Ехінакозид покращує діабетичне ураження печінки
Mar 28, 2022
Контакти:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Ло Ян, Сян Чжан, Мін Ляо, Ярон Хао *
АНОТАЦІЯ
Цілі:Ехінакозид (ECH) — природна сполука, видобута зі стебла рослини Cistanche deserticola, має значні біологічні властивості, включаючи антиоксидантні, протизапальні, нейропротекторні, протипухлинні, гепатопротекторні та імуномодулюючі властивості. У цьому дослідженні ми мали на меті вивчити захисні ефекти та механізми ECH на діабетичне ураження печінки у мишей DB/DB.
Основні методи:Загалом, 6-тижневих мишей DB/DB (n=20) випадковим чином розподілили на 2 групи: групу діабетичної моделі (група DB/DB, внутрішньошлункове введення фізіологічного розчину, n=10 ) і група, оброблена ECH (DB/DB плюс група ECH, n=10). Крім того, нормальна контрольна група включала 6-тижневих мишей db/m (група db/m, внутрішньошлункове введення звичайного фізіологічного розчину, n=10). ECH вводили один раз на день протягом 10 тижнів. Вага та рівень глюкози в крові натщесерце (FBG) вимірювали кожні два тижні. Фарбування HE та фарбування Oil O використовували для оцінки патологічних змін тканини печінки та накопичення ліпідів відповідно. Для виявлення експресії компонентів сигнальної осі AMPK/SIRT1 використовували імунофлуоресцентне фарбування, вестерн-блот і аналіз RT-PCR.
Ключові висновки:Результати показали, що прийом ехінакозиду протягом 10 тижнів може значно покращити пошкодження печінки та інсулінорезистентність у мишей DB/DB (p < 0.01).="" крім="" того,="" лікування="" ехінакозидом="" сприяло="" зниженню="" ліпідів="" крові="" та="" глюкози="" крові="" (p="">< 0,01).="" крім="" того,="" ech="" активує="" передачу="" сигналів="" ampk/sirt1,="" активований="" гамма-коактиватор="" 1="" альфа="" рецептора,="" що="" активується="" проліфератором="" пероксисом="" (pgc-1),="" рецептор,="" що="" активується="" проліфератором="" (ppar),="" карнітинпальмітоілтрансфераза-1a="" (cpt1a)="" у="" мишей="" db/db="" (p=""><>
Значення:Ефект ECH може бути викликаний активацією шляху AMPK/SIRT1 печінки та його низхідних факторів для покращення ожиріння, резистентності до інсуліну та дисліпідемії.
cistanche redditпокращуєожиріння, резистентність до інсуліну та дисліпідемія.
1. Введення
Цукровий діабет 2 типу (ЦД 2) є хронічним захворюванням обміну речовин і серйозною загрозою для фізичного та психічного здоров’я людини. Це може спричинити пошкодження багатьох органів, у тому числі ураження печінки. Неалкогольна жирова хвороба печінки (НАЖХП) є найпоширенішим ураженням печінки [1,2]. Надмірне накопичення ліпідів у гепатоцитах порушує метаболічний процес і викликає запалення, фіброз печінки і навіть рак печінки [3,4]. Патогенез захворювання залишається неясним. Незважаючи на високу поширеність клінічно значущих ускладнень печінки у пацієнтів із ЦД 2 типу, їх часто не помічають під час лікування. Серед засобів, які в даний час використовуються для лікування діабету, є метформін, похідні сульфонілсечовини, тіазолідиндіон (ТЗД) та інгібітори дипептидилпептидази-4 (DPP-4). Однак більшість із цих агентів спричиняють дисфункцію печінки і не рекомендуються пацієнтам із печінковою недостатністю, що означає необхідність досліджувати агенти з терапевтичною ефективністю та низьким профілем побічних ефектів. Дослідження продемонстрували антиоксидантні, протизапальні, протипухлинні, гепатопротекторні та імуномодулюючі властивості ехінакозиду (ECH), основного компонента Cistanche deserticola [5]. Крім того, шлях AMP-активованої протеїнкінази (AMPK) був визнаний основним перемикачем метаболізму клітинної енергії, пов’язаним з регуляцією ліпідів у печінці, і терапевтичною мішенню для NAFLD. AMPK посилює активність регуляторного