Після формування вилікувати його складно. Це хронічне захворювання з великою шкодою і важливою причиною кінцевої стадії захворювання нирок [8]. Пацієнтів з діабетичною нефропатією часто лікують інгібіторами ангіотензинперетворюючого ферменту та антагоністами рецепторів ангіотензину, але клінічний ефект лікування не дуже задовільний [9]. Лосартановий калій є ангіотензином II. антагоністом рецепторів, який може бути використаний для лікування есенціальної гіпертензії. Ряд досліджень [10-11] показує, що лосартанський калій також може пригнічувати нирковий інтерстицій щурів при діабетичній нефропатії фіброз, захищати функцію нирок. Тому це дослідження вибрало лосартанський калій як позитивний контроль для порівняння захисного впливу ехінакозиду на ниркову тканину щурів зДіабетичнанефропатія.

Клінічні дослідження [12-13] показали, що змістехінакозидв капсулах Чангі Ішен становить близько 3,104 мг · кг-1. Після перетворення на основі дози введення людиною і мишею найнижча доза капсули Чангі Ішен, що застосовується при діабетичній нефропатії у щурів, становить 0,648 г·кг-1, що приблизно еквівалентно діабетичної нефропатії у щурів, становить 0,648 г·кг-1, що приблизно еквівалентноехінакозид2 мг·кг-1. У зв'язку з сучасними клінічними побоюваннями з приводу ехінакозиду при лікуванні цукрового діабету

У літературі про захворювання нирок мало повідомлень. Тому дане дослідження вибрало в 10 разів найнижчу клінічну дозу, тобто 20 мг·кг-1 ехінакозид як низьку дозу, і поступово збільшувалося, встановивши 50 мг·кг-1 ехінакозид Є середньою дозою,

100 мг·кг-1Ехінакозидє високою дозою.

Демонстрація ехінакозиду при лікуванні діабету та поліпшенні функції нирок

У цьому дослідженні низькі дозиехінакозидне має явного впливу на ниркову тканину щурів-діабетиків-нефропатії, в той час як середній і високий доз ехінакозид може значно поліпшити патологічні зміни тканин нирок і поліпшити ураження тканин нирок у щурів-діабетиків-нефропатії, припускаючи, що середні і високі дози ехінакозиду можуть захистити пошкодження тканин нирок щурів-діабетиків-нефропатіїх концентраційно-залежним способом, і очікується, що він буде використовуватися при лікуванні клінічної діабетичної нефропатії.

середні та високі дозиехінакозидможе значно збільшити масу тіла щурів при діабетичній нефропатії і знизити їх споживання води, діурез сечі, глюкозу крові натщесерце. Клінічні дослідження [14] показали, що інсулін у пацієнтів з діабетичною нефропатією знаходиться в абсолютному або відносному дефіциті, а рівень глюкози в крові підвищений. Надмірна концентрація глюкози в крові перевищить клубочкову реабсорбційну здатність. Він виводиться з сечею, в результаті чого збільшується частота сечовипускання і збільшується питна вода. Зменшення маси тіла в основному узгоджується з результатами цього дослідження, припускаючи, щоехінакозидможе збільшувати масу тіла щурів діабетичної нефропатії за рахунок зниження цукру в крові і зниження їх пиття і діурезу.

середні та високі дозиехінакозидможе значно знизити мікроальбумін сечі, креатинін і азот сечовини у щурів зДіабетичнанефропатія. Креатинін і азот сечовини в основному виводяться за допомогою клубочкової фільтрації, яка може більш точно відображати функцію нирок. При дисфункції нирок знижується швидкість клубочкової фільтрації, значно підвищиться концентрація креатиніну крові і азоту сечовини [15]. Рівень білка сечі є одним з найбільш часто використовуваних показників для відображення ступеня пошкодження клубочків, які можуть безпосередньо пошкоджувати мезангіальні клітини, а також можуть посилювати пошкодження нирок і дисфункцію нирок [16]. Дослідження Чжан Юня та ін [17] показали, що гіперглікемія у щурів з діабетичною нефропатією може викликати зниження швидкості клубочкової фільтрації, що призводить до підвищення рівня креатиніну в крові, азоту сечовини та мікроальбуміну в сечі. Результати цього дослідження свідчать про те, що ехінакозид може знижувати рівень цукру в крові, покращувати функцію нирок, знижувати рівень креатиніну крові, азоту сечовини та мікроальбуміну сечі, а також покращувати пошкодження клітин ниркової тканини.

середні та високі дозиехінакозидможе значно знижувати експресію рНК Bax і Caspase-3 у щурів діабетичної нефропатії, регулюючи експресію МРНК Bcl-2, і пригнічувати апоптоз клітин ниркової тканини. Ген Bax є проапоптозним представником сімейства Bcl-2. У фізіологічних умовах Bax і Bcl-2 утворюють гетеродимер, який знижує проникність клітинних мембран і вивільнення цитохрому С. Як тільки експресія Bcl-2 буде знижено-регульована, це викличе підвищення проникності клітин, вивільнення цитохрому С, активує каскад каспази нижче за течією і індукує апоптоз клітин [18].

Каспаза-3 - це виконавча молекула апоптозу, яка може деградувати різноманітні важливі білки в клітинах і брати участь в апоптозі клітин [19]. Дослідження Dong et al. [20] показало, що ехінакозид може пригнічувати апоптоз різних клітин, що в основному узгоджується з результатами цього дослідження, припускаючи, що ехінакозид може пригнічувати апоптоз клітин ниркової тканини, тим самим захищаючи пошкодження ниркової тканини.

середні та високі дози ехінакозиду можуть значно знизити експресію білка VCAM-1 у щурів діабетичної нефропатії. ВКАМ-1 є важливою молекулою адгезії судинних клітин, яка тісно пов'язана з виникненням і розвитком діабетичної нефропатії і може бути використана для клінічної оцінки хворих на діабетичну нефропатію [21]. Дослідження Zhang et al. [22] показало, що VCAM-1 може викликати апоптоз нейронів після внутрішньомозкового крововиливу у щурів. Результати цього дослідження свідчать про те, що середні та високі дози ехінакозиду можуть пригнічувати експресію ВКМ-1 та пригнічувати апоптоз ниркових клітин у щурів з діабетичною нефропатією.

У цьому дослідженні середні та високі дозиехінакозидможе значно знизити рівень ГК, ТІМП-1 і ЛН у щурів з діабетичною нефропатією. ГК є основним компонентом позаклітинного матриксу, а ЛН - важливим структурним глікопротеїном, який є загальновживаним клінічним показником фіброзу тканин [23]. TIMP-1 є інгібітором матричних металлопротеїназ (ММП), які можуть пригнічувати експресію ММП, пригнічувати деградацію позаклітинного матриксу, сприяти фіброзу ниркової тканини [24]. Дослідження Bieniaa et al. [25] показало, що TIMP-1 може пригнічувати експресію ММП, сприяти експресії ГК і ЛН, а також сприяти виникненню і розвитку фіброзу ниркової тканини. Це в основному узгоджується з результатами цього дослідження, припускаючи, що ехінакозид може пригнічувати рівні ГК, ТІМП-1 і ЛН, пригнічувати виникнення і розвиток фіброзу нирок.

середні та високі дозиехінакозидможе значно знизити експресію білків TGF-β і α-СМА у щурів-діабетиків-нефропатії. Велика кількість досліджень [26-27] показали, що сигнальний шлях TGF-β/Smad відіграє важливу роль у виникненні та розвитку ниркового інтерстиціального фіброзу. Коли TGF-β зв'язується зі своїм рецептором в клітинній мембрані, він може фосфорилювати Smad2 і Smad3, а активований Smad утворює тример, який передається в ядро для регулювання експресії молекул ефектора нижче за течією, таких як α-СМА і матричні металопротеїнази. Індукують вироблення ниркового інтерстиціального фіброзу [28]. α-СМА є ознакою перетворення фібробластів в міофібробласти, які можуть сприяти виділенню і відкладенню позаклітинного матриксу, а також сприяти виникненню ниркового інтерстиціального фіброзу [29]. Дослідження Лі Чжун та ін [30] показали, що TGF-β/Smad відіграє важливу роль у регулюванні пошкодження ниркових тканин при діабетичній нефропатії. Результати цього дослідження свідчать про те, що ехінакозид може пригнічувати експресію TGF-β, пригнічувати експресію α-СМА та пригнічувати фіброз ниркової тканини.

Висновок

Таким чином, середні та високі дозиехінакозидможе знизити рівень цукру в крові у щурів-діабетиків нефропатії, а можеперешкоджатитаНирковаІнтерстиціальногоФіброзі нирковий інтерстиціальний фіброз вДіабетичнанефропатіящурів шляхом інгібування білкової експресії ТГФ-β і ВКМ-1. Апоптоз тканинних клітин покращує функцію нирок щурів.