Вплив і механізм фенілетаноїдних глікозидів Cistanche на щурів з імунологічним фіброзом печінки

Контакт: Одрі Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Електронна пошта:audrey.hu@wecistanche.com

YOU Shu-ping1, ZHAO Jun2, MA Long1, Mukaram TUDIMAT1, ZHANG Shi-lei1, LIU Tao1
(1. Департамент токсикології, Коледж громадської охорони здоров’я, Сіньцзянський медичний університет, Урумчі 830011,
Китай; 2. Інститут Materia Medica, Синьцзян-Уйгурський автономний район, Урумчі 830004, Китай)

Анотація:

МЕТА Вивчити антифіброзну діюЦистанхефенілетаноїдні глікозиди(CPhG) у бичачому сироватковому альбуміні (BSA) – індукований фіброз печінки у щурів та його можливий механізм. МЕТОДИ: Сімдесят п’ять щурів SD були випадковим чином розділені на шість груп: нормальний контроль (оброблені дистильованою водою), модель (оброблені BSA), позитивний препарат [таблетки, оброблені BSA плюс склад Biejiarangan tablets (BJRG) 0.6 g・kg「'〕, і оброблені BSA плюс CPhG (0.125, {{10 }}.25 і 0.5 г-кг"1). У кожній групі було тринадцять щурів, які отримували BSA плюс CPhG (0.125, 0.25 і 0,5 г-кг'1) і дванадцять щурів в інших групах. Підшкірну ін'єкцію та ін'єкцію в хвостову вену імунітету BSA використовували для індукції моделі фіброзу печінки щурів. Тим часом щурам вводили різні терапевтичні препарати. Після експериментального періоду щурам перед введенням 10% хлоралгідрату голодували протягом 12 годин і негайно піддавали евтаназії. Печінку зважували для розрахунку печінкового індексу. ALP), загальний білок (TP) і альбумін (ALB) оцінювали на автоматичному біохімічному аналізаторі Mind-Ray. Щільність гідроксипроліну (HyP) у тканинах печінки визначали спектрофотометричним методом згідно з інструкцією kiVs. Гістопатологічні зміни та експресію колагенів типу I та III типу в тканинах печінки також визначали за допомогою імуногістохімічного фарбування. РЕЗУЛЬТАТИ Порівняно з нормальною контрольною групою, колагенові волокна тканин печінки в модельній групі подовжували свої ланки та огортали всю часточку, спричиняючи структурне пошкодження часточок та утворення псевдочасточок. Печінковий індекс (P<0.05), gpt,="" got,="" alp,="" tp,="" and="" alb="" serum="" levels=""><0.05), hyp="" content=""><0.01) were="" significantly="" increased,="" so="" was="" the="" expression="" of="" type="" i="" collagen="" and="" type="" iii=""><0.01) in="" the="" model="" group.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" various="" doses="" (0.125,="" 0.25="" and="" 0.5="" g="" •="" kg"1)="" of="" cphg="" significantly="" reduced="" the="" bsa-induced="" elevation="" of="" the="" liver="" index="" gpt,="" got,="" alp,="" tp,="" and="" alb="" serum="" levels=""><0.05), and="" hyp="" content=""><0.01) the="" morphology="" of="" the="" pathological="" tissue="" sections="" was="" close="" to="" that="" of="" the="" normal="" control="" group,="" and="" cphg="" significantly="" reduced="" the="" expression="" of="" two="" types="" of="" collagens=""><0.01). conclusion:="" cphg="" can="" significantly="" reduce="" the="" degree="" of="" bsa-induced="" liver="" fibrosis="" in="" rats.="" the="" mechanism="" may="" be="" associated="" with="" the="" down-regulation="" of="" two="" types="" of="" collagens="" and="" suppression="" of="" the="" activation="" of="" hepatic="" stellate="">

Ключові слова: Цистанхе; фенілетаноїдні глікозиди; фіброз печінки; бичачий сироватковий альбумін; типу колагену

Цистанхефенілетаноїдні глікозиди

ЦистанхеРослина (Cistanche) є відомим і цінним китайським ліками. Завдяки його точному цілющому ефекту та м’яким лікувальним властивостям його з давніх часів вважали сильним і поживним китайським ліками та користуються репутацією «женьшеню пустелі». В останні роки,Цистанхепривернув увагу людей своєю чудовою біологічною активністю. Це показали хіміко-фармакологічні дослідженняЦистанхефенілетаноїдні глікозиди(ЦФГ) є однією з основних матеріальних основ лікувальної дії цистанхеї]. CPhG має різноманітні біологічні дії, такі як антиоксидантна, антидепресивна, протизапальна, противірусна, протипухлинна, антибактеріальна та імунна регуляція]. Пітер вперше виявив у 1989 році, що сполука CPhG ехінакозид має значний захисний ефект на печінку, і згодом пробудив інтерес людей до досліджень CPhG проти фіброзу печінки. Попередні дослідження цієї дослідницької групи виявили, що екстракти соковитих стебелЦистанхемають хороший захист печінки та гепатопротекцію проти моделей імунного ураження печінки in vitro та клітинних моделей HepG2.2.15. Ефект проти вірусу гепатиту B, але конкретний механізм інгібування CPhG фіброзу печінки та специфічний механізм проти фіброзу печінки ще не зрозумілий. У цьому дослідженні щурам підшкірно та в хвостову вену вводили бичачий сироватковий альбумін (бичачий сироватковий альбумін, BSA) для підготовки моделі імунного фіброзу печінки, оцінки ступеня ураження печінки та фіброзу та вивчення впливу CPhG на захист печінки та анти- фіброз печінки. Можливий механізм дії.

1 Матеріал і методи

1.1 Реактиви та прилади.

Свіжі м'ясисті стеблаЦистанхе(C. tubulosa) 6.0кг 70% етанолу кип’ятили зі зворотним холодильником 3 рази, кожні 3 години, і екстракти об’єднували. АВ. 8 Смолу очищали для отримання екстрактів фенілетаноїдних глікозидів, а саме CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) сполуки, які були ідентифіковані як CPhG дослідником з Інституту фармацевтичних досліджень Синьцзян-Уйгурського автономного району Чжао Цзюнем за допомогою високоефективної рідинно-фазної хроматографії з чистотою 70 відсотків. Використовуйте 0.5% натрію карбоксиметилцелюлози (CMC-Na), щоб сформувати ліки в різних концентраціях, і зберігайте його в холодильнику при 4 градусах для подальшого використання. Compound Biejia-range tablets (таблетки Compound Biejia-range tablets, BJRG) (Inner Mongolia Furui Technology Co., Ltd., номер партії: 20131006), BSA (продукт американської компанії Sigma, CAS: 9048-46.8, імпортний) з оригінальною упаковкою), ланолін (Shanghai Yuanye Biological Technology Co., Ltd.), рідкий парафін (Tianjin Fuyu Fine Chemical Co., Ltd.), фосфатний буферний розчин [Fisher Biochemical Products (Beijing) Co., Ltd., номер партії : NZD1132]. Реагент для виявлення гідроксипроліну печінкової тканини (Hyp) (Nanjing Jiancheng Institute of Bioengineering, номер партії: 20140526), ​​кроляче анти-колагенове антитіло типу 1 0,2 мл (американська компанія Abcain, номер партії: 140619), кроляче анти-колагенове антитіло типу 11 {{ 20}} мл (компанія China Bioss, номер партії: 98O788W). Інкубатор постійної температури з електричним нагріванням (Shanghai Yixie Technology Co., Ltd.), паровий стерилізатор вертикального тиску (Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Medical Equipment Factory), L-530 центрифуга з кількома пробірками (Changsha Xiangyi) Centrifuge Instrument Co., Ltd.), автоматичний біохімічний аналізатор (Mindray, серійний номер: A086A0182), хемілюмінесцентний аналізатор (Tiger Technology, серійний номер: mp2808).

1.2 Тварини, підготовка моделі та введення

Самці здорових щурів SD, клас SPF, маса тіла {{0}} г, надані Експериментальним центром тварин Медичного університету Синьцзяна, номер ліцензії на виробництво тварин SCXK (нова) 2011.{{13 }}004. Номер ліцензії SPF на використання лабораторних тварин: SYXK (нова) 2011-0004, годівля в контрольованих умовах навколишнього середовища (25 градусів і 12 годин світло/темрява), щури вільно їдять і п’ють, їх годують стандартними гранулами та використовують після регулярного годування протягом 3 дні. Усі відповідні процедури для експериментів на тваринах були схвалені Комітетом з етики тварин Першої клінічної афілійованої лікарні Сіньцзянського медичного університету. 75 щурів SD були випадковим чином розділені на 6 груп, а саме групу нормального контролю, групу моделі, BJRG позитивну контрольну групу препарату (0,6 г·кг), CPhG 0,125, 0,25 і 0,5 г·кг. У групі CPhG по 13 тварин, а в інших – по 12 тварин. Зверніться до інструкцій щодо препарату, щоб встановити співвідношення еквівалентної дози перетворення площі поверхні тіла між людиною та щуром, щоб встановити дозу контрольної групи позитивного препарату BJRG. Для CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) дози, зверніться до літератури [8] та попередніх експериментальних результатів. На додаток до звичайної контрольної групи, щури використовували Zhu Qigui et al. . Методи Була підготовлена ​​модель імунного фіброзу печінки. Модель була розділена на фазу сенсибілізації та фазу атаки хвостової вени. Стадія сенсибілізації: на додаток до нормальної контрольної групи, щурам у кожній групі вводили 0,5 мл нормального фізіологічного розчину. Щурам в інших групах проводили багатоточкову SC з BSA 9 г·л неповного ад’юванта Фрейнда, 0.5 мл кожного разу, загалом 5 разів. Інтервал між першими 2 ін’єкціями становив 14 днів, а між останніми 3 ін’єкціями – 7 днів. Через тиждень після останньої сенсибілізуючої ін’єкції відбирали кров із внутрішньоочного венозного сплетення кожного щура та виявляли сироваткові антитіла щурів проти BSA методом двонаправленої дифузії. Стадія нападу: як модельна група, так і група введення, щури з позитивними антитілами продовжували вводити BSA у хвостову вену двічі на тиждень протягом 5 тижнів. Ін'єкційну дозу поступово збільшують від 2 мл до 4 мл; нормальна контрольна група отримує фізіологічний розчин для ін’єкцій хвостової вени. Дозування: модель вводять у встановленій дозі ig в один і той же час (групі порожнього контролю та групі моделі ig дають дистильовану воду) один раз на день; після того, як модель завершена, лікування продовжується протягом 4 тижнів, кожен раз H1, а експериментальний період становить 15 тижнів загалом.

1.3 Визначення печінкового індексу

Кожна група голодувала протягом 24 годин після останнього ig (вода не може допомогти), зважували та приносили в жертву вивих шийки матки. Відбирали печінку, кров на поверхні органу промокали фільтрувальним папером, зрізали жир і мезангій, а потім зважували. Печінковий індекс. Індекс печінки=якість органу (г)/f цієї якості (г) × 1O0.

1.4 Фарбування за Массоном для спостереження фіброзу печінки. Усі щури брали тканину печінки з одного місця, фіксували 10 відсотками параформальдегіду, заливали в звичайний парафін, розрізали та фарбували Массоном і спостерігали за гістологічними змінами під мікроскопом. Класифікація фіброзу печінки поділяється на 5 ступенів з посиланням на літературу [10]. Ступінь 0: відсутність фіброзу; Ступінь I: волокниста сполучна тканина обмежена портальною ділянкою або портальна ділянка збільшена і має тенденцію до розвитку в напрямку до часточок; Ступінь ¨: фіброзна гіперплазія сполучної тканини, більше 2/3 часточок і супроводжується змінами I ступеня; Сичуаньський ступінь: волокниста сполучна тканина проникає в печінкові часточки навколо центральної вени; lV ступінь: волокниста сполучна тканина має множинні дифузні гіперплазії по всій часточці з утворенням псевдочасточки та змінами III ступеня.

1.5 Визначення біохімічних показників сироватки крові

Щурів у кожній групі голодували (без води) протягом 24 годин після останнього введення, зважували та брали кров після анестезії пентобарбіталом натрію (30 мг·кг, внутрішньовенно) і центрифугували при 12000xg протягом 10 хвилин. Відокремте сироватку та використовуйте автоматичний біохімічний аналізатор для виявлення сироваткової глутаміно-піровиноградної трансферази (GPT), глутаміно-щавелевооцтової трансферази (GOT), лужної фосфатази (ALP), загального білка (TP) і білка. Вміст білка (альбуміну, ALB).

1.6 Визначення вмісту гідроксипроліну в гомогенаті тканини печінки

Точно зважте 0.1 г (сира маса) тканини печінки та помістіть її в пробірку, точно додайте 1 мл гідролізату та добре перемішайте. Суворо дотримуйтесь інструкцій щодо роботи тест-системи HyP для визначення вмісту HyP тканини печінки.

1.7 Імуногістохімічний метод визначення експресії колагену фіброзу печінкової тканини типу 1 і типу 3

Зрізи тканин спостерігали за допомогою біологічного мікроскопа Nikon DIGITALSIGHTDS-Fi2, а систему мікроскопів K12320 використовували для вибору чіткого поля зору при малому та великому збільшенні. Фотографія. Використовуючи програмне забезпечення для аналізу кольорових зображень Motic Med6.0CMlAS, збільште у 200 разів за допомогою системи камери мікроскопа, для кожного поля випадковим чином вибирається 3 поля зору, а для кожного поля зору випадковим чином вибирається 5 областей розміром 2 см x 3 см. Колаген типу I та сичуаньського типу є імуногістохімічно позитивними. Продукт реакції — коричнево-жовте дрібне зернисте забарвлення в цитоплазмі, і вимірюється середнє значення поглинання. Чим більше значення, тим вищий вміст колагену I та II типу в тканині. Формула розрахунку: значення поглинання=площа колагену (см) / площа тканини печінки (см).

1.8 Статистичний аналіз

Використовуйте статистичне програмне забезпечення SPSS16.0 для статистичного аналізу, а дані експериментальних результатів представлено X_S; порівняння середніх середніх між кількома групами використовує дисперсійний односторонній дисперсійний аналіз, а попарне порівняння вибіркових середніх кількох груп використовує метод LSD для статистики. Науковий аналіз із використанням аналізу Ridit для впорядкованих даних класифікації з рівнем перевірки =0.05

2 результати

2.1 Вплив етанольного екстракту Cistanche на масу тіла та індекс печінки щурів, індукованих BSA-індукованим фіброзом печінки

Це видно з таблиці 1. Порівняно з нормальною контрольною групою маса тіла модельної групи була зменшена, а індекс печінки зріс (PO05); порівняно з модельною групою група BJRG і CPhG 0.125, 0.25 і 0,5 г-кг'1 групи були більшими Вага мишей зросла, а печінковий індекс знизився ( П<0.05), indicating="" that="" the="" liver="" cells="" of="" the="" rats="" were="" damaged="" after="" the="" injection="" of="" bsa,="" and="">(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) має певну захисну дію на ураження печінки щурів.

2.2. Вплив етанольного екстракту цистанхе на фіброз печінки у щурів із фіброзом печінки, індукованим BSA

На малюнку 1 видно, що тканина печінки щурів у нормальній контрольній групі є нормальною, запальної клітинної інфільтрації не спостерігається, структура печінкової часточки є інтактною та чіткою, клітини печінки розподілені у формі шнура, є немає нерегулярної синусоїди, а портальна площа не збільшена. У модельної групи щурів спостерігається фіброз III-IV ступеня, коли колагенові волокна розширюються та з’єднуються, оточуючи цілі печінкові часточки, руйнуючи структуру нормальних печінкових часточок і утворюючи псевдочасточки, але переважно великі псевдочасточки. Позитивний препарат групи BJRG і CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) група мала значні терапевтичні ефекти, а патологічні зрізи тканини показали, що морфологія була в основному подібною до нормальної контрольної групи.

Відповідно до стандартної оцінки фіброзу печінки за фарбуванням за Массоном, порівняно з групою Shao Quchang, ступінь фіброзу модельної печінки значно збільшився (P<0.01); the="" degree="" of="" liver="" fibrosis="" in="" the="" positive="" drug="" bjrg="" group="" and="" cphg="" 0.125,="" 0.25="" and="" 0.5="" g-kg="" 1="" group="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.01) ridit="" analysis="" showed="" that="" cphg="" has="" a="" preventive="" and="" therapeutic="" effect="" on="" immune="" liver="" fibrosis="" (table="">

2.3 Вплив етанольного екстракту цистанхе на функцію печінки щурів з індукованим BSA фіброзом печінки

Таблиця 3 показує, що порівняно з нормальною контрольною групою сироваткові активності GPT, GOT та ALP та вміст TP у модельній групі значно зросли (P

Таб.1 Ефект відЦистанхефенілетаноїдні глікозиди(CPhG) на масу тіла та індекс печінки у фіброзу печінки щурів, викликаного бичачим сироватковим альбуміном (BSA)

2.4 Вплив екстракту етанолу Cistanche на вміст HyP у тканині печінки щурів з фіброзом печінки, індукованим BSA

Результати в таблиці 4 показують, що порівняно з нормальною контрольною групою вміст HyP у тканині печінки модельної групи був значно підвищений (PO.01); порівняно з модельною групою, вміст HyP у CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) становила {{0}}.125, 0.25 і 0,5 gk мінна група, а група BJRG була значно зменшена ( P<0.05,><0.01)o shows="" that="" cphg="" reduces="" the="" extracellular="" matrix="" (extracellular="" matrix,="" ecm)="" deposition="" in="" the="">

2.5. Вплив етанолового екстракту кореня кореневища на експресію колагену типу I та типу III у тканинах печінки щурів з фіброзом печінки, індукованим BSA

Таблиця 5 показує, що порівняно з нормальною контрольною групою експресія колагену типу I та III типу в тканині печінки модельної групи була підвищеною (P<0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" positive="" animal="" bjrg="" group="" and="" cphg="" 0.125,="" 0.25="" and="" 0.5="" g-="" the="" expression="" of="" type="" i="" and="" type="" iii="" collagen="" in="" the="" liver="" tissue="" of="" the="" kg-1="" group="" decreased=""><0.05,><0.01), and="" the="" cphg="" 0.5="" g•kg"1="" group="" was="" the="" most="" significant.="" it="" showed="" that="" cphg="" can="" prevent="" liver="" fibrosis="" in="" rats="" and="" the="" therapeutic="" effect="" can="" reduce="" the="" proliferation="" of="" collagen="" fibers="" in="" rats,="" which="" is="" consistent="" with="" the="" observation="" results="" of="" liver="" tissue="">

3 Обговорення

Liver fibrosis is a process of damage and repair after repeated or chronic liver damage. It is mainly related to chronic inflammation and the chemical factors that cause chronic liver damage. It has become a world medical problem with high morbidity and mortality. Most of the various liver diseases eventually develop into advanced liver cirrhosis through liver fibrosis, which becomes the main cause of death from liver disease. In this study, a rat model of BSA-immune liver fibrosis was used. After BSA-immunized rats were injected with BSA through tail vein attacks 10 times, their liver tissue structure was severely damaged, inflammatory cells were infiltrated, and the fibrous septum composed of collagen fibers was in or Has formed. According to reports, liver fibrosis caused by BSA immune damage is closer to liver fibrosis caused by clinical chronic hepatitis and is suitable for liver fibrosis caused by antigen-antibody complex reaction, prevention and treatment, and screening of traditional Chinese medicine. According to research, fibrosis can be >260 d".

Результати цього дослідження з використанням моделі імунного фіброзу печінки, індукованого BSA у щурів, узгоджуються зі звітами Ming Zhijun та ін. та Zhang Guiling та ін., припускаючи, що це дослідження успішно відтворило модель імунного фіброзу печінки. CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) втручання може знизити рівні GPT, GOT, ALP, TP та ALB у сироватці крові та продемонструвати ефекти проти фіброзу печінки. Довготривале застосування ХФГ не спричинить негативного впливу на функцію печінки.

Результати цього дослідження показують, що профілактичне призначення ХФГ(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) лікування може ефективно пригнічувати процес фіброзу печінки та зменшувати ступінь захворювання, а покращення стає більш очевидним зі збільшенням дози. Це свідчить про те, що CPhG має кращий ефект профілактики та лікування фіброзу печінки, що еквівалентно впливу групи позитивного контролю BJRG.

Liver fibrosis is also the central link in the development of liver cirrhosis. According to reports, cytokines are involved in the formation of portal hypertension and liver fibrosis. The salient feature of liver fibrosis is that the synthesis and degradation of type I and III collagen and hyaluronic acid (hyaluronic acid) are out of balance, which leads to ECM deposition, especially related to the deposition of type I and III collagen ⑶, accounting for the total amount of ECM>80 відсотків o Співвідношення колагену типу I до колагену типу III у нормальній ECM печінки становить 1; коли фіброз печінки, внутрішньопечінковий колаген збільшується більш ніж у 5-7 разів, колаген типу III зазвичай виникає на ранній стадії фіброзу, а принцип клею типу I - на пізній стадії фіброзу. Збільшення є найбільш значним, тому проліферація колагену I і III типу позитивно корелює зі ступенем фіброзу печінки. Фіброз печінки є динамічним процесом дисбалансу синтезу та деградації ЕСМ. Це дослідження виявило, що CPhG зменшує відкладення ECM у печінці, що додатково вказує на те, що CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) має профілактичну та лікувальну дію при експериментальному фіброзі печінки.

Використання імуногістохімії для виявлення змін у вмісті колагену I та III типів печінкової тканини може об’єктивно та безпосередньо спостерігати терапевтичний ефект CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) проти фіброзу печінки. Це дослідження показало, що колаген I і III типу в тканині печінки щурів при CPhG(Цистанхефенілетаноїдні глікозиди) група була знайдена лише навколо центральної вени та портальної області. Фарбування було зменшеним і неглибоким, і воно було ниткоподібним. Імуногістохімічне фарбування було слабко позитивним, що свідчить про те, що CPhG може зменшити вироблення колагену. Механізм інгібування процесу фіброзу печінки може полягати в інгібуванні активації печінкових зірчастих клітин і зниженні синтезу ECM, таким чином надаючи антифіброзний ефект.

Таким чином, механізм дії CPhG проти фіброзу печінки щурів може полягати в інгібуванні вироблення колагену, сприянні деградації колагену та зниженні вмісту колагену та HyP у тканинах печінки щурів із фіброзом печінки, тим самим пригнічуючи синтез ECM та анти- фіброз печінки. Роль хімії та конкретний механізм дії все ще потребують глибокого вивчення.

посилання:

[1] Лі І, Сон Ю, штаб-квартира Чжан. Досягнення в дослідженні хімічних складових і лікувальної дії цистанхеї. Chin Wild Plant ResouK China Wild Plant Resources), 2010, 29(1):7-12.

[2]Liu GK, Tu PF, Yang TX, Gao Q. Processing in biology research ofЦистанхеtubulosa(Шенк) Р. Вайт[J]. Mod Chin Med (Сучасна китайська медицина), 2015, 17(4): 400-405.

[3]Ma H, Yin RX, Guo M, BaoY, Cui ZH, Li G. ВпливCistanche deserticolaполісахаридів на експресію CREB у модельних мишей старіння, індукованого D-галактозою [J]. Форма Tradit Med підборіддя J Exp

[4] Chen HY, Hao CQ, Guo HY, Leng XH. Хід досліджень розробки та застосуванняЦистанхелікувальні ресурси [J ]. Значення E/g (值工程), 2012, 31(3):303-30

[5] Чжао В, Пан Ю.Н. Досягнення в дослідженні [5]фармакологічної активності фенілетаноїдних глікозидів у Cistanche [J]. Asia-Pacific Tradit Med (Азіатсько-Тихоокеанська традиційна медицина), 2013, 9(5):77-79.

[6] Gao XX, Chen J, Peng YL. Ситуація дослідження фармакологічних ефектів полісахаридів Cistanche deserticola [J]. Food Deg, 2015, 17(2):136-139.

[7] Чжао Дж, Лю Т, Ма Л, Янь М, Чжао І, Гу З та ін. Захисний ефект актеозиду на імунологічне пошкодження печінки, спричинене Bacillus Calmette-Guerin плюс ліпополісахарид [J]. Planta Med, 2009, 75 (14): 1463-1469.

[8] Шімода Х., Танака Дж., Такахара Й., Такемото К., Шан С.Дж., Су М.Х. Гіпохолестеринемічний ефектЦистанхеекстракт tubulosa, традиційний китайський необроблений препарат, у мишей [J]. Am J Chin Med, 2009, 37(6): 1125-1138.

[9] Xu Y, Liu W, Fang B, Gao S, Yan J. Artesunate полегшує фіброз печінки, індукований бичачим сироватковим альбуміном у щурів, шляхом регулювання матриксних металопротеїназ [J]. Eur J Pharmacol, 2014, 744:1-9.

[10] Tsai JH, Liu JY, Wu TT, Ho PC, Huang CY, Shyu JC та ін. Вплив силімарину на вирішення фіброзу печінки, індукованого чотирихлористим вуглецем у щурів [J]. J Viral Hepat, 2008, 15 (7): 508-514.

[11] Коен-Нафталі М., Фрідман С.Л. Сучасний стан нових антифіброзних методів лікування пацієнтів із хронічним захворюванням печінки [J]. Ther Adv Gastroenterol, 2011, 4 (6):391-417.

[12] Пуче JE, Saiman Y, Friedman SL. Зірчасті клітини печінки та фіброз печінки]. Compr Physiol, 2013, 3 (4): 1473-1492.

[13]Hernandez-Gea V, Friedman SL. Pathogenesis of liverfibrosis[J]. >4nnu/7evPa^o/, 2011, 6: 425-456.