протеїну глушіння ссавців-1(SIRT1), підвищуючи клітинні рівні НАД плюс, що призводить до деацетилювання та модуляції активності наступних мішеней SIRT1, які включають рецептор-коактиватор 1, що активується проліфератором пероксисом (PGC{ {20}} ) [6]. Через багато позитивних функцій як при алкогольній жировій хворобі печінки (AFLD), так і при NAFLD, SIRT1 широко вивчався серед сімейства SIRT. Білок є ключовим регулятором метаболізму ліпідів і глюкози і може покращувати чутливість печінки та інших тканин до інсуліну та зменшувати стеатоз печінки [7]. PPAR-належить до PPARs, підродини рецепторів ядерних гормонів, PPAR-покращує метаболізм ліпідів через мітохондріальне та пероксидазне бета-окислення жирних кислот, опосередковане через CPT1A. Миші Db/DB є мишами з діабетом 2 типу зі спонтанним ожирінням. У міру дорослішання цих мишей можуть спостерігатися поступові прояви діабетичних станів, таких як булімія, ожиріння, явна гіперглікемія, гіперліпідемія та резистентність до інсуліну [8]. Патогенез подібний до того, що спостерігається у хворих на ЦД2. У цьому дослідженні висунуто гіпотезу про терапевтичний ефект ECH на ураження печінки, спричинене цукровим діабетом 2 типу, і опосередкування цього ефекту шляхом активації шляху AMPK/SIRT1 та його ефекторів, що знаходяться нижче. Мишей DB/DB використовували як модель ураження печінки T2DM, і ECH вводили внутрішньошлунково.
2. Матеріали та методи
2.1. Піддослідні тварини
Печінка мишей DB/DB з діабетом 2 типу вважалася моделлю для спонтанного ураження печінки T2DM, мишей db/m використовували як контрольну групу, а мишей з діабетом db/db використовували як модельну групу та групу лікування ECH (самці). , віком 6 тижнів, клас SPF) з 10 мишами в кожній групі. Усі миші були придбані в Нанкінському університеті (Нанкінський інститут біомедицини, Китай; номер сертифікату тваринництва: SCKK (Su) 2015–0001). Тварин (n=5 на клітку) містили в центральній лабораторній кімнаті для тварин лікарні Реньмінь університету Ухань (SPF) за стандартних умов температури (22 ◦C ± 2 ◦C), відносної вологості (60 відсотків) , і цикл світло/темрява (12 годин/12 годин) з довільним доступом до питної води та корму протягом експериментального періоду 10 тижнів. Експерименти проводилися відповідно до інструкцій з етики експериментальних тварин, рекомендованих лікарнею Реньмінь університету Ухань.
2.2. Основні прилади та реактиви
Глюкометр OneTouch Ultra і тест-смужки для визначення рівня глюкози в крові (LifeScan Inc., Johnson & Johnson); кроляче антилюдське моноклональне антитіло SIRT-1 (#9475; CST Company Сполучених Штатів); AMPK (Ab80039), p-AMPK (Ab23875), PGC-1 (Ab54481), PPAR- (Ab8934) і GAPDH (Ab37168; усі від компанії Abcam); CPT1A (15184-1-AP; Wuhan Sanying Biotechnology Co., Ltd); Набір для визначення концентрації білка BCA (Biyuntian Biotechnology Co., Ltd.); Набір для приготування гелю SDS-PAGE (Google Biotechnology Co., Ltd.); та набір для зворотної транскрипції RT-PCR (Takara, Японія).
2.3. Групування та адміністрування тварин
Перед початком експерименту {{0}}тижневих мишей помістили на карантин протягом 1 тижня та годували адаптовано протягом 1 тижня. Db/DB мишей пронумерували випадковим чином і віднесли до групи діабетичної моделі (група db/db, n=10) або до групи, що отримувала ехінакозид (db/db плюс група ECH, n =10), і 10 db/m мишей віднесли до нормальної контрольної групи (DB/m група, n=10). У віці 8 тижнів мишам нормальної контрольної та модельної групи з діабетом внутрішньошлунково вводили фізіологічний розчин (0,05 мл/10 г), а групі мишей, які отримували ECH, внутрішньошлунково вводили 300 мг/кг/день ECH. Протягом цього періоду мишам дозволяли ad libitum доступ до їжі та води протягом 10 тижнів.
