Попереднє дослідження ефектів Cistanche Tubulosa проти втоми та сприяння репродуктивній функції, а також перевірка його нирково-янг-тонізуючої та сексуальної активності та механізму.
Oct 08, 2023
мета:
Дефіцит нирок-янє типом симптому застуди, спричиненого зниженням ян та енергії нирок. Клінічними проявами є біль у попереку та колінах, а такожвтрата лібідо. імпотенціятощо, що призводить до зниження чоловічої репродуктивної функції, що пов’язано зсиндром хронічної втомиічоловіча статева дисфункція в сучасній медицині. Цистанш Гербахистав одним із перших обраних ліків длятонізуючий ниркизавдяки своїйфункції зміцнення нирок янікорисна сутність і кров. Це також найбільш часто використовувана традиційна китайська медицина в стародавніх китайських рецептах для збільшення сили. Це показали сучасні фармакологічні дослідженняЦистанка трубчаста(Schenk) R. Wight (C. Tubulosa) може сприяти вивільненню споріднених гормонів в організмі, регулюючи функцію осі гіпоталамус-гіпофіз-мішень, підтримувати секреторний гомеостаз організму, покращувати імунітет і втому, а потім покращувати репродуктивна здатність хворих. Таким чином, цей експеримент починається з синдрому хронічної втоми та чоловічої сексуальної дисфункції, які тісно пов’язані з дефіцитом нирок-ян. Завдяки встановленню двох типів моделей втоми центральної та спортивної та репродуктивної травм у щурів і мишей метод поєднання спостереження за поведінкою та виявлення пов’язаних рівнів гормонів у кровообігу використовувався для скринінгу фармакодинамічної активності олігосахаридів C. tubulosa (олігоза), полісахариди C. tubulosa (глікан) і глікозиди фенілетанолу зС. трубочка(ХФГ). І далі в поєднанні з експериментами in vivo та in vitro для початкового вивчення потенційного активного механізму та терапевтичних характеристик його основних активних частин для сприяння відтворенню, щоб забезпечити експериментальну основу для розкриття C.fubulosa та подальшої розробки ліків.
НАТИСНІТЬ ТУТ, ЩОБ ОТРИМАТИ ДОБАВКИ CISTANCHE ДЛЯ СЕКСУАЛЬНОГО ПОКРАЩЕННЯ
Методи:
1. Скринінг частин C. tubulosa, що мають ефект проти втоми
Експеримент центральної втоми: мишей випадковим чином розділили на контрольні групи, групи депривації сну (SD), олігози, глікану, CPhGs. Центральна модель втоми була підготовлена з використанням депривації сну протягом 48 годин, після чого проводився лабіринт із вісьмома рукавами та експеримент із уникненням темряви, щоб перевірити здатність мишей до навчання та пам’яті, а радіоімунологічний аналіз використовувався для визначення серотоніну 5- гідрокситриптаміну ({ {3}}HT), норадреналіну (NE), адреналіну (E) у корі головного мозку та гіпоталамусі, а також рівні адренокортикотропного гормону (АКТГ), кортикотропін-рилізинг-гормону (CRH), кортизолу (CORT) у плазмі. Експеримент щодо втоми від фізичних навантажень: мишей випадковим чином розділили на контрольну, примусове плавання (FS), олігозу, глікан і CPhGs. Модель втоми від фізичних навантажень була підготовлена за допомогою примусового плавання протягом 9 днів, а потім мишей піддали експерименту виснаження при плаванні з вагою, щоб оцінити їхню витривалість, а також глікоген печінки, малоновий діальдегід (MDA), супероксиддисмутазу (SOD) у печінці. Вимірювали одночасне визначення м’язового глікогену, сукцинатдегідрогенази (СДГ), молочної кислоти (ЛД), азоту сечовини крові (BUN), лактатдегідрогенази (ЛДГ), МДА. На основі наведених вище методів перевірено дію проти втоми трьох різних екстракційних частин C. tubulosa.
2. Скринінг частин C. tubulosa, що сприяють розмноженню
Щоб полегшити збір відповідних характеристик дефіциту нирок-ян, щурів використовували як експериментальні об'єкти. Щурів випадковим чином розділили на контрольну, модель репродуктивного ушкодження (модель), групи олігози, глікану та CPhGs. Внутрішньом’язова ін’єкція гідрокортизону протягом 14 днів для підготовки щурячої моделі репродуктивного ушкодження, вимірювання затримки ерекції, показників здатності до спаровування (затримка захоплення/еякуляції, кількість захоплень/еякуляцій), вологої маси органу та вмісту фруктози в насінній плазмі. Виміряйте значення циклічного аденозинмонофосфату/циклічного гуанозинмонофосфату (цАМФ/цГМФ) у плазмі крові, рівні гонадотропін-рилізинг-гормону (GnRH), фолікулостимулюючого гормону (FSH), лютеїнізуючого гормону (LH), естрадіолу (E2) і тестостерону (T). Для спостереження за патологічними змінами яєчка використовували фарбування гематоксилін-еозином (ВЕ). На основі наведених вище методів було перевірено вплив трьох різних екстракційних частин репродуктивного пошкодження C. tubulosa.
