Ефективність комбінованого лікування екстрактами ламінарії японської та цистанхе трубчастої для росту волосся
Mar 10, 2022
Контакт: emily.li@wecistanche.com
Kyungha Shin1# та ін
Оскільки останнім часом втрата волосся на шкірі голови почастішала навіть у молодих людей, що серйозно впливає на якість життя людейріст волосся-стимулюючу дію екстракту Laminaria japonica (LJE) іЦистанка трубчастаекстракту (КТР). Після підтвердження фази анагену фолікулів під голінням самцям мишей C57BL/6 на шкіру наносили 3% міноксидилу або перорально вводили комбінації LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)протягом 21 дня. Міноксидил сприяв відновленню волосся та збільшував активності -глутамілтранспептидази (-GTP) і лужної фосфатази (ALP). Крім того, міноксидил підвищує рівень епідермального фактора росту (EGF) і фактора росту ендотелію судин (VEGF). Спільне введення LJE і CTE（Цистанка трубчастаекстракт)при 54 мг/кг ЛЖЕ плюс 162 мг/кг, CTE (Цистанка трубчастаекстракт)чинить синергічний стимулюючий вплив на відростання волосся, порівнянний з 3-відсотковим міноксидилом. LJE переважно посилював активність ALP, тоді як CTE（Цистанка трубчастаекстракт)збільшили активність -GTP і ALP, а також експресію EGF і VEGF. Модель запалення повітряного мішка in vivo, судинна ексудація, спричинена карагенаном, і підвищені концентрації оксиду азоту та простагландину E2 в ексудатах були синергічно придушені спільним введенням LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт). Крім того, комбіноване лікування суттєво пригнічувало інфільтрацію запальних клітин. Результати свідчать про те, що комбіноване пероральне лікування з LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)невідповідні дози та співвідношення запобігають випаданню волосся та зменшують алопецію, яка може бути частково опосередкована їхньою протизапальною дією.
Ключові слова Ріст волосся, запалення, Laminaria japonica,Цистанка трубчаста, комбіноване лікування
Цистанка трубчастаекстракт має багато функцій
Останнім часом випадання волосся на голові почастішало навіть у молодих людей, що серйозно впливає на якість життя людини. Хоча облисіння не є проблемою здоров’я, воно може спричинити глибокий психологічно-незручний соціальний стрес. Тому представляє великий інтерес розробка нових профілактичних та/або терапевтичних матеріалів для випадіння та відростання волосся. Незважаючи на мільярдний ринок, наразі є кілька ефективних продуктів [1].
Волосяні фолікули перебудовуються під час циклічних періодів росту (анаген), регресії (катаген), спокою (телоген) і випадання (екзоген) [2]. Під час катагену багато фолікулярних клітин піддаються запрограмованій клітинній смерті (апоптоз) [3], зменшуючи розмір фолікула, коли фолікули потрапляють у телоген. Активація рідко циклічних епітеліальних стовбурових клітин, розташованих в області опуклості фолікулів, забезпечує регенерацію фолікулів на початку наступної фази анагену [4]. Потомство стовбурових клітин формує новий фолікулярний матрикс під час раннього анагену, а стрижень волосся та внутрішня коренева оболонка утворюються з цих відносно недиференційованих матриксних клітин [5]. Добре відомо, що розмір волосяного фолікула та тривалість фази анагену визначають розмір (діаметр) та довжину волосяного стрижня відповідно. Цей циклічний ріст волосся регулюється різними факторами росту.
Міноксидил, фінастерид і пропеція є комерційно доступними для уповільнення випадіння волосся та полегшення їх відростання. Міноксидил є судинорозширювальним засобом, який має побічну дію для полегшенняріст волосся[6], що може бути пов’язано з його діяльністю, що постачає поживні речовини та відкриває калієві канали [7,8]. Міноксидил ефективний при андрогенній алопеції, серед інших засобів лікування облисіння, хоча його ефективність зникає протягом кількох місяців після припинення лікування. Для порівняння, фінастерид і пропеція, препарати для лікування доброякісної гіперплазії передміхурової залози та раку передміхурової залози, зареєстровані в багатьох країнах для андрогенної алопеції (облисіння за чоловічим типом). Фінастерид і пропеція є синтетичними антиандрогенами, які інгібують 5- редуктазу типу II, фермент, який перетворює тестостерон на дигідротестостерон (ДГТ) у клітинах сосочка на дні волосяних фолікулів [9].
