Журнал токсикологічної патології

АнотаціяПід час довгострокового тестування безпечності хімічних речовин на канцерогенність токсикологу необхідно знати низку сценаріїв, за яких виникають пухлини ниркових канальців або їхні попередники, які не спричинені канцерогенною дією досліджуваного препарату. Ситуації, що дають хибнопозитивні результати в нирках, включають загостренняхронічна прогресуюча нефропатія(CPN) у щурів сплутаність свідомостіатипова гіперплазія канальців(облігатний попередникпухлина ниркових канальців) з вогнищами доброякісної проліферації клітин ниркових канальців, пов’язаної з КПН, включення спонтанних пухлинних утворень, таких як амфофільна вакуолярна пухлина, у кількість пухлин досліджуваного препарату, можливість зв’язку між спонтанними формами дилатації канальців і утворенням пухлини ниркових канальців у мишей, а також передбачуваний прогноз хімічно індукованої каріомегалії щодо канцерогенності нирок як у щурів, так і у мишей. Приклади цих оманливих ситуацій описано та обговорено.

Ключові словамиша,пухлини ниркових канальців, механізми дії, форхлорфенурон,кістозні канальці.

НАТИСНІТЬ ТУТ, ЩОБ ОТРИМАТИ НАТУРАЛЬНИЙ ОРГАНІЧНИЙ ЕКСТРАКТ ЦИСТАНШИ З 25% ЕХІНАКОЗИДУ ТА 9% АКТЕОЗИДУ ДЛЯ ФУНКЦІЇ НИРОК

вступ

Під час довгострокового тестування безпечності хімічних речовин на канцерогенність, будь то нові фармацевтичні препарати, медичні пристрої, промислові хімікати, агрохімікати або харчові добавки/інгредієнти, токсиколог повинен знати про кілька ситуацій, коли виникають пухлини ниркових канальців або їх попередники, які не через канцерогенну дію досліджуваного продукту. Ситуації, які потенційно можуть викликати хибнопозитивні результати в нирках гризунів, включають загостренняхронічна прогресуюча нефропатія(CPN) у щурів; плутанинаатипова гіперплазія канальців, облігатний попередник пухлини ниркових канальців, з вогнищами доброякісної проліферації клітин ниркових канальців, пов’язаної з CPN; включення спонтанних пухлинних утворень, таких як амфофільна вакуолярна пухлина, у підрахунок пухлин досліджуваного препарату, включаючи можливість зв’язку між спонтанними формами дилатації канальців і утворенням пухлини ниркових канальців у мишей; і передбачуваний прогноз хімічно спричиненої каріомегалії щодо канцерогенності нирок як у щурів, так і у мишей.

Одна сутність, яка тут не розглядається, це альфа-2u-глобулінова нефропатія у щурів. Багато різноманітних хімічних речовин можуть індукувати пухлини ниркових канальців шляхом індукції підвищеної експресії та печінкової секреції альфа-2u-глобуліну, який, будучи зв’язаним із ксенобіотиком, накопичується в проксимальному канальці, спричиняючи тривале пошкодження епітеліальних клітин і компенсаторний обмін клітин . У цьому випадку пухлини справді спричинені хімічною речовиною, але механізм, що лежить в основі індукції пухлини нирок, а саме нековалентне зв’язування хімічної речовини з альфа-2u-глобуліном, не стосується людей, оскільки люди не мають подібного білка, з яким може зв’язуватися досліджувана речовина.

Дослідження, яке використовуватиметься як довідка, – це 2-річний біологічний аналіз канцерогенності кверцетину на гризунах у Національній токсикологічній програмі 1992 року. Кверцетин є широко поширеним рослинним флавонолом, який споживає людина. У цьому дослідженні спостерігалося незначне збільшення вогнищ гіперплазії ниркових канальців і аденом, а також значно одинична карцинома у самців щурів, які отримували високі дози. Ці результати змусили NTP класифікувати кверцетин як такий, що демонструє деякі докази канцерогенної активності у самців щурів. Це суперечить численним публікаціям, які досліджують сприятливі інгібуючі ефекти кверцетину.

1). Загострення хронічної прогресуючої нефропатії

Хронічна прогресуюча нефропатіяце спонтанне захворювання, яке зазвичай вражає нирки щурів. Захворювання починається в ранньому віці, ймовірно, протягом кількох місяців після народження, ідентифікуючись як спорадичні вогнища (рис. 1) базофільних клітин канальців з помітною базальною мембраною та скупченими ядрами2. Зокрема, у самців щурів він невпинно прогресує до середини життя, займаючи все більше й більше ниркової паренхіми, часто спричиняючи термінальну стадію хронічної хвороби нирок до того моменту, як щури постарівають. Поширена, і зокрема кінцева стадія ХПН, може становити фактор ризику для розвитку пухлин ниркових канальців від низької до маргінальної. Це було продемонстровано на контрольних щурах Хардом та ін.3.

На розвиток ЦПН помітно впливають дієта та статеві гормони. Високий вміст білка в раціоні та андрогенів сприяють тяжкості ХПН. Здається, не існує чіткого відповідника CPN у людей, ні патологічно, ні біологічно. Оскільки дієта та статеві гормони так легко впливають на CPN, дискутується, чи можна хімічне посилення тяжкості спонтанного захворювання розглядати як побічну реакцію, важливу для оцінки ризику.

Хімічне лікування може загострити розвиток ХПН шляхом збільшення швидкості прогресування тяжкості захворювання 3 . Оскільки кількість щурів із дуже розвиненою до кінцевої стадії ХПН збільшується при тяжкому загостренні ХПН, супроводжуючи це загострення прогресування захворювання, є подальший підвищений ризик розвитку аденоми ниркових канальців. Традиційно незначне збільшення пухлин ниркових канальців звинувачують у досліджуваній хімікаті, але при цьому не враховуються потенційні властивості досліджуваного агента, що загострюють CPN. Якщо тяжкість ХПН підвищується в дослідженні до частих випадків кінцевої стадії ХПН, а захворюваність пухлиною ниркових канальців є незначною або низькою, тоді слід розглянути спосіб дії, що включає загострення ХПН.

Повторне дослідження ураження нирок у дослідженні NTP кверцетину, проведене автором, включаючи класифікацію CPN у кожного щура за спеціалізованою шкалою 0-8, де ступінь 8 — термінальна стадія нирок, пов’язало вогнища гіперплазії та аденоми з Загострення ХПН.

Іншим аспектом кінцевої стадії CPN, який часто неправильно розуміють, є так звана перехідно-клітинна гіперплазія вистилання сосочка, яку іноді називають уротеліальною гіперплазією. Це ураження є наслідком CPN пізніх ступенів тяжкості і не є прямим результатом введення досліджуваного препарату. У Souza та ін.4 ми розглянули це ураження та звернули увагу на той факт, що вистилка сосочка не є уротелієм, а саме ураження не є гіперплазією. Здається, що ураження починається як везикулярне випинання вистилання сосочка (рис. 2), і ми припускаємо, що більш точною номенклатурою буде «везикулярна зміна вистилання сосочка»4. Важливо визнати, що це ураження спостерігається лише на прогресивній ХПН.

2). Дискримінація попередників пухлини від доброякісної проліферації клітин канальців CPN

Згідно з досвідом цього консультанта, деякі довгострокові дослідження досить часто були заплутані нездатністю розрізнити передпухлинний і доброякісний типи проліферації клітин ниркових канальців. Наприклад, у серії технічних звітів Національної токсикологічної програми використовується єдиний термін гіперплазія, який включає просту гіперплазію канальців (рис. 1), доброякісний тип проліферації клітин канальців, і атипову гіперплазію канальців5, яка є передпухлинною та облігатною попередник аденоми ниркових канальців (рис. 3). Ця проблема особливо очевидна в дослідженнях, де часті випадки розвинутої до кінцевої стадії CPN, оскільки приклади непухлинної проліферації канальцевих клітин із оманливою квітчастою морфологією зазвичай зустрічаються в нирках щурів із розвиненою CPN6.

Нирки щурів з кінцевою стадією CPN мають дуже мало нормальної паренхіми. Більшість кортикальної тканини складається зі смужок згорнутого атрофічного епітелію, що чергуються з більшими клинами розширених канальців, переповнених зліпками еозинофільного гіалінового матеріалу. Ця картина особливо помітна на поверхні нирки. Тракти розширених канальців спричиняють те, що кінцева стадія нирки в CPN щурів є більшою, ніж нормальна нирка щурів, що є основною відмінністю відтермінальна стадія ниркиу людей 7. Термінальна нирка у людей зморщена і менша за звичайні нирки людини.

Невеликі квітчасті епітеліальні проліферації в уражених CPN канальцях кори головного мозку та зовнішній смужці зовнішнього мозкового шару, що включає проксимальний каналець, можуть бути звичайними для кінцевої стадії CPN нирок щурів. Ці ураження створили діагностичну проблему для патологів дослідження щодо розрізнення уражень на шляху розвитку пухлини, тобто атипової гіперплазії канальців. Однак серійне розрізання показує, що такі проліферації клітин канальців, пов’язані з CPN, не є пренеопластичними, а згасають у вигляді атрофічних канальців6. Квіткові проліферативні ураження CPN, як правило, складаються з дрібних м’яких клітин без ядерця, оточених помітним потовщенням базальної мембрани (рис. 4). Оточування ураження ослабленими фібробластами (що означає розширення ураження) відсутнє8. Проліферативні ураження CPN також можуть мати форму злегка розширених канальців зі скромною багатоклітинною оболонкою канальців у частинах поперечного зрізу канальців. Зазвичай у цих уражених канальцях спостерігається десквамація клітин у просвіті. У багатьох випадках ураження являє собою точку, де каналець перетворюється на звивину, де клітини канальця мають тенденцію скупчуватися разом і накопичуватися. Серійне розрізання кінцевої стадії CPN нирки показує ці різноманітні аномальні проліферативні ураження, що включають канальці, які зазнають атрофічних змін6. Можна припустити, що ці ураження представляють собою спроби нирок, що відмовляють, зберегти частину епітелію канальців і, можливо, підтримувати певну функцію нирок. Деякі з вогнищ гіперплазії в дослідженні NTP кверцетину були проліфераціями канальцевих клітин, пов’язаних з CPN, і тому не мали значення для включення в результати неоплазії/пренеоплазії.

3). Включення пухлин спонтанного походження в остаточну кількість пухлин

Метою проведення 2--річних біотестів є визначення тривалої безпеки досліджуваного продукту, зокрема, щоб виключити можливість впливу на людину агентів із канцерогенною активністю. Роблячи це, також важливо уникати включення будь-яких новоутворень спонтанного походження в остаточний підрахунок пухлин, що призведе до неточного числа, оскільки будуть включені пухлини, не пов’язані з хімічним лікуванням. Відповідно, звертається увага на фенотипово відмінну пухлину у щурів і схильність до утворення кістозних канальців, яку автор виявив у мишей CD-1.

Служба підтримки Wecistanche - найбільшого експортера cistanche в Китаї:

Електронна адреса:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Тел.:+86 15292862950

Зверніться в магазин, щоб дізнатися більше про технічні характеристики:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop