Частина 2. Хронічна хвороба нирок і старіння по-різному зменшують кістковий матеріал і мікроархітектуру у мишей C57Bl/6

Контакти:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Натисніть тут, щоб перейти до частини 1

Цистанхея дуже добре допомагає при захворюваннях нирок

3. Результати

3.1 Підтвердження захворювання нирок

У кінцевій точці дослідження через три місяці після операції миші з 5/6 Nx мали значно підвищений рівень сечовини в сироватці крові та зниження сечовини в сечі, що відповідає порушенню функції нирок (таблиця 1). Сироватковий ПТГ і фосфат були значно підвищені як основні ефекти ХХН. ХХН суттєво не вплинула на рівень кальцію в сироватці крові. Для всіх вимірювань сироватки та сечі вік не був істотним основним ефектом.

3.2 Старіння та ХХН зменшують кортикальну та трабекулярну мікроархітектуру

Старінняі ХХН негативно вплинули на кортикальну геометрію та трабекулярну мікроархітектуру (таблиці 2–3, малюнок 1).Старінняз 6 міс. до 24 міс. значно збільшений кірковийкісткарозміри поперечного перерізу (збільшення полярного моменту інерції, PMI), пористість (Ct. Po) і мінеральна щільність тканини (TMD), а також зменшення кортикальної товщини кістки (Ct. Th), кортикальнийкісткаоб’єм (зниження об’ємної фракції кістки (BV/TV),кісткачастка площі (BA/TA). Старіння також зменшує кількість трабекул (Tb. N) і товщину (Tb. Th), об’ємну частку трабекулярної кістки (BV/TV) і об’ємну мінеральну щільність кісткової тканини (vMBMD). Як і у випадку старіння, ХХН також мала значний негативний вплив накісткаоб’єм через зниження BV/TV, Тб. N, BA/TA, Ct. Th, і підвищений Ct.Po. Ці ефекти були адитивними, так що найгірший об’єм кісток спостерігався у старих мишей із ХХН. На відміну від старіння, ХХН значно зменшує ІМТ і ТМД. Старіння та ХХН не мали суттєвої взаємодії для будь-якого показника кортикальної чи трабекулярної мікроархітектури.

3.3 Старіння та ХХН по-різному погіршують механічні та матеріальні властивості цілої кістки

На рівні цілої кістки, як старіння, так і хронічна ниркова недостатність погіршилися матеріальні та механічні властивості (табл. 4, додаткова таблиця 1).Старінняз 6 міс. до 24 міс. значно знижує більшість властивостей матеріалу цілої кістки (наприклад, модуль, межа текучості, максимальне напруження), але не впливає на міцність. CKD значно скоротила роботу до руйнування, але більшість інших матеріальних і механічних параметрів не вплинула на CKD як основний ефект. Міцність, незалежний від геометрії аналог роботи до руйнування, мала значну взаємодію між старінням і ХХН (p=0.011). За результатами ретроспективного тестування було видно, що через 18 місяців ХХН може знизити міцність (-47,9 відсотка, p=0.023) (рис. 2d).

3.4 Старіння та ХХН зменшують структурну жорсткість FEA в проксимальному відділі великогомілкової кістки

Ми використали FEA, щоб оцінити, як старіння та ХХН впливають на механічні властивості через зміни трабекулярної та кортикальної структури. Структурна жорсткість FEA в проксимальному відділі великогомілкової кістки значно зменшилася зі старінням і ХХН (табл. 4). Між ними не було значної взаємодіїстарінняі ХХН. Жорсткість FEA позитивно корелювала з жорсткістю стегнової кістки від триточкового згинання (r2=0.67).

3.5 Старіння знижує мікромасштабну жорсткість кісток, тоді як ХХН зменшує мікромасштабні просторові варіації кісткової тканини

Щоб оцінити, якстарінняі ХХН впливають на властивості тканинного матеріалу корикістка, ми застосували наноіндентування та раманівську спектроскопію на відповідних ділянках для оцінки мікромасштабукісткамодуль і склад тканини (табл. 5). Гетерогенність кісткової тканини оцінювали через оцінку просторової дисперсії цих властивостей. Середній приведений модуль (Er) і стандартне відхилення Er значно зменшувалися та збільшувалися відповідно з віком. ХХН значно зменшила стандартне відхилення, але не середнє значення Er. Мікромасштабний склад кісткової тканини, оцінений за допомогою раманівської спектроскопії (тобто середній мінерал: матриця, карбонат: фосфат, кристалічність), суттєво не змінювався ні з віком, ні з ХХН. Однак стандартне відхилення кристалічності було значно знижено при ХХН.

3.6 Старіння та ХХН по-різному впливають на наномеханіку колагенових фібрил

Ми оцінили, чи ХХН і старіння впливають на наномеханіку колагену за допомогою малокутового рентгенівського розсіювання (SAXS) одночасно з навантаженням на розтяг. Відповідно до результатів згинання, вимірювання міцності на розтяг показали, що старіння значно зменшує межу текучості тканини та максимальну напругу. Вік і ХХН по-різному впливали на наномеханіку колагену (табл. 6, рис. 2).Старіннязменшив деформацію колагену, виміряну при максимальному деформації тканини, але не вплинув на відсоток деформації колагену (деформація колагену / загальна деформація тканини, відсоток ColMax). Навпаки, CKD значно збільшив відсоток ColMax.

3.7 Зшивання колагену не відрізнялося при старінні та ХХН

Ми намагалися зрозуміти, чи можна пояснити зміну наномеханіки колагену, що спостерігається при ХХН, змінами в скелетних зшивках. Тому ми охарактеризували ферментативне (гідроксиллізилпіридинолін, HP і лізилпіридинолін, LP) і неферментативне перехресне зшивання (пентозидин) за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (HPLC). Поперечні зв’язки HP, LP і пентозидину мали вищі середні концентрації зі збільшенням віку, але ці зміни не були значущими (табл. 7). Подібним чином спостерігалася тенденція до зниження ЛП при ХХН, але цей ефект був незначним. Ми далі кількісно визначили загальні флуоресцентні кінцеві продукти розширеного глікування (AGE) і виявили, що загальні флуоресцентні AGE не відрізняються в залежності від старіння або ХХН.

3.8 Вікові зміни лакунарної геометрії остеоцитів не спостерігаються у старіючих мишей із ХХН

Перилакунарне/канальцеве ремоделювання остеоцитів (PLR) реагує на зміни мінерального гомеостазу та є важливим для визначеннякісткаопір руйнуванню. Ми оцінили лакунарну геометрію остеоцитів, щоб визначити, чи єстарінняіз ХХН змінює PLR (табл. 8). Про наслідки лише старіння (без ХХН) для цих мишей Шам повідомлялося раніше (21). Коротко кажучи, у мишей Sham зі збільшенням віку лакуни стали меншими, більш сферичними та менш численними. Коли старіння та ХХН аналізували разом для цього дослідження, старіння значно зменшувало щільність лакунарного числа, об’єм і площу поверхні, а також збільшувало сферичність, сплюснутість і тета-розмах. Не було значного впливу ХХН за будь-яким показником. Проте спостерігалася значна взаємодія між віком і ХХН щодо сферичності. У той час як сферичність зростала з віком для мишей Sham, цей показник був найбільшим для мишей середнього віку з ХХН, а потім зменшувався для старих мишей до значення, подібного до того, що спостерігається у молодих мишей. Іншими словами, лакуни стали меншими і округлими тільки встарінняПідставні миші, а не старі миші з ХХН. Ця закономірність також спостерігалася при ХХН щодо щільності лакунарного числа, об’єму та площі поверхні, хоча взаємодія між старінням і ХХН була незначною.

Розмір лакуни остеоцитів не збільшувався з віком у мишей із ХХН, натомість збільшувався з порушенням регуляції фосфатів. Зокрема, для мишей із ХХН об’єм лакуни остеоцита (ρ {{0}} Спірмена плюс 0.584, p=0.017), площа поверхні (ρ=плюс 0,603 p=0.013) і сферичність (ρ=- 0.500, p=0.048) корелювали з сироватковим фосфатом, оціненим у кінцевій точці дослідження. Навпаки, показники, пов’язані з поширеністю та орієнтацією лакун (тобто щільність кількості остеоцитів, найближчий центр маси, діапазон тета), не корелювали суттєво з циркулюючим фосфатом. Лакунарні вимірювання остеоцитів не корелювали з вмістом кальцію в сироватці крові, сечовини в сироватці або сечовини в сечі. Для мишей Sham щільність лакунарної кількості остеоцитів позитивно корелювала з кальцієм у сироватці крові (ρ=плюс 0,681, p=0,004). Усі інші лакунарні вимірювання остеоцитів лише слабо корелюють з хімічними показниками сироватки та сечі.

Зв’язок між розміром лакуни остеоцитів і фосфатом у сироватці крові для мишей із ХХН не був безпосередньо спричинений підвищенням ПТГ. При розгляді мишей Sham і CKD разом, фосфат значно корелював зі збільшенням ПТГ (Спірмен ρ {{0}} плюс 0.562, p=0.001). Однак, хоча і фосфат, і паратгормон були збільшені як основний ефект ХХН, ці показники не корелювали суттєво один з одним для мишей із ХХН (p > 0,05). Немає показників лакунарної геометрії остеоцитів, які б суттєво корелювали з ПТГ для мишей Sham або CKD.

3.9 Регресійний аналіз показує, що змінена наномеханіка колагену впливає на міцність

Ми намагалися визначити, як зміни в міцності цілої кістки внаслідок згинання були пов’язані зі змінами в нано- та мікромасштабних показникахкісткаякість для мишей Sham і CKD. Ми виконали регресію міцності цілої кістки як міри якості кісток у менших масштабах довжини для мишей Sham та CKD, використовуючи вік як коваріату. Для мишей Sham жодні показники якості кісток не були значущими пояснювальними змінними для міцності. Для ХХН єдиним значущим предиктором міцності (T) був відсоток ColMax (ln(T)=2.437 – 0.00371* відсоток ColMax; r2=49 .4 відсотка, р <0,05). сила="" регресії="" не="" була="" покращена="" шляхом="" поправки="" на="">

3.10 Зміни якості кісток не пояснюються коливаннями ПТГ

Ми оцінили кореляцію Спірмена між показниками якості кісток і паратгормоном, щоб зрозуміти, чи гірше було у мишей із вищим рівнем паратгормону.кісткаякість. Хоча ПТГ був значно вищим при 5/6 Nx, не було суттєвої кореляції між ПТГ і мікромасштабною якістю кістки.

4. Обговорення

Метою цього дослідження було дослідити, як 5/6 Nx – індукує ХХН істаріннякожен з них знижує якість кісток, в тому числікісткамікроархітектури, а також властивості матеріалу кісткової тканини. ХНН погіршує якість кісток, включаючи мікроархітектуру та матеріал, від мікрометрової шкали до масштабу цілої кістки. У нашому дослідженні спостерігалося погіршення якості кісток за кількома модальностями та шкалами довжини. Ефект ХХН полягав у зменшенні кортикальної та трабекулярної мікроархітектури, зміні просторових варіацій мікромасштабних властивостей матеріалу, а також зміні наномеханіки колагену. Крім того, ХХН і старіння мали вплив

інтерактивний вплив на міцність, яка була найбільшою для мишей середнього віку. Наші результати підкреслюють, що при ХХН порушуються кілька ключових компонентів якості кісток. Ці спостереження підтверджують зростаючу кількість доказів із гризунів і клінічних досліджень про те, що якість кісток знижується при ХХН і, ймовірно, сприяє втраті стійкості до переломів.

Втратакісткамікроархітектури з ХХН виникла на додаток до шкідливих наслідківстарінняі сприяв втраті цілого-кісткасила. У цьому дослідженні ми виявили, щостарінняі ХХН значно зменшили кортикальну та трабекулярну мікроархітектуру. Старіння та ХХН призвели до тоншої, більш пористої кортикальної кістки та меншої кількості та тонших трабекул. Єдиним винятком був мінерал кістки, оцінений мікроКТ (тобто TMD), який збільшувався з віком і зменшувався при ХХН. Для всіх кортикальних і трабекулярних показників найгірша мікроархітектура кісток була очевидною у старих мишей із ХХН. Втратакісткамікроархітектура вплинула на структурну цілісність цілої кістки. З FEA було виявлено, що старіння погіршує мікроархітектуру кістки в проксимальному відділі великогомілкової кістки, тоді як ХХН знижує структурну жорсткість.

Для заходів щодокісткаякість матеріалу, вік і ХХН мали різні впливи (рис. 2). Зі збільшенням віку модуль цілої кістки та максимальне навантаження зменшилися, як і модуль тканини в мікрометричному масштабі. Текучість і максимальне напруження від випробувань на розтяг ліктьової променевої кістки також зменшувалися з віком. Крім того, відповідно до зразків людей, досліджених за допомогою SAXS,старіннябуло пов’язано зі збільшенням деформації колагену при максимальній деформації, що означає посилення колагенових волокон (26). ХХН не вплинула на модуль пружності або міцність цілої кістки, але натомість значно зменшила роботу до перелому та змінила просторову варіацію тканинного матеріалу. Крім того, ХХН може знизити міцність у мишей середнього віку, оскільки при цьому захворюванні тягар розтягування переносився на колагенові волокна. Збільшений відсоток колагену при максимальному навантаженні був єдиною значущою змінною, що пояснювала зниження міцності при ХХН, що свідчить про те, що втрату міцності всієї кістки можна принаймні частково пояснити зміненою механікою колагену.

Походження зміненої нанорозмірної механічної поведінки колагену невідоме. Спостерігалася тенденція до зниження скелетних поперечних зв’язків при ХХН. Однак HP і LP, виміряні на плечовій кістці, не корелювали з механічними властивостями колагену за SAXS, виміряними на комплексі ліктьова/променева кістка, можливо, через різні місця аналізу. Цей зсув у деформації також може бути наслідком зміненого вмісту або розподілу мінералів або змін у зв’язуванні між колагеном і мінералом. Підвищений відсоток ColMax може не бути безпосередньо відповідальним за втрату в’язкості при ХХН, але може бути симптомом, пов’язаним зі зміненим оборотом і недоліками в мінеральній організації. Наприклад, змінена мінералізація може зробити колаген більш рухливим або може розсіювати менше енергії через мікротріщини. Ці зміни можуть спричинити спостережувану втрату міцності при ХХН, а також збільшення навантаження на колагенові волокна. У майбутніх дослідженнях буде важливо визначити, чому ХХН переносить напругу на колагенові волокна, але тут ми зазначаємо, що ця зміна в поведінці колагену, мабуть, відіграє важливу роль у тому, як ХХН зменшує властивості цілого кісткового матеріалу.

Оскільки при ХХН відбуваються зміни властивостей кісткового матеріалу, остеоцити, як відомо, модулюють розмір тканиникісткаякості за допомогою перилакунарного/канальцевого ремоделювання (PLR), ми також мали на меті зрозуміти, чи була модифікована лакунарна морфологія 3D остеоцитів при ХХН (15, 16). У той час як лакуни остеоцитів ставали меншими, рідшими та менш вирівняними зі збільшенням віку мишей Sham, лакуни залишалися поширеними та великими для старих мишей із ХХН.

Натомість у мишей із ХХН сироватковий фосфат суттєво та позитивно корелював із розміром лакун остеоцитів. Хоча і фосфат, і ПТГ були значно підвищені

з ХХН миші з вищим ПТГ не мали вищого рівня фосфату. Ці результати не обов’язково суперечать один одному. Фосфат у сироватці крові є чистим результатом фосфату, доданого в результаті кишкового всмоктування такісткарезорбція менше фосфатів, видалених нирковою екскрецією та формуванням кісток. Таким чином, хоча наші миші з ХХН мали загалом підвищений ПТГ, миші з вищим вмістом фосфату могли вичерпати інші системні компенсаторні механізми.

Остеоцити експресують більше FGF23 у контексті порушення мінералізації (наприклад, нокаут DMP1, Х-зчеплена гіпофосфатемія) (20,48,49), а також при хронічній хворобі нирок (14,48,50). Останні дані свідчать про те, що на додаток до цієї ендокринної ролі остеоцити можуть безпосередньо брати участь у гомеостазі фосфатних мінералів через PLR (20). Було виявлено, що об’єм лакун остеоцитів збільшується при Х-зчепленій гіпофосфатемії. Лікування блокуючими антитілами FGF23 або 1,25 дигідроксивітаміну D відновлювало лакунарні об’єми остеоцитів до значень, ближчих до порівнянь дикого типу (20). При ХХН мінеральна дисрегуляція спочатку спричинена зниженням фосфатної фільтрації хворої нирки. Збільшенийкісткаоборот є неадаптивною реакцією, яка вказує на те, що системні компенсаторні механізми для підтримки контролю фосфатів перевантажені (6,7). У цьому випадку зв’язок між підвищеним вмістом фосфатів і збільшеним лакунарним об’ємом остеоцитів свідчить про те, що PLR може бути додатковою стратегією регуляції мінерального гомеостазу. Потрібне додаткове дослідження, щоб дослідити, як лакунарна геометрія остеоцитів і PLR пов’язані зі зміненим обміном кісток, якістю матеріалу кісткової тканини та резистентністю до переломів при ХХН.

Наші висновки свідчать про те, що процеси впливаютькісткаматеріал різнийстарінняпроти ХХН. У старіючих людей, а також мишей,кісткаоборот (тобто резорбція остеокластів і утворення остеобластів) сповільнюється, а зрілість тканин зростає. У цьому дослідженні 5/6 Nx спричинив явні дефекти якості кістки внаслідок старіння, такі як менша щільність кісткової тканини за допомогою мікроКТ, змінена варіабельність властивостей тканинного матеріалу та більша участь колагену в навантаженні на розтяг. Хоча ПТГ був значно вищим при ХХН, миші з вищим ПТГ не мали нижчої якості кісток. Кілька причин можуть пояснити цей висновок. По-перше, у мишей у нашому дослідженні рівень ПТГ був значно нижчим, ніж у дослідженнях із тяжкою ХХН та супутнім вторинним гіперпаратиреозом (9, 12). Цілком можливо, що зміни в обміні кісткової тканини були відносно скромними в нашому дослідженні. Однак ми безпосередньо не оцінювали обмін кісток, тому ця можливість є спекулятивною. По-друге, ХХН, незалежно від статусу регенерації, експериментально асоціюється зі зміненою якістю кісток. Івасакі та його колеги повідомили, що ХХН з високим оборотом від 5/6 Nx, а також ХХН з низьким оборотом від 5/6 Nx і тиреопаратиреоїдектомія призвели до аналогічних змін у кістковій механіці, і пов’язали ці зміни з уремією (11). Цілком можливо, що втрата якості кісткової тканини зумовлена ​​не лише вторинною гіперфосфатемією, але також на неї впливають більш помірні зміни в обміні кісткової тканини та накопичення уремічних токсинів.

Ми очікували, що декількакісткапоказники якості, в тому числі в ціломукісткаміцність, пентозидин, мінерал: матриця та карбонат: фосфат зміниться від 6 до 24 місяців (25, 26, 30, 51, 52). Хоча кожен із цих показників змінювався в очікуваному напрямку зі збільшенням віку, вплив віку не був статистично значущим. Додатковий аналіз потужності за допомогою G*Power (53) свідчить про те, що міцність, пентозидин і мінеральна матриця були недостатніми для виявлення ефектустаріння, тоді як карбонат: фосфат, ймовірно, не впливав на вік у цьому дослідженні. Крім того, колагеновий поперечний зв’язок LP був недостатнім для виявлення ефекту ХХН (додаткова таблиця 2). Існує кілька можливих причин, чому деякі показники якості кістки врешті-решт були недостатніми в цьому дослідженні. По-перше, ми використали спеціальний прилад для наноіндентування комбінаційного розсіювання з унікальною перевагою спільного локалізації вимірювань. Інтенсивність сигналу на цьому спеціальному приладі нижча, ніж на автономних приладах комбінаційного розсіювання, тому можливо, що наше співвідношення сигнал/шум було недостатнім для визначення вікових змін. Міцність (розрахована від роботи до руйнування) є мірою, схильною до високої мінливості (54), а мінливість механічних властивостей ще більше збільшується для літніх мишей (25). Більша варіабельність пентозидину також спостерігалася з віком у дослідженнях на людях і гризунах (52, 55, 56). Таким чином, ймовірно, що висока дисперсія в цих показниках приховала відмінності між оцінюваними групами.

Кілька обмежень вплинули на результати цього дослідження. Динамічну кількісну гістоморфометрію не проводили, але майбутні дослідження дозволять оцінити активність остеобластів, остеокластів і остеоцитів, а такожкісткатоварообіг. Незважаючи на те, що ми виявили кілька порушень якості кісток, які виникають із ХХН і шкідливо впливають на міцність цілої кістки, потрібна подальша робота, щоб підтвердити походження цих порушень, а також роль остеоцитів у їх виникненні. Аналіз експресії генів і білків був би корисним для виявлення походження порушення наномеханіки колагену, оскільки на це порушення не впливали зміни в колагенових поперечних зв’язках. Крім того, наша інтерпретація того, як остеоцити можуть брати участь у регулюванні мінерального гомеостазу та підтримці якості кістки при ХХН, вимагає додаткових глобальних (тобто експресії генів) і локальних вимірювань (тобто гістологічної оцінки резорбції та формування кістки).

Таким чином, ми виявили, що ХХН знижує якість кісток на додаток до впливустарінняпоодинці. ХХН і старіння аналогічно зменшують кортикальну та трабекулярнукісткамікроархітектури так, що найбільш глибока втрата мікроархітектури спостерігалася у старих мишей зхвороба печінки. ХХН також погіршує властивості кісткового матеріалу, що призводить до зниження видимої зрілості кістки зі зміненою наномеханікою колагену. Ці скорочення вкісткаякість, включаючи мікроархітектуру та властивості кісткового матеріалу, дають зрозуміти, як втрачається стійкість до переломів при ХХН. Далі комбінований впливстарінняі ХХН на якість кісток допомагають пояснити, чому літні люди з ХХН мають найвищий ризик переломів.

Додатковий матеріал

Зверніться до веб-версії PubMed Central, щоб отримати додаткові матеріали.

Подяки:

Ми хотіли б подякувати Вільяму Шредеру за чудовий догляд за дослідними тваринами, а також Вільяму Шредеру та Раяну Кларку за хімічний аналіз сироватки. Підтримка надавалася CMH через NIHT32 AG000279. Фінансування цієї роботи також було надано KBK і VLF грантом NIH/NCATS Колорадо CTSA номер UL1 TR001082, наукова нагорода команди другого пілота. Фінансування TA надано R01 DE019284. Комбінований аналіз із застосуванням наноіндентування та раманівської спектроскопії став можливим завдяки використанню спеціального приладу, який фінансується NSF Major Research Instrumentation Award #1338154. Розсіювання рентгенівського випромінювання на Beamline 7.3.3 Advanced Light Source було підтримано Управлінням базових енергетичних наук Міністерства енергетики США згідно з контрактом № DE-AC02–05CH11231. Ми також дякуємо групі AZ Weber в LBL за надання їхнього етапу розтягування, який був підтриманий Консорціумом продуктивності та довговічності паливних елементів DOE EERE (FC-PAD).

Список літератури

1. Ніколас Т.Л., МакМахон Д.І., Шейн Е. Зв’язок між помірним і важкимхвороба печінкиі перелом стегна в Сполучених Штатах. J Am Soc Nephrol 2006 11;17(11):3223–32. [PubMed: 17005938]

2. Ніч Д., Мілн А., Родерік П. Дж., Сміт Л., Хаббард Р., Флетчер А.Хронічна хвороба нирокта смертність літніх людей у ​​Великій Британії, пов’язана з переломом стегна. Трансплантація Nephrol Dial 2009 5;24(5):1539–

44. [PubMed: 19075194]

3. Yenchek RH, Ix JH, Shlipak MG, Bauer DC, Rianon NJ, Kritchevsky SB, et al. Мінеральна щільність кісткової тканини та ризик переломів у літніх людей із ХХН. Clin J Am Soc Nephrol 2012; 7 (березень 1997).

4. Нейлор К.Л., Макартур Е., Леслі В.Д., Фрейзер Л., Джамал С.А., Кадаретт С.М. та ін. Трирічна частота переломів вхронічні захворювання нирок. Kidney Int 2014;86(4):810–8. [PubMed: 24429401]

5. Кім С.М., Лонг Дж., Монтез-рат М., Леонард М., Чертоу Г.М. J BMR Перелом стегна у пацієнтів, які не потребують діалізуХронічна хвороба нирок

6. Moe S, Drüeke T, Cunningham J, Goodman W, Martin K, Olgaard K та ін. Визначення, оцінка та класифікація ниркової остеодистрофії: Положення зХвороба печінки: покращення глобальних результатів (KDIGO). Kidney Int 2006 6;69(11):1945–53. [PubMed: 16641930]

7. Хруска К., Тейтельбаум С. Ниркова остеодистрофія. N Engl J Med 1999;30(3):773–773.

8. Добавки К.І. KDIGO 2017 КЛІНІЧНА ПРАКТИЧНА НАСТАНОВА ДЛЯ ДІАГНОСТИКИ, ОЦІНКИ, ПРОФІЛАКТИКИ ТА ЛІКУВАННЯХРОНІЧНА ХВОРОБА НИРОК– МІНЕРАЛ І 2017;1–59.

9. Moe SM, Chen NX, Newman CL, Gattone VH, Organ JM, Chen X та ін. Порівняння кальцію із золедроновою кислотою для покращення кортикальної кістки на тваринній моделі ХХН. J Bone Miner Res 2014;29(4):902–10. [PubMed: 24038306]

10. Heveran CM, Ortega AM, Cureton A, Clark R, Livingston EW, Bateman TA та ін. Помірнийхронічні захворювання нирокпогіршує якість кісток у мишей C57Bl/6J. Bone 2016;86:1–9. [PubMed: 26860048]

11. Iwasaki Y, Kazama JJ, Yamato H, Matsuzaki A, Nakano T, Fukagawa M. Змінені властивості матеріалу є відповідальними за крихкість кісток у щурів із хронічним ушкодженням нирок. Кістка 2015; 81: 247–54. [PubMed: 26187196]

12. Аллен М.Р., Ньюман К.Л., Чен Н., Гранке М., Найман Дж.С., Мо С.М. Зміни в поперечних зв’язках скелетного колагену та гідратації матриксу при високому та низькому оборотіхронічні захворювання нирок. Osteoporos Int 2015 3;26(3):977–85. [PubMed: 25466530]

13. Kadokawa S, Matsumoto T, Naito H, Tanaka M. Original Assessment of trabecular Bone Architecture and Intrinsic Properties of CorticalкісткаТканина в моделі мишіХронічна хвороба нирок. J Hard Tissue Biol 2011; 20 (2): 79–86.

14. Стаббс JR, He N, Idiculla A, Gillihan R, Liu S, David V та ін. Поздовжня оцінка змін FGF23 і аномалій мінерального обміну в мишачій моделі хронічногохвороба печінки. J Bone Miner Res 2012; 27 (1): 38–46. [PubMed: 22031097]

15. Tang SY, Herber RP, Ho SP, Alliston T. Matrix metalloproteinase-13 потрібна для остеоцитарного перилакунарного ремоделювання та підтримує стійкість кісток до переломів. J Bone Miner Res 2012; 27 (9): 1936–50. [PubMed: 22549931]

16. Dole NS, Mazur CM, Acevedo C, Lopez JP, Monteiro DA, Fowler TW та ін. Внутрішній TGF-RQP остеоцитів c / c RR 2017; 21 (9): 2585–96.

17. Alliston T Біологічна регуляція якості кісток. Curr Osteoporos Rep 2014;12(3):366–75. [PubMed: 24894149]

18. Kaya S, Basta-Pljakic J, Seref-Ferlengez Z, Majeska RJ, Cardoso L, Bromage T, et al. Індуковані лактацією зміни об’єму лакунарно-канальцевого простору остеоцитів змінюють механічні властивості кортикальної кісткової тканини. J Bone Miner Res 2017;32(4):688–97. [PubMed: 27859586]

19. Боневальд Л.Ф. Дивовижний остеоцит. ДжкісткаMiner Res 2011; 26 (2): 229–38. [PubMed: 21254230]

20. Токарц Д., Мартінс Дж.С., Петі Е.Т., Лін К.П., Лю Е.С., Програма М та ін. Гормональна регуляція перилакунарного та канальцевого ремоделювання остеоцитів у мишачій моделі Х-зчепленої гіпофосфатемії. J Bone Miner Res 2018;33(3):499–509. [PubMed: 29083055]

21. Хеверан С.М., Рауфф А., Кінг К.Б., Карпентер Р.Д., Фергюсон В.Л. Новий інструмент із відкритим вихідним кодом для вимірювання 3D геометрії лакунар остеоцитів за допомогою конфокальної лазерної скануючої мікроскопії виявляє вікові зміни розміру та форми лакуни в кортикальній кістці миші. Кістка 2018;110.