3. Оцінка ефективності різних доз CPhGs для сприяння репродукції
З метою економії кількості препаратів і врахування повноти типів антитіл піддослідними були обрані миші. Мишей випадковим чином розділили на контрольну, модельну, мишей із позитивним тестостероном пропіонатом (TP) і низьку дозу CPhGs (CPhGs-1), середню дозу CPhGs (CPhGs-m), високу дозу CPhGs ( ЦФГс-ч) групи. Гідрокортизон вводили внутрішньошлунково протягом 14 днів, щоб підготувати мишачу модель репродуктивного ушкодження, і виявляли затримку ерекції, показники здатності до спаровування (затримку захоплення/еякуляції, кількість захоплень/еякуляцій), вологу вагу органів, сироватковий гормон ЛГ та рівні .А патологічні зміни яєчка спостерігалися при фарбуванні НЕ. На основі вищезазначених методів оцінювали ефективність CPhG на низькому, середньому та високому рівнях з точки зору морфології яєчок та репродуктивної функції миші.
4. Механізми підвищення CPhG in vivo та in vitro
Рівень T і сприяння відтворенню. Метод вестерн-блоттингу (WB) використовувався для виявлення рівнів експресії стероїдогенного гострого регуляторного білка (StAR), ферменту розщеплення бічного ланцюга холестерину цитохрому P450 (P450scc / CYP11A1) і 3p-гідроксистероїд дегідрогенази (3p-HSD) у синтезі T шлях тканини яєчка. Імунофлуоресцентне фарбування (IF) використовувалося для якісного та кількісного аналізу для подальшої перевірки стимулюючого ефекту CPhG на експресію 3B-HSD у яєчках. Водночас у модель клітин із низькою експресією CYP11A1, сконструйовану за допомогою трансфікованої siRNA in vitro, згодом втручалися за допомогою різні концентрації: розчину CPhGs (50, 100, 200 мкг/мл) для визначення рівня CYP11A1 за WB. Перевірити, чи CPhG безпосередньо регулюють CYP11A1 для сприяння біосинтезу Т.
Результати:
1. Скринінг частин C. tubulosa, що мають ефект проти втоми
Три різні екстраговані частини C. tubulosa мають певний ефект покращення здатності до навчання та пам’яті втомлених мишей. Серед них Oligose може значно подовжити інкубаційний період і зменшити кількість помилок в експерименті з уникнення темряви, скоротити час проходження лабіринту з восьми рук і зменшити кількість помилок, зробити рівні 5-HT , NE та E в гіпоталамусі та корі головного мозку мишей моделі центральної втоми нижчі, ніж у групі SD, а рівні CRH, ACTH, CORT близькі до нормального рівня в кровообігу. У той же час олігоза може значно подовжити час виснаження при плаванні мишей моделі втоми від фізичних навантажень, у яких вона може значно зменшити накопичення плазмових метаболітів LD, BUN і MDA. Крім того, олігоза може значно збільшити запаси глікогену в печінці та м’язах. . Однак глікан сам по собі істотно впливає на поліпшення показників спортивної втоми, а CPhGs не має явного ефекту. Таким чином, наведені вище результати свідчать про те, що олігоза має найкращий вплив на покращення центральної втоми та втоми від фізичних навантажень у мишей.
2. Скринінг частин C. tubulosa, що сприяють розмноженню
Три різні екстракційні частини C. tubulosa мають певний вплив на статеву поведінку та біохімічні показники крові щурів на моделі репродуктивного ушкодження. Найбільш значний ефект має ХФГ. Конкретна ефективність така: CPhGs можуть відновити значення plasmacAMP/CGMP, що є однією з характеристик дефіциту ниркового яну, щоб значно скоротити ерекцію, зафіксувати затримку та збільшити кількість захоплень. Підвищення вологої маси яєчок і сім'яних бульбашок і вмісту в сім'яній плазмі фруктози і цинку. Він може значно підвищити рівень Т в сироватці крові, підтримувати стабільність рівнів FHSGnRH, E2 і LH, а також значно покращити патологічну морфологію яєчок. Хоча глікан регулює лише рівні FSH, LH і E2, ефект Oligose не дуже очевидний, тому , наведені вище експериментальні результати показують, що: CPhGs має найкращий вплив на покращення репродуктивної здатності щурів.
3. Оцінка ефективності різних доз CPhGs для сприяння репродукції
Два рівні дози CPhGs (145, 289 мг/кг) маютьпевний вплив на еректильну функцію, здатність до парування, волога вага органу, рівні гормонів ЛГ і Т у сироватці крові та патологічні зміни морфології яєчок у модельних мишей з репродуктивним ушкодженням. Низькі дози CPhG (72 мг/кг) не мають очевидного захисного ефекту щодо репродуктивних пошкоджень, спричинених гідрокортизоном. Високі дози CPhG ефективно скоротили ерекцію, захоплення та затримку еякуляції модельних мишей, а також збільшили кількість захоплень та еякуляцій. У той же час високі дози CPhGs можуть збільшити вологу вагу яєчок, придатків яєчок, сім’яних пухирців і пеніса, а також підвищити рівень Т і гормону ЛГ, який знаходиться вище за течією, значно покращуючи патологію яєчок. Позитивний препарат TP може значно покращити сексуальну поведінку мишей з моделлю репродуктивного ушкодження, але він різко підвищив рівень T у крові мишей, значно перевищивши нормальний рівень, і не було очевидного ефекту покращення на зниження рівня ЛГ, викликаного гідрокортизоном. , а також не міг полегшити стан патологічного пошкодження яєчок. Наведені вище експериментальні результати свідчать про те, що CPhGs можуть покращити репродуктивну здатність мишей шляхом підвищення рівня Т, і це кількісно залежить. Ефект високої дози є найкращим, основним проявом є помірне підвищення рівня циркулюючого Т у мишей з репродуктивним ушкодженням, і його механізм дії відрізняється від механізму дії ТП.
4. Механізми in vivo та in vitro CPhG для підвищення рівня T та сприяння репродукції
Експерименти in vivo, результати WB, показали, що CPhGs можуть значно збільшити експресію стероїд-продукуючих ферментів CYP11A1 і дегідрогенази 3P-HSD на шляху синтезу в тканині яєчка, але це неочевидний ефект для транспортного білка StARA як препарату позитивного контролю, TP інгібував експресію CYP11A. IF далі використовували для якісного та кількісного виявлення експресії 3p-HSD. Результати відповідали результатам, показаним у WB. Експресія 3p-HSD була значно збільшена після лікування високими дозами CPhG. Експерименти in vitro, результати WB показали, що CPhGs (50 мкг/мл) можуть значно збільшити експресію CYPl1A1 у нормальних клітинах. Порівняно з тим, що CPhG вводили після трансфекції siRNA, CPhG все ще можуть значно підвищувати експресію CYP11Al, але ефект дещо знижується. Наведені вище результати вказують на те, що свині можуть безпосередньо регулювати ключовий фермент CYP11A1 на шляху синтезу T для сприяння експресії його 3-HSD, таким чином підвищуючи рівень T.
Висновки:
Скринінг та оцінка ефективності олігози, глікану та CPhG на тваринних моделях для зменшення втоми та репродуктивного ефекту. Результати показали, що олігоза може регулювати вивільнення центральних нейромедіаторів, підтримувати стабільний рівень гормонів крові, пов’язаних із віссю гіпоталамус-гіпофіз-наднирники, підвищувати здатність печінки та скелетних м’язів зберігати глікоген та зменшувати накопичення метаболітів. Крім того, це покращує навчальну пам’ять і здатність до фізичних вправ у мишей, що вивчають втому. CPhG можуть захистити яєчко від пошкодження гідрокортизоном і збільшити вологу вагу яєчка та його додаткових статевих органів. підтримувати стабільний рівень гормонів крові, пов'язаних з віссю гіпоталамус-гіпофіз-гонада. Він значно підвищує експресію стероїдних ферментів CYP11A1 і дегідрогенази 3p-HSD у ферментативній реакції синтезу Т після надходження холестерину в мітохондрії шляхом безпосереднього регулювання рівня CYP1lAI на шляху синтезу Т. тим самим сприяючи біосинтезу Т, покращуючи репродуктивну здатність мишей і відіграючи роль тонізуючого ниркового ян.
КЛЮЧОВІ СЛОВА:фенілетаноїдні глікозиди, полісахариди, олігосахариди,проти втоми, Цистанка трубчаста, дефіцит нирок-ян, репродуктивні пошкодження
Служба підтримки Wecistanche - найбільшого експортера cistanche в Китаї:
Електронна адреса:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Тел.:+86 15292862950
Магазин:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