2.4. Загальний стан і рівень глюкози в крові натще
Під час експерименту спостерігали за станом здоров'я, споживанням їжі та питної води, блиском шерсті. Починаючи з першого тижня експерименту, кожні 2 тижні вимірювали масу тіла мишей. Зразки крові для визначення рівня глюкози в крові натще було взято з хвостової вени. Після 10-тижневого лікування ЕХГ було проведено пероральний тест на толерантність до глюкози (ОГТТ). Після нічного голодування мишам давали глюкозу (2 г/кг маси тіла), а концентрацію глюкози в крові оцінювали до (0 хв.) і через 15, 30, 60 і 120 хв після введення глюкози. Площу під кривою (AUC) визначали за допомогою GraphPad Prism 7.0.
2.5. Колекція зразків
Після 10 тижнів втручання, їжу, але не воду, відмовляли протягом 12 годин, тварин анестезували для отримання зразків крові з ретроорбітального сплетення. Сироватку від зібраної крові швидко відокремлювали та зберігали при –80 ◦C для визначення біохімічного показника. Після отримання зразків крові мишей вбивали та перфузували фізіологічним розчином. Печінку розрізали і зважували. Індекс печінки (LI) розраховували за такою формулою: LI=[маса печінки (г)/маса тіла (г)] × 100 відсотків. Частину свіжої тканини печінки зберігали для патологічного аналізу, а решту тканини печінки поміщали в рідкий азот на 1 годину, а потім зберігали при -80 ◦C для подальшого виявлення білка та кількісної полімеразної ланцюгової реакції в реальному часі ( ПЛР).
cistanche досвідекстракт
2.6. Патогістологічне дослідження печінки
Свіжу тканину печінки швидко відокремлювали, і зріз фіксували в 4% параформальдегіді протягом 24 годин з подальшим зневодненням і заливанням у парафін. Зрізи депарафінізували ксилолом і повторно гідратували через градієнт етанолу у воду. Ядро і цитоплазму фарбували гематоксиліном і еозином (HE) і запечатували нейтральною смолою після зневоднення. В іншій частині тканини використовували зрізи суміші з оптимальною температурою різання (OTC) для фарбування Oil Red-O.
2.7. Визначення біохімічних показників сироватки крові та тканини печінки
Зразки сироватки були надіслані в лабораторне відділення лікарні Женьмінь університету Ухань для автоматизованого біохімічного аналізу. Ліпідні показники крові включали тригліцериди (ТГ), загальний холестерин (ХС), холестерин ліпопротеїнів високої щільності (ХС-ЛПВЩ), холестерин ліпопротеїнів низької щільності (ХС-ЛПНЩ). Індекси функції печінки включали глутамінопіровиноградну трансаміназу (АЛТ) і глутамінооксалооцтову трансаміназу (АСТ). Рівні інсуліну натщесерце (FINS) визначали за допомогою набору ELISA (Meimian Biological Inc., Китай). Стандартну криву будували на основі концентрації стандартного зразка та оптичної густини (ОП); концентрацію зразка потім розраховували за стандартною кривою. Нарешті, індекс чутливості до інсуліну (ISI) та індекс резистентності до інсуліну (HOMA-IR) розраховували таким чином: ISI=1/(FPG × FINS); HOMA-IR=FPG × FINS/22,5.
2.8. Експресії AMPK, p-AMPK, SIRT-1, PGC-1, PPAR- та CPT1A у тканині печінки були виявлені за допомогою вестерн-блоттингу
Заморожену тканину печінки розрізали на шматочки. Для загальної екстракції білка 1 мл лізату RIPA додавали до зрізу масою 50 г і центрифугували при 13,000 об/хв при 4 ◦C протягом 5 хвилин, після чого відбирали супернатант. Концентрацію білка визначали за допомогою набору для визначення концентрації білка BCA. З кожної групи було відібрано приблизно 40 мкг білка та перенесено на мембрану з полівініліденфториду (PVDF). Мембрани мітили зазначеними вторинними антитілами при кімнатній температурі протягом 1 год і проявляли. Були проаналізовані значення сірого для кожної білкової смуги, і GAPDH використовувався як внутрішній еталон для напівкількісного аналізу.
2.9. Експресії p-AMPK і SIRT1 в тканині печінки були виявлені за допомогою імунофлуоресцентного фарбування
Тканини печінки фіксували в 4-відсотковому параформальдегіді, заливали в парафін, а потім розрізали на шматочки печінки товщиною 10- мкм. Додайте 3% BSA на 30 хв. Інкубуйте слайди з первинними антