ВЕРХ визначення ехінакозиду в Cistanche Cistanche

ВЕРХ визначення ехінакозиду в Cistanche Cistanche

Для отримання додаткової інформації:ali.ma@wecistanche.com

Мета:ВЕРХ визначила кількістьехінакозидвЦистанхеподрібненого в рідкому азоті, а також у природно висушеному стані, порівнюючи його вдика цистанкаіштучно культивована цистанхея.

Методи:використовувалася система lc{{0}}a HPLC (Shimadzu, Японія). Колонка YMC inertsil ods-sp (4,6 мм × 150 мм, 5 мкм; YMC Co Ltd, Японія); Рухома фаза: ацетонітрил-метанол-1 % мурашиної кислоти (10:15:75); Довжина хвилі детектування 334 нм; Швидкість потоку 0,7 мг · мл-1. Температура колонки 30 градусів С.

Результати:різні умови обробки мали дуже чіткий вплив на вміст ехінакозиду, із загалом вищими рівнями ехінакозиду в цистанці, подрібненій у рідкому азоті, ніж у тих, що подрібнені в природних умовах висушування повітря; Вміст діючої речовини дикЦистанхебула значно вищою, ніж у штучної культури.

Клацніть, щоб екстракт порошку Cistanche

Цистанхея — зникаючий вид, рослина-паразит, що мешкає в коренях Clostridium, Salix rubrum. У Китаї цистанхе в основному поширений у Внутрішній Монголії, Нінся, Ганьсу та Сіньцзяні, з чудовою репутацією «женьшеню пустелі», який має велике лікувальне значення. Його основними лікарськими інгредієнтами є фенілетанольні глікозиди, які залежно від їх заступників поділяються на ехінакозид, кисть листя, цистанхе та інші. Серед них ехінакозид має покращену сексуальну функцію, антиоксидантну дію та поглинає вільні радикали, але також має деякі антиапоптотичні ефекти. З 1980-х років технологія ВЕРХ, яка забезпечує простий і швидкий метод розділення фенілетанольних глікозидів, широко використовується для розділення природних продуктів. Метод ВЕРХ був обраний для аналізу вмісту Cistanche, основної активної складової дикої та штучно культивованої Cistanche, у різні періоди росту, забезпечуючи наукову основу для раціонального розвитку та використання Cistanche та для ефективної оцінки його якості.

Прилади та реактиви

Shimadzu, Японія lc-20апарат ВЕРХ, lc-20тандемний подвійний плунжерний насос, cto-20колонна піч, spda-20UV Vis детектор з подвійною довжиною хвилі; ультразвуковий очисник Kunshan kq-100; Ацетонітрил (хроматографічно чистий, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); Метанол (хроматографічно чистий, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); Мурашина кислота (хроматографічно чиста, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); дистильована вода

Контроль: ехінеозид, вміст більше або дорівнює 98,43 відсотка (Shanghai Yuanye Bio Technology Co., Ltd.).

П’ять зразків Cistanche: штучно висаджені протягом одного року з наступним Cistanche, штучно висаджені для Cistanche, штучно висушені Cistanche, дикі Cistanche та штучно висаджені більше трьох років з Cistanche.

2 методи та результати

2.1 визначення хроматографічних умов

Для того, щоб відокремити пік виміряного ехінеозиду на LC-хроматограмі від інших речовин, а також контролювати тиск насоса та часову таблицю, щоб вони були в межах відповідного діапазону, була проведена експериментальна модифікація хроматографічних умов, а після Експерименти з оптимізації з рухомою фазою зробили висновок, що чим вища температура, тим коротший час утримування та нижча концентрація, тим менший тиск насоса та менший час утримування, але висота піку стає меншою, що є несприятливим для вимірювання. Зрештою було визначено, що рухома фаза представляє собою ацетонітрил-метанол-1% мурашиної кислоти (10:15:75), довжина хвилі детектування 334 нм, швидкість потоку 0,7 мл/хв і температура колонки 30 градусів C, відповідно до об’єктивних умов кімнатної температури та максимального тиску підшипника насоса, що призвело до отримання великої кількості інформації з гострими формами піків і хорошим розділенням складових.

2.2 визначення колон

YMC-Inertsil ODS-SP (4,6 мм × 150 мм, 5 мкм; YMC Co Ltd, Японія).

2.3 приготування дослідного розчину

2.3.1 приготування стандартних розчинів

Відповідну кількість стандарту ехінеозиду точно зважували та додавали рухому фазу ацетонітрил-метанол-1% мурашиної кислоти (10:15:75), щоб отримати 0.0 6 мг · ML - 1, 0.05 мг · ML {{1{{20}}}}, 0,04 мг · ML - 1 , 0,03 мг · ML - 1, 0,02 мг · ML - 1, 0,01 мг · ML - 1 і 0,005 мг · ML - 1 розчини ехінакозиду стандартного.

2.3.2 приготування досліджуваного розчину

Відповідну кількість штучно висадженого свіжого цистанка (до одного року), штучно свіжого цистанка та дикого свіжого цистанка подрібнювали в порошок за допомогою ступки під рідким азотом; Крім того, відповідну кількість вищезазначених 3 цистанш нарізали на блоки, висушували природним шляхом у тіні, а після сушіння подрібнювали та подрібнювали в порошок. Штучну суху цистаншу та дикорослу цистанчу, висушену протягом трьох років, подрібнювали безпосередньо в порошок. 0.5 г порошку Cistanche, приготовленого вище, брали та поміщали в центрифужну пробірку, додавали 25 мл рухомої фази, зважували та замочували протягом 30 хв, обробляли ультразвуком протягом 40 хв, охолоджували, а потім зважували ще раз, щоб компенсувати відсутню вагу рухомою фазою, струшували та центрифугували, а супернатант відбирали для 0,45 мкМ фільтрації через мембрану мікропористого фільтра.

2.4 графіки кривих регресії для стандартного зразка ехінакозиду

Підготовлені стандартні зразки ехінеозиду вводили в апарат РХ окремо, а концентрацію контролю (мг · л{{0}}) використовували як абсцису, а відповідні площі піків ординували для побудови графіка стандартної кривої, в результаті чого отримано рівняння регресії: y=66 867 100x-46 360.83, R2=0.98637, яке показало ехінеозид при 0,1 ~ 1,2 мкг у хорошому лінійному співвідношенні.

3 Обговорення

Ехінакозид є одним з основних активних компонентів Cistanche, який може добре представляти хімічну основу фармакологічного ефекту Cistanche, роблячи оцінку якості лікарського матеріалу та його фармакологічного ефекту відповідними та покращуючи відповідність оцінки якості Cistanche.

Різні умови обробки мали явний вплив на вміст ехінакозиду, із загалом вищими рівнями ехінакозиду в цистанчі, подрібненій у рідкому азоті, ніж у тих, що подрібнені в природних умовах сушіння на повітрі. Звичайне сушіння повітрям зменшувало кількість ехінеозиду, який міг бути витрачений під час сушіння повітрям або перетворений. Щоб запобігти зниженню вмісту діючої речовини та гарантувати ефективність препарату Цистанхе, слід підібрати відповідне лікування.

Послідовно більшість вважали, що середовище штучного культивування Cistanche, а також звички росту не відрізняються від диких без різниці в якості, як правило, наголошували лише на врожайності та не аналізували якість. Це дослідження показало, що кількість штучно культивованого ехінакозиду Cistanche була нижчою, ніж кількість ехінакозиду дикого Cistanche. Найвищий вміст становив {{0}}.3360 відсотків диких цистанх, а найнижчий — 0.007 0 відсотків штучних цистанх. Тому його ще потрібно вивчити в технології вирощування для покращення вмісту діючих речовин.

Якість цистанки залежить від кількості його активного інгредієнта, ехінакозиду, який, у свою чергу, сильно залежить від сезону, часу та способу збирання, тому при збиранні цистанки слід враховувати статус накопичення активного інгредієнта та етап росту і розвитку. Враховуйте як якість, так і врожайність.

Метод, згаданий у цій статті, є простим, точним, відтворюваним і точним для визначення ехінеозиду. Корисно для визначення Cistanche.