Параметри екстракції та методи сушіння Cistanche Deserticola

Cistanche - це Cistanche deserticola YC Ma абоCistanche tubulosa (Schenk) Wightсухе м'ясисте стебло з лускатим листям рослини OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. Основною діючою речовиною Cistanche deserticola є фенілетанолглікозиди [2-4]. Фармакологічні дослідження показали, що він має функціїафродизіак, підвищення імунітету, іпосилення пам'яті[4-9].

В останні роки методологія поверхні відповіді широко використовується в екстракції традиційної китайської медицини [{{0}}]. Метод поверхні відгуку має такі властиві переваги, як висока точність виявлення, менша кількість необхідних експериментів, точне передбачення функціональних моделей і здатність відображати зв’язок між факторами та прогнозованими значеннями [15-17]. Тому в цьому експерименті використовується комплексна оцінка вмісту п’яти фенілетанолглікозидів як значення відповіді та використовується програмне забезпечення Design-Expert 8.0.6.1 для розробки експерименту, оптимізації процесу екстракції Cistanche deserticola та надання інформації для ідентифікації та встановлення стандартів якостіCistanche deserticola.

В даний час індекскомпоненти ехінацеазид і вербаскозидє актуальними темами досліджень у технології видобутку та переробкиCistanche deserticola. Видання Китайської фармакопеї 2015 року передбачає, що метод обробки Cistanche deserticola полягає в тому, щоб «видалити домішки, промити, зволожити, нарізати товстими скибочками та висушити». [1] немає чітких регламентів щодо способу сушіння. Таким чином, у цьому експерименті використовувалися вісім різних методів сушіння, включаючи сушіння на сонці, сушіння в тіні, сушіння в печі (40, 60, 80, 100, 120 градусів) і сушіння сублімацією, для обробки Cistanche deserticola [18], що забезпечило теоретичну основу для процес сушіння Cistanche deserticola.

Про керівництво.

ЕКСТРАКТ ЦИСТАНШИ З 30% ЕХІНКАЗИДУ

1 Матеріали та інструменти

Свіжий урожай Cistanche deserticola був зібраний у жовтні 2018 року. Місце походження – містечко Мітан, округ Мінкінь, Байінь, провінція Ганьсу. Доцент Гуо Єхонг з сільськогосподарського університету Ганьсу ідентифікував це як Cistanche deserticola YC Ma, м’ясисте стебло з лускоподібним листям. Еталонні речовини ехінацеазид (номер партії 82854-37-3, масова частка більше або дорівнює 98%), цистанхезид А (номер партії 93236-42-1, масова частка більше або дорівнює 95%), вербаскозид (номер партії { {5}}, масова частка більше або дорівнює 98%), ізомурабазин (номер партії 61303-13-7, масова частка більше або дорівнює 98%), 2′-ацетилвербаскозид (номер партії 94492-24-7 , масова частка більше або дорівнює 95%) були придбані у Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; мурашина кислота і метанол хроматографічної якості, компанія Merck, Німеччина; Вода – вода очищена, а інші реактиви – ЧДА.

Рідинний хроматограф Waters Acquity, детектор PDA, хроматографічна робоча станція Empower і система керування четвертинним розчинником; Ультразвуковий очисник KQ-100E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

компанія; Ваги аналітичні AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 сублімаційна сушарка, Telstar, Іспанія.

2 Методи та результати

2.1 Приготування розчину порівняння

Точно зважте відповідну кількістьехінацеазид, цистанхеозид А, вербаскозид, ізорбаскозид, і 2'-ацетилвербаскозид еталонними стандартами та додайте 70% метанолу, щоб отримати масові концентрації 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 та 0,48 мг/мл змішаного розчину порівняння.

2.2 Хроматографічні умови Cistanche deserticola

Waters Symmetry C18 (250 мм × 4,6 мм, 5 мкм); температура колонки 3{10}} градуси, об’ємний потік 1,0 мл/хв; рухомою фазою є метанол-0.1% водний розчин мурашиної кислоти, градієнт елюції: 0~12 хв, 29%~34% метанолу; 12-40 хв, 34%-40% метанолу; 30-35 хв, 40%-35% метанолу; 35-40 хв, 30% метанол;

1-ехінакозид 2-cistanche A 3-вербаскозид 4-ізоактеозид 5-2′-ацетилактеозид

Рис. 1 ВЕРХ змішаного стандартного зразка (A) і C. deserticola (B)

2.3 Приготування досліджуваного розчину

Точно зважте 1 г висушеного порошку Cistanche deserticola в колбу Ерленмейера (пропустіть через 65-сітчасте сито), додайте 50 мл 50% метанолу, зважте масу, ультразвук при 40 кГц при 150 Вт, охолодіть до кімнатної температури , і доведіть масу до її отримання.

2.4 Дослідження лінійної залежності

Візьміть {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 та 8 мл вищезазначеного змішаного еталонного розчину в 10 мл мірну колбу та додайте до мітки 70% метанолу. Точно відберіть 10 мкл і виміряйте відповідно до хроматографічних умов «2.2». Масова концентрація по осі абсцис (X), а площа піку по осі ординат (Y). Виконайте лінійну регресію та отримайте такі рівняння: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, лінійний діапазон 10,4~832,0 мкг/мл; Цистанхезид AY=87 980 -447 963, r=0.999 8, лінійний діапазон 6.3-504.0 мкг/мл; Ізомурабазин Y＝92 831 Глікозид Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, лінійний діапазон 4,8~384,0 мкг/мл.

2.5 Методичний огляд

2.5.1 Точний контроль

Візьміть 20 мкл змішаного еталонного розчину в пункті «2.1» і введіть 6 разів безперервно, щоб виміряти площі піків ехінацеазиду, цистанхеазиду А, вербаскозиду, ізоребаскозиду та 2'-ацетилвербаскозиду. RSDs становить 0,23% відповідно. , {{10}}.71%, 0.59%, 0,41%, 0,29%, що вказує на хорошу точність приладу.

2.5.2 Перевірка повторюваності

Візьміть 6 порцій того самого зразка Cistanche deserticola, приготуйте досліджуваний розчин відповідно до пункту «2.3», введіть зразок за хроматографічних умов пункту «2.2» і виміряйте площу піку. Результати Середні масові частки ехінацеазиду, цистанхеозиду А, вербаскозиду, ізоребаскозиду та 2′-ацетилвербаскозиду становили 1,83%, 0,21%, 2,34%, 0,13% і {{15 }}.68% відповідно, а RSDs становив 1,32 відповідно. %, 0.83%, 1.24%, 2.19%,

0.78%, що вказує на хорошу повторюваність методу.

2.5.3 Перевірка стабільності

Визначте стабільність того самого досліджуваного розчину (приготованого відповідно до «2.3») через 0, 2, 4, 8, 12, 24 та 48 годин, щоб отримати ехінацеазид, цистанхеозид А, вербаскозид та ізолебаскозид. , площа піку 2'-ацетилвербаскозиду, RSD становила 0.58%, 0.21%, 1,58%, 1,46%, 2,19% відповідно, що вказує на те, що досліджуваний розчин був стабільним протягом 48 годин.

2.5.4 Тест на відновлення зразка

Візьміть 1 г 6 зразків Cistanche deserticola з відомим вмістом і акуратно додайте певну кількість змішаного еталонного розчину (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg /мл, вербаскозид 2,17 мг/мл, ізолебаскозид 0.79 мг/мл, 2'-ацетил вербаскозид 0.91 мг/мл), додайте 70% метанолу, щоб отримати 50 мл, і ввести зразки відповідно до хроматографічних умов «2.2». Виміряні середні показники відновлення становлять 101,52%, 99,21% і 102,62% відповідно. , 98,62%, 97,36%, RSD становить 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13% відповідно, а коефіцієнт відновлення вибірки хороший.

Цистанхея — відома тонізуюча трава, яка може живити та захищати нирки. Згідно з теорією традиційної китайської медицини, цистанхе є найкращою травою для нирок. Цистанхе багата на ехінакозид, актеозид і флавоноїди. Ці ефективні інгредієнти цистанхе можуть зменшити апоптоз клітин нирок і збільшити проліферацію клітин нирок. Таким чином, цистанхе є природною добавкою для нирок.