Laminaria japonica, Undaria pinnatifida і Cladosiphon okamuranus, широко поширені в багатьох країнах, тривалий час використовувалися як терапевтичні засоби в східній медицині. У попередніх дослідженнях фукоїдан, сульфатний полісахаридний комплекс, було виділено та ідентифіковано з морських водоростей і підтверджено його антиоксидантну, антикоагулянтну, протиракову та протизапальну дію [10,11]. Після цього було продемонстровано сприятливий вплив фукоїдану на запальні захворювання, ішемію, імунну дисфункцію та пухлини [12,13]. З іншої сторони,Цистанка трубчастаекстракт (CTE) також широко використовується для традиційних ліків у Китаї. CTE（Цистанка трубчастаекстракт)покращує кровообіг шляхом зниження рівня холестерину в крові [14]. Нещодавно було повідомлено, що CTE зменшує вироблення фактора некрозу пухлини (TNF-) та інтерлейкіну -4 (IL-4), які є основними факторами вироблення оксиду азоту (NO) у запальному шляху. [15]. Ми також продемонстрували, що фукоїдан з екстракту Laminaria japonica (LJE) і CTE（Цистанка трубчастаекстракт)синергічно послаблювало запалення in vitro та in vivo [16]. Слід зазначити, що було продемонстровано тісний зв’язок запалення шкіри (особливо слізної залози) з алопецією [17]. Таким чином, з’являються протизапальні аспекти лікування алопеції [18].
На основі покращення кровотоку та запалення ми досліджуємо комбіновану ефективність LJE та CTE（Цистанка трубчаста екстракт)наріст волоссяі основний(і) механізм(и), у порівнянні з 3% міноксидилом (Hyundai Pharmaceutical, Сеул, Корея), добре відомимріст волоссяпідсилювач.
Цистанка трубчастаекстракт корисний дляРіст волосся
Матеріали та методи
Матеріали
LJE і CTE (Цистанка трубчастаекстракт)були отримані від Misuba RTech Co., Ltd. (Асан, Корея). Висушений порошок Laminaria japonica екстрагували очищеною водою при 60oC протягом 24 годин, фільтрували через мембрану 0,45 мкм, дезінфікували та сушили розпиленням.Цистанка трубчастаекстрагували 80% етанолом, дезінфікували, концентрували та сушили. LJE і CTE (Цистанка трубчастаекстракт)зберігали при 4oC, змішували (1:3) і розчиняли в очищеній воді перед використанням і вводили перорально в об’ємі 5 мл/кг.
Тварини
Самці мишей C57BL/6 дляріст волоссяі мишей-самців ICR для дослідження запалення придбали в Daehan Biolink (Eumseong, Корея) і помістили в кімнату з постійними умовами навколишнього середовища (23±2ºC; 45-65% відносної вологості; 12-годинне світло - темний цикл; яскравість 150-300 люкс). Гранулований корм і очищена вода були доступні ad libitum. Усі експерименти на тваринах були схвалені Інституційним комітетом з догляду та використання тварин (IACUC) Національного університету Чунбук (CBNU), Корея, і проводилися відповідно до стандартних операційних процедур (SOP) Центру досліджень лабораторних тварин CBNU.
Лікування для росту волосся
Після підтвердження фази анагену шляхом спостереження за рівномірно-рожевим кольором шкіри спини мишей C57BL/6 (віком 6 тижнів, n=8/група) після стрижки у фазі телогену волосся було збрито [1,19]. ,20]. З наступного дня відбирали мишей без видимих подряпин і орально
застосовували ЛЖЕ (18 або 54 мг/кг), КТР (54 або 162 мг/кг) або їх суміш (18 плюс 54 або 54 плюс 162 мг/кг) один раз на день протягом 21 дня. Низькі дози ЛЖЕ (18 мг/кг) і КТР (54 мг/кг) були отримані з орієнтовних доз для людини 100 мг/тіло (70 кг) і 300 мг/тіло після трансляції площі поверхні маси тіла (Km{{14} } для людини/км=3 для миші) відповідно. Високі дози ЛЄ і КТР（Цистанка трубчастаекстракт)були встановлені в 3 рази, окремо або в комбінації, щоб оцінити максимальні синергічні ефекти [16]. Міноксидил (3 відсотки, 0,2 мл) місцево наносили один раз на день на поголену шкіру за тією ж схемою, що й лікування LJE/CTE.
Грубе спостереження за ростом волосся
Кожного 3--денного інтервалу після гоління та під час лікування мишам робили злегка анестезію діетиловим ефіром і робили фотографії їхніх спин. Співвідношення відростання волосся (зона відростання/поголена зона) на фотографіях аналізували за допомогою комп’ютеризованої системи аналізу зображень (Imageinside, Daejeon, Korea).
Мікроскопічне дослідження волосяних фолікулів
На 14-й і 21-й дні мишей умертвляли під глибоким наркозом діетиловим ефіром і з них видаляли спинну шкіру [1]. Спинну шкіру розрізали на дві частини. Фіксовані у формаліні, залиті парафіном зрізи тканини (діаметром 5 мкм) однієї частини фарбували гематоксилін-еозином для вивчення кількості волосяних фолікулів і гістологічних результатів. Іншу частину тканини заморожували в рідкому азоті для ферментного та імунологічного аналізу.
Дослідження активності ферментів
Тканини шкіри гомогенізували в 4 об'ємах фосфатного буфера (рН 7,4). Гомогенат центрифугували при 3,000 об/хв протягом 20 хв, а супернатант використовували для аналізу активності -глутамілтранспептидази (-GTP) і лужної фосфатази (ALP) з використанням п-нітрофенілфосфату (PNPP)-DEAV як підкладка [1,21].
Цистанка трубчаста
Кількісна оцінка факторів росту
Епідермальний фактор росту (EGF) і васкулярний ендотеліальний фактор росту (VEGF) кількісно визначали за допомогою наборів для твердофазного імуноферментного аналізу (ELISA) (R&D Systems, Міннеаполіс, США) відповідно до інструкцій виробника [1,22].
Лікування запалення
Мишам ICR (7 тижнів, n{1}}/групу) перорально вводили LJE (18 або 54 мг/кг), CTE（Цистанка трубчастаекстракт)(54 або 162 мг/кг), або їх суміші (18 плюс 54 або 54 плюс 162 мг/кг) 1 раз на добу протягом 7 днів [16]. У 1 добу ЛЄ і КТР（Цистанка трубчастаекстракт)лікування, мишам підшкірно вводили 10 мл стерильного повітря в спину для формування мішка [16,23,24]. Через 2 і 5 днів у мішечок повторно ввели 5 мл повітря. Через годину після фінального LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)лікування, 1 мл карагенану (1% у фізіологічному розчині; Sigma-Aldrich, Сент-Луїс, США) або його носій (фізіологічний розчин) вводили в пакет.
Аналіз ексудату
Повітряний мішок промивали 1 мл холодного фізіологічного розчину через 6 годин після ін’єкції карагенану, і реєстрували чистий об’єм промивної рідини [16]. Загальну кількість запальних клітин, включаючи нейтрофіли, моноцити та лімфоцити, визначали за допомогою лічильника Colter.
Концентрацію NO та простагландину E2 (PGE2) визначали за допомогою реактиву Griess (Sigma-Aldrich) та імуноферментного аналізу (EIA) за допомогою набору Correlate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, США) відповідно [16].
Статистичний аналіз
Дані представлені як середнє ± стандартна помилка. Статистичну значущість визначали за допомогою одностороннього дисперсійного аналізу з наступним тестом множинного порівняння Тьюкі. Р-значення<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">
Результати
Застосування еталонного матеріалу міноксидилу (3%) помітно полегшилоріст волоссямишей C57BL/6, демонструючи майже повне покриття (92,4 відсотка) поголеної зони (рисунки 1, 2B) порівняно з 29,2 відсотками нормального росту (рисунки 1, 2A) на 21 день. Хоча менш ефективний, ніж застосування міноксидилу , пероральне лікування ЛЖЕ також сприялоріст волосся, що призвело до 33,5 і 69,1 відсотка покриття при 18 і 54 мг/кг відповідно (рис. 1, 2C, 2D). CTE（Цистанка трубчастаекстракт)також був ефективним у посиленніріст волосся, досягаючи 73,6 і 80,4 відсотка охоплення при 54 і 162 мг/кг відповідно (рис. 1, 2E, 2F). Зокрема, комбінована терапія з високими дозами ЛЖЕ (54 мг/кг) і КТР（Цистанка трубчастаекстракт)(162 мг/кг) значно посиливріст волоссяпочинаючи з 12-го дня, можна порівняти з ефектом міноксидилу (рис. 1, 2Н), хоча низькі дози ЛЖЕ (18 мг/кг) і КТР（Цистанка трубчастаекстракт)(54 мг/кг) виявляють синергічний ефект лише на ранній фазі (рис. 1, 2G).
Рисунок 1. Хід відростання волосся у мишей, які отримували міноксидил або екстракт ламінарії японської (LJE) та/абоЦистанка трубчастаекстракт (КТР). ,
○нормальний; ● застосування міноксидилу (3 відсотки); △, 18 мг/кг ЛЖЕ; ▼, 54 мг/кг ЛЖЕ; □, 54 мг/кг КТР; ■, 162 мг/кг КТР; ◇, 18 мг/кг ЛЖЕ плюс 54 мг/кг КТР; ◆, 54 мг/кг ЛЖЕ плюс 162 мг/кг КТР（Цистанка трубчастаекстракт).
Рисунок 2. Репрезентативні загальні результати відростання волосся у мишей, які отримували міноксидил або екстракт ламінарії японської (LJE) та/абоЦистанка трубчаставитяг (КТР) на 21 день.
А, нормальний; B, застосування міноксидилу (3 відсотки); C, 18 мг/кг ЛЖЕ; D, 54 мг/кг ЛЖЕ; E, 54 мг/кг КТР（Цистанка трубчастаекстракт); F, 162 мг/кг КТР; G, 18 мг/кг LJE плюс 54 мг/кг CTE; H, 54 мг/кг ЛЖЕ плюс 162 мг/кг КТР（Цистанка трубчастаекстракт).
Порівняно зі звичайними волосяними фолікулами (Малюнок 3A), застосування міноксидилу покращило цілісність волосяних фолікулів, показавши більші фолікули та товщі волосяні стрижні (Малюнок 3B). Такі ефекти також були виявлені на шкірі мишей, які отримували LJE та/або CTE（Цистанка трубчастаекстракт)(Малюнки 3C-3H). Зокрема, ефективність зміцнення волосяних фолікулів при комбінованому лікуванні ЛЄ та КТР (Цистанка трубчастаекстракт)була порівнянна з міноксидилом.
Рисунок 3. Репрезентативні мікроскопічні результати відростання волосся у мишей, які отримували міноксидил або екстракт ламінарії японської (LJE) та/абоЦистанка трубчаставитяг (КТР) на 21 день.
А, нормальний; B, застосування міноксидилу (3 відсотки); C, 18 мг/кг ЛЖЕ; D, 54 мг/кг ЛЖЕ; E, 54 мг/кг КТР（Цистанка трубчастаекстракт); F, 162 мг/кг КТР（Цистанка трубчастаекстракт); G, 18 мг/кг LJE плюс 54 мг/кг CTE; H, 54 мг/кг ЛЖЕ плюс 162 мг/кг КТР
Застосування міноксидилу збільшило активність -GTP, який індукує волосяні фолікули до фази анагену, на 90-120 відсотків на 14 і 21 день порівняно з рівнем нормальної шкіри (рис. 4). LJE (54 мг/кг) також підвищував активність ферменту, хоча були високі варіації. КТР мав подібний ефект, значно підвищуючи активність -GTP на 14-й день. Цікаво, що комбіноване лікування ЛЄ та КТР（Цистанка трубчастаекстракт)додатково підвищив активність ферменту вище, ніж у випадку, коли екстракти використовувалися окремо.
Активність ЩФ, маркера росту кісток і ангіогенезу, значно зросла в шкірі на 14 і 21 день після місцевого застосування міноксидилу (рис. 5). LJE і CTE（Цистанка трубчастаекстракт)також підвищував активність ЩФ після перорального введення залежно від дози. Примітно, що активність ферменту була синергетично посилена комбінованою обробкою LJE та CTE.
Рисунок 4. Вплив міноксидилу (MXD, 3 відсотки) або екстракту ламінарії японської (LJE) та/абоЦистанка трубчастаекстракт (CTE) (у мг/кг) на активність -глутамілтранспептидази (-GTP) на 14 (A) і 21 (B) дні лікування.
*Значно відрізняється від нормального (Nor) контролю (P<>
Рисунок 5. Вплив міноксидилу (MXD, 3 відсотки) або екстракту ламінарії японської (LJE) та/абоЦистанка трубчастаекстракту (CTE) (в мг/кг) на активність лужної фосфатази (ALP) на 14 (A) і 21 (B) дні лікування.
*Значно відрізняється від нормального (Nor) контролю (P<>
При аналізі EGF добре відомаріст волоссяфактор, застосування міноксидилу підвищило рівень EGF у 3,5 рази порівняно з нормальним контролем на 14-й і 21-й дні (рис. 6). LJE (18 мг/кг) збільшив EGF лише на 21-й день, тоді як CTE (162 мг/кг) значно посилив його виробництво на 14-й та 21-й дні. Цікаво відзначити, що комбіноване лікування LE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)навіть при низьких дозах виявляли помітний синергічний ефект.
Лікування міноксидилом також підвищило рівень VEGF на 50-80 відсотків вище контрольного значення (рис. 7). Хоча LJE був неефективним, CTE (Цистанка трубчастаекстракт)виявляли чудові посилюючі ефекти. Крім того, комбінована терапія ЛЄ і КТР（Цистанка трубчастаекстракт)виявляли синергетичну активність на ранній фазі на 14 день.
Рисунок 6. Вплив міноксидилу (MXD, 3 відсотки) або екстракту ламінарії японської (LJE) та/абоЦистанка трубчастаекстракт (CTE) (у мг/кг) на вміст епідермального фактора росту (EGF) на 14 (A) і 21 (B) дні лікування.
*Значно відрізняється від нормального (Nor) контролю (P<>
Рисунок 7. Вплив міноксидилу (MXD, 3 відсотки) або екстракту ламінарії японської (LJE) та/абоЦистанка трубчастаекстракту (CTE) (в мг/кг) на вміст фактора росту судинного ендотелію (VEGF) на 14 (A) і 21 (B) дні лікування.
*Значно відрізняється від нормального (Nor) контролю (P<>
Ін’єкція карагенану в повітряний мішок миші ICR збільшила об’єм ексудату в мішечку в 6 разів порівняно з контрольним рівнем (Таблиця 1). Така підвищена ексудація була значно послаблена лікуванням LJE (18 і 54 мг/кг) або CTE（Цистанка трубчастаекстракт)(54 і 162 мг/кг). Примітно, що комбіноване лікування LJE та CTE додатково зменшило об’єм ексудату порівняно з окремими ефектами. Кількість запальних клітин була різко збільшена при ін’єкції карагенану: у 34,6, 4,2 і 24,9 разів контрольні рівні для нейтрофілів, моноцитів і лімфоцитів відповідно (таблиця 1). Однак LJE і CTE（Цистанка трубчастаекстракт)значно зменшив запальні клітини залежно від дози, при цьому LJE дещо перевершував CTE（Цистанка трубчастаекстракт). Очікувалося, що синергетичні ефекти в інфільтрації запальних клітин були досягнуті шляхом спільного введення LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт).
Паралельно із запальною клітинною інфільтрацією в мішку вміст NO та PGE2 у мішку також різко зріс після ін’єкції карагенану (табл. 1). У порівнянні з м'яким ефектом ЛЄ, КТР（Цистанка трубчастаекстракт)помітно знизив концентрацію NO. Комбіноване лікування ЛЄ та ХТР（Цистанка трубчастаекстракт)подальше зниження рівня NO залежно від дози. Подібним чином підвищений рівень PGE2 був синергічно пригнічений комбінованою терапією LJE та CTE (табл. 1).
Обговорення
Голова людини має в середньому 100000 волосяних фолікулів. Протягом життя кожен фолікул росте і випадає приблизно 20 разів, демонструючи щоденну втрату 100 пасом [25]. Випадання волосся, включаючи алопецію та облисіння, є тривожним станом для чоловіків і жінок, особливо в сучасному суспільстві. Тому дуже важливо розробити нові методи лікування, які запобігають випадінню волосся та посилюють його відростання. У цьому відношенні альтернативна медицина привернула інтерес дослідників.
Пов’язані зі старінням морфологічні, гістохімічні та біохімічні аспекти облисіння за чоловічим типом були виявлені серією досліджень на куксохвостих макак. Під час облисіння за чоловічим типом телогенова фаза була подовжена, а анагенова – вкорочена. Таким чином, вважається, що для зменшення випадіння волосся дуже важливо підтримувати подовження волосяного фолікула, яке відбувається від раннього до середнього анагену [26]. У цьому дослідженні ми продемонструвалиріст волосся-полегшення активності комбінованого лікування ЛЄ та КТР（Цистанка трубчастаекстракт). Найважливішим є те, що комбіноване призначення LJE (54 мг/кг) і CTE (162 мг/кг) продемонструвало чудову активність у відновленні росту волосся, незважаючи на пероральне введення екстрактів. Примітно, що ефект комбінованої терапії був порівнянний з ефектом шкірного нанесення високої концентрації (3 відсотки) очищеної сполуки міноксидилу, хоча концентрації активних інгредієнтів LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)на шкірі після прийому всередину не підтверджено.
У шкірі циклічної миші активність -GTP виражена під час анагену, але значно знижується під час телогену [27]. У шкірі фермент існує виключно у зовнішньому та внутрішньому кореневих оболонках волосяних фолікулів нижче рівня сальних залоз, у яких -GTP відсутній [27]. Для порівняння, ALP помітно експресується в волосисто-сальних одиницях, і активність збільшується в зоні відростання волосся. ALP як ангіогенний фактор покращує живлення дермальних сосочків і тим самим індукує товщину під час анагену [28]. Однак було підтверджено, що активність ЩФ знижується в шкірі з алопецією [21]. У дослідженні механізму еталонна сполука міноксидил помітно підвищувала активність -GTP і ALP, маючи на увазі, що міноксидил сприяєріст волоссяне тільки шляхом індукції волосяних фолікулів
до фази анагену, а також за рахунок покращення кровотоку через ангіогенез. Оскільки ЛЖЕ підвищує активність ЩФ, припускають, що ЛЖЕ виявляє сприятливий вплив наріст волоссязавдяки своєму ангіогенному потенціалу, згідно з попереднім дослідженням, фукоїдан, активний інгредієнт ЛЖЕ, має активність, що покращує кровотік [29]. Для порівняння, CTE（Цистанка трубчастаекстракт)посилив активність як -GTP, так і ALP, що свідчить про його вплив на індукцію фази анагену, а також на покращення кровотоку. Відповідно до синергічної дії на ферменти -GTP і ALP, вважається, що більшого відростання волосся можна досягти за допомогою спільного введення LJE і CTE（Цистанка трубчастаекстракт).
Добре відомо, що різноманітні цитокіни та фактори росту, включаючи EGF та VEGF, беруть участь у регуляції морфогенезу та росту волосся [30,31]. Цікаво відзначити, що фактори, отримані з клітин дермального сосочка, мають хемотаксичну дію на навколишні клітини, що, у свою чергу, призводить до сприянняріст волосся[32]. EGF експресується у зв’язку з розвитком волосяних фолікулів [33,34]. Хоча експресія як EGF, так і його рецептора (EGFR) у зовнішній кореневій оболонці знижується із завершенням росту фолікула, їх експресія відновлюється, коли фолікулярні клітини переходять у фазу анагену. VEGF відіграє важливу роль у ангіогенезі під час запальної реакції та розвитку пухлини [35]. Зокрема, судинна мережа тісно пов’язана з циклом росту волосся [36-38]. Таким чином, було підтверджено, що експресія гена VEGF змінюється відповідно до циклу волосся людини [39].
З результатів цього дослідження пояснюється, щоріст волоссяСтимулюючий ефект міноксидилу може бути пов’язаний з його потенційною активацією EGF і VEGF, які сприяють росту фолікулів, а також ангіогенезу. Хоча LJE не впливав на експресію VEGF, він підвищував вміст EGF у шкірі після перорального введення. Для порівняння, CTE（Цистанка трубчастаекстракт)був ефективним щодо експресії як EGF, так і VEGF. Зокрема, LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)чинили адитивний вплив на експресію факторів росту.
На додаток до подовження волосся, цілісність волосяних фолікулів була помітно покращена після лікування міноксидилом, LJE та/або CTE（Цистанка трубчастаекстракт)при мікроскопічному дослідженні. На ранній стадії випадіння волосся та облисіння у пацієнтів-людей і на тваринних моделях цілісність фолікулів була порушена, а товщина волосяного стрижня зменшувалася, тоді як фолікулярна цілісність і товщина стрижня відновлювалися у волоссі, що регенерує. Цікаво, що такі позитивні ефекти на цілісність і відростання компонентів волосся були досягнуті при пероральному прийомі LJE плюс CTE（Цистанка трубчастаекстракт), в якому ефект був порівнянний з ефектом місцевого застосування високої концентрації міноксидилу. Отже, очікується, що комбінація для перорального прийому LJE плюс CTE（Цистанка трубчастаекстракт)може бути рецептом відносно зручним порівняно з шкірним застосуванням міноксидилу.
У мишачій моделі алопеції інфільтрація чутливих до стероїдів лімфоцитів навколо волосяних фолікулів є звичайним явищем, демонструючи схему, подібну до імунотерапії алопеції людини із запаленням слізних залоз [17,40]. У цьому дослідженні запалення шкіри, викликане карагенаном, було помітно послаблено за допомогою LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)лікування; тобто судинна ексудація та запальна клітинна інфільтрація були синергічно пригнічені. У кількісному аналізі основні медіатори запалення NO та PGE 2 були значною мірою під контролем після перорального одночасного введення LJE та CTE (Цистанка трубчастаекстракт). Цікаво, що оскільки ЛЖЕ демонструє вищу протизапальну активність, ніж напівочищений фукоїдан [16], припускають, що крім фукоїдану в ЛЖЄ може міститися додатковий активний інгредієнт(и).
У сукупності результати вказують на те, що комбіноване пероральне лікування з LJE та CTE（Цистанка трубчастаекстракт)зменшує випадіння волосся шляхом активізації факторів росту та пов’язаних з ними активності ферментів, а також частково завдяки протизапальному потенціалу. Таким чином, пропонується комбінація, що включає LJE і CTE（Цистанка трубчастаекстракт)невідповідні клінічні дози та співвідношення можуть бути рецептом-кандидатом для пацієнтів із втратою волосся.
Цистанка трубчаставидобуток продуктів
Подяки
Це дослідження фінансово підтримали Відділ розвитку провідної промисловості для економічного регіону Офісу провідної промисловості Чхунчхон, Корейський інститут розвитку технологій (KIAT) і Міністерство економіки знань (MKE), а також частково Програма розвитку харчових технологій з високою доданою вартістю. , Міністерство сільського господарства, продовольства та сільських справ (MAFRA; номер гранту 113034-3).
Конфлікт інтересів
Автори заявляють, що для публікації цих результатів немає фінансового конфлікту інтересів.
З: «Ефективність комбінованого лікування екстрактами Laminaria japonica та Cistanche tubulosa для росту волосся»Kyungha Shin1# та ін
--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24
СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ
1. Кім Дж.С., Кан Б.С., Парк Х.Дж., Кім Д.Й., Хван С.Й., Нам С.Й., Юн Ю.В., Лі Б.Дж. Стимулювання ефекту сумішей трав’яних екстрактів на відростання волосся у мишей C3H/HeJ. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Паус Р., Коцареліс Г. Біологія волосяних фолікулів. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.
3. Коцареліс Г. Волосяний фолікул: вмирання заради уваги. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Коцареліс Г., Сан Т.Т., Лавкер Р.М. Клітини, що зберігають мітки, знаходяться в зоні опуклості волосисто-сальної одиниці: наслідки для фолікулярних стовбурових клітин, волосяного циклу та канцерогенезу шкіри. Осередок 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Морфогенез і оновлення волосяних фолікулів з дорослих мультипотентних стовбурових клітин. Cell 2001; 104(2): 233-245.
6. Бертон Дж. Л., Маршалл А. Гіпертрихоз через міноксидил. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Механізм дії вазодилатації, спричиненої міноксидил сульфатом: роль підвищеної проникності K plus. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.
8. Бул А.Е., Волдон Д.І., Бейкер К.А., Джонсон Г.А. Міноксидил сульфат є активним метаболітом, який стимулює волосяні фолікули. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. Кауфман К.Д., Даубер Р.П. Фінастерид, інгібітор альфа-редуктази типу 2 5, для лікування чоловіків з андрогенною алопецією. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.
10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Противірусні властивості фракцій фукоїдану з Leathesia difformis. Фітомедицина 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Потенційна антиоксидантна та антикоагулянтна здатність фракцій фукоїдану з низькою молекулярною масою, вилучених з Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Фукоїдан покращує нирковий кровотік на ранній стадії ниркової ішемії/реперфузійного ушкодження у щурів. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. Токсикологічна оцінка фукоїдану, вилученого з Laminaria japonica у щурів Wistar. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.
14. Шімода Х., Танака Дж., Такахара Ю., Такемото К., Шан С.Дж., Су М.Х. Гіпохолестеринемічні ефекти екстракту Cistanche tubulosa, китайської традиційної сировини, у мишей. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Інгібуюча дія актеозиду, виділеного з Cistanche tubulosa, на вивільнення хімічних медіаторів і продукцію запальних цитокінів клітинами RBL-2H3 і KU812. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Синергічні протизапальні ефекти фукоїдану Laminaria japonica та екстракту Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Асоціація запалення слізної залози з гніздовою алопецією. Орбіта 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. Нові аспекти лікування гніздової алопеції. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Хатторі М., Огава Х. Біохімічний аналізріст волоссяз аспектів старіння та активності ферментів. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.
20. Лі Ш., Лі Х.Дж., Бек І.Дж., Йон Дж.М., Нам С.Й., Лі Б.Дж., Юн Ю.В., Кім Ю.Б., Хван С.Й., Хонг Дж.Т. Вплив лосьйону для шкіри голови DREAMMO® наріст волоссяпросування в моделі алопеції мишей C57BL/6. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus R. Активність лужної фосфатази та локалізація під час циклу мишачого волосся. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Кросс MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. Передача сигналу рецептора VEGF. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Шин С, Чон Дж. Х., Парк Д., Джанг Дж. Й., Джу С. С., Хван Б. І., Чо С. Й., Кім Ю. Б. Протизапальні ефекти етанольного екстракту Angelica gigas у моделі запалення карагенан-повітряного мішка. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
24. Кім Д, Парк Д, Кюн Дж, Янг Ю.Х., Чой Е.К., Лі Ю.Б., Кім Х.К., Хван Б.І., Кім Ю.Б. Протизапальні ефекти суперкритичного екстракту Houttuynia cordata в моделі запалення каррагінано-повітряного мішка. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Ребора А. Патогенез андрогенної алопеції. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, нова суміш дляріст волоссяпросування моделей мишей in vitro та in vivo. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Використання активності гамма-глутамілтранспептидази як маркера циклу волосся та індукції анагену у волосяних фолікулах миші. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Хамада К., Сузукі К. Оцінка біохімічних показників як маркера циклу волосся у мишей C3H. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Сульфатований полісахарид фукоїдан стимулює остеогенну диференціацію людських жирових стовбурових клітин. Stem Cells Dev 2012; 21(12): 2204-2211.
30. Даниленко Д.М., Рінг Б.Д., Пірс Г.Ф. Фактори росту та цитокіни у розвитку та циклі волосяних фолікулів: нещодавні дані на тваринних моделях та потенціал для клінічної терапії. Mol Med Today 1996; 2(11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo сприяв росту волосяних фолікулів мишей шляхом контрольованого вивільнення факторів росту. Біоматеріали 2003; 24(13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Хемотаксична дія фактора, отриманого з клітин дермального сосочка, на клітини зовнішньої оболонки кореня. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Стенн К. С., Паус Р. Контроль циклу волосяних фолікулів. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH Вплив внутрішньошкірно введеного та місцевого епідермального фактора росту миші на ріст вовни, шкіру та вовняні фолікули мериносових овець. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Дворжак Х.Ф., Браун Л.Ф., Детмар М., Дворжак А.М. Фактор проникності судин/фактор росту ендотелію судин, гіперпроникність мікросудин і ангіогенез. Am J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Елліс Р. А., Моретті Г. Судинні структури, пов’язані з катагенними волосяними фолікулами шкіри голови людини. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Стенн К. С., Фернандес Л. А., Тіррелл С. Дж. Ангіогенні властивості волосяного фолікула вібриси щура пов'язані з цибулиною. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38 Яно К., Браун Л.Ф., Детмар М. Контрольріст волоссяі розмір фолікула за допомогою VEGF-опосередкованого ангіогенезу. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Distribution of VEGF mRNA indifferent hair follic stadies by fluorescence in situ hybridization in confocal laser microscopy. In: Hair Research for the Next Millennium (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Amsterdam, 1996; pp 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Успішне лікування випадіння волосся, подібного до алопеції, за допомогою контактного сенсибілізатора дибутилового ефіру квадратної кислоти (SADBE) у мишей C3H/HeJ. . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.