22. Льюїс Л.М.Т., Се Ю., Халберт М.А., Кампос Р., Даллас М.Р., Боневальд Л.Ф. та ін. Дегенерація мережі остеоцитів у мишачій моделі старіння C57Bl/6.Старіння(Олбані, Нью-Йорк) 2017;9(10):2190–

208. [PubMed: 29074822]

23. Hemmatian H, Laurent MR, Bakker AD, Vanderschueren D, Klein-Nulend J, van Lenthe GH. Вікові зміни мікропористості кортикальної кістки самки миші.кістка2018;113(квітень):1–8. [PubMed: 29738854]

24. Hemmatian H, Bakker AD, Klein-Nulend J, van Lenthe GH.Старіння, Остеоцити та Механотрансдукція. Curr Osteoporos Rep 2017;15(5):401–11. [PubMed: 28891009]

25. Фергюсон В.Л., Айерс Р.А., Бейтман Т.А., Сімске С.Й. Розвиток кісткової тканини та вікова втрата кісткової маси у самців мишей C57BL/6J. Кістка 2003; 33 (3): 387–98. [PubMed: 13678781]

26. Zimmerman EA, Schaible E, Bale H, Barth HD, Tang SY, Reichert P, et al. Вікові зміни пластичності та міцності кортикальної кістки людини в різних масштабах довжини. Proc Natl Acad Sci 2011;108(35):14416–21. [PubMed: 21873221]

27. Seeman E, Delmas PD. Якість кісток — матеріальна та структурна основа єдиної міцності та крихкості. N Engl J Med 2006;354:2250–61. [PubMed: 16723616]

28. Halloran BP, Ferguson VL, Simske SJ, Burghardt A, Venton LL, Majumdar S. Зміни кісткової структури та маси з віком у самця миші C57BL/6J. J Bone Miner Res 2002;17(6):1044–50. [PubMed: 12054159]

29. Lauretani F, Bandinelli S, Griswold ME, Maggio M, Semba R, Guralnik JM та ін. Поздовжні зміни МЩКТ ікісткагеометрія в популяційному дослідженні. J Bone Miner Res 2008; 23 (3): 400–8. [PubMed: 17997708]

30. Yerramshetty JS, Lind C, Akkus O. Композиційна та фізико-хімічна однорідність кори стегнової кістки чоловіка збільшується після шостого десятиліття. Кістка 2006 12;39(6):1236–43. [PubMed: 16860007]

31. Каррі Дж.Д. Взаємозв’язок між жорсткістю та мінеральним вмістом кістки. J Biomech 1969; 2: 477–80. [PubMed: 16335147]

32. Szulc P, Seeman E. Мислення всередині та поза оболонками кістки: присвячено PDD Osteoporos Int 2009; 20 (8): 1281–8. [PubMed: 19590836]

33. Miyazaki-Anzai S, Levi M, Kratzer A, Ting TC, Lewis LB, Miyazaki M. Активація рецептора фарнезоїда × запобігає розвитку кальцифікації судин у ApoE−/−мишей із хронічною хворобою нирок. Circ Res 2010; 106 (12): 1807–17. [PubMed: 20431060]

34. Bouxsein ML, Boyd SK, Christiansen BA, Guldberg RE, Jepsen KJ, Müller R. Рекомендації щодо оцінки мікроструктури кісток у гризунів за допомогою мікрокомп’ютерної томографії. J Bone Miner Res 2010;25(7):1468–86. [PubMed: 20533309]

35 Тернер Ч.Х., Берр Д.Б. Основні біомеханічні вимірювання кісток: Навчальний посібник.кістка1993; 14 (4): 595–608. [PubMed: 8274302]

36. Lau AG, Kindig MW, Kent RW. Морфологія, розподіл, мінеральна щільність і об'ємна частка кальцинованого реберного хряща людини. Acta Biomater 2011; 7 (3): 1202–9. [PubMed: 20974298]

37. Lau AG, Kindig MW, Salzar RS, Kent RW. Мікромеханічне моделювання кальцифікації реберного хряща людини за допомогою узагальненого методу клітин. Acta Biomater 2015; 18: 226–35. [PubMed: 25712387]

38. Гексемер А, Брас В., Глоссінгер Дж., Шайбл Е., Ганн Е., Кіріан Р. та ін. Промінь SAXS/WAXS/GISAXS з багатошаровим монохроматором. J Phys Conf Ser 2010; 247.

39. Барт Х.Д., Циммерманн Е.А., Шайбл Е., Танг С.Й., Аллістон Т., Річі Р.О. Характеристика впливу променевого опромінення на ієрархічну структуру та механічні властивості кортикальної кістки людини. Біоматеріали 2011; 32 (34): 8892–904. [PubMed: 21885114]

40. Acevedo C, Bale H, Gludovatz B, Wat A, Tang SY, Wang M та ін. Лікування алендронатом змінює кісткову тканину на багатьох структурних рівнях здорової кортикальної кістки собаки.кістка2015;81:352–63. [PubMed: 26253333]

41. Abramoff MD, Magalhães PJ, Ram SJ. Біофотоніка міжн. Біофотоніка Int 2004; 11 (7): 36–42.

42. Олівер WC, Pharr GM. Удосконалена методика для визначення твердості та модуля пружності за допомогою експериментів із вимірюванням навантаження та зміщення. том. 7, Journal of Materials Research 1992

p. 1564–83.

43. Бушбі а. J, Ferguson VL, Boyde A. Nanoindenting of bone: Порівняння зразків, випробуваних у рідині та вбудованих у поліметилметакрилат. J Mater Res 2004 3;19(01):249–59.

44. Банк Р.А., Бекман Б., Верзійл Н., Де Рус JADM, Ніко Саккі А., Текоппеле Дж.М. Чутливе флуориметричне кількісне визначення поперечних зшивок піридинію та пентозидину в біологічних зразках за один сеанс високоефективної рідинної хроматографії. J Chromatogr B Biomed Appl 1997;703(1–2):37–44.

45. Орен Т.В., Ботолін С., Вільямс А., Бакнелл А., Кінг К.Б. Ендопротезування у ветеранів: аналіз хряща, кістки, сироватки крові та синовіальної рідини виявляє відмінності та схожість остеоартриту з супутнім діабетом і без нього. J Rehab Res Dev 2015;48(10):1195–210.

46. ​​Банк Р. А., Янсен Е. Дж., Бекман Б., Те Коппеле Дж. М. Аналіз амінокислот за допомогою обернено-фазової високоефективної рідинної хроматографії: покращені умови дериватізації та виявлення за допомогою 9- флуоренілметилхлорформіату. Anal Biochem 1996; 240 (2): 167–76. [PubMed: 8811901]

47. Берр Д. Б., Хузер М. Зміни в базовому протоколі фарбування фуксином en bloc для демонстрації мікропошкоджень, утворених in vivo.кістка1995;17(4):431–3. [PubMed: 8573418]

48. Feng JQ, Ye L, Schiavi S. Чи роблять остеоцити внесок у фосфатний гомеостаз? Curr Opin Nephrol Hypertens 2009;18(4):285–91. [PubMed: 19448536]

49. Feng JQ, Ward JM, Liu S, Lu Y, Xie Y, Yuan B та ін. Втрата DMP1 викликає рахіт і остеомаляцію та визначає роль остеоцитів у мінеральному обміні. Nat Genet 2006; 38 (11): 1310–5. [PubMed: 17033621]

50. Komaba H, Fukagawa M. FGF23-взаємодія паращитовидних залоз: наслідки при хронічній хворобі нирок. Kidney Int 2010;77(4):292–8. [PubMed: 20010546]

51. Боскі А, Коулман Р. Старіння та кістка. J Dent Res 2010 12;89(12):1333–48. [PubMed: 20924069]

52. Wang X, Shen X, Li X, Mauli Agrawal C. Вікові зміни колагенової мережі та міцності кісток.кістка2002;31(1):1–7. [PubMed: 12110404]

53. Faul F, Erdfelder E, Lang AG, Buchner A. G*Power 3: Гнучка програма статистичного аналізу потужності для соціальних, поведінкових і біомедичних наук. IEEE Int Symp Inf Theory - Proc 2007;39(2):175–91.

54. Ritchie RO, Koester KJ, Ionova S, Yao W, Lane NE, Ager JW. Вимірювання міцності кістки: підручник із особливим акцентом на дослідження дрібних тварин. Кістка 2008; 43 (5): 798–812. [PubMed: 18647665]

55. Найман Дж.С., Рой А., Акуна Р.Л., Гейл Х.Дж., Рейес М.Дж., Тайлер Дж.Х. та ін. Віковий вплив на концентрацію поперечних зшивок колагену в кістковій тканині остеону та інтерстиціальної кістки людини.кістка2006;39(6):1210–7. [PubMed: 16962838]

56. Saito M, Fujii K, Mori Y, Marumo K. Роль перехресних зв’язків, індукованих колагеном, як визначального фактора якості кісток у WBN зі спонтанним діабетом / Kob rats 2006;1514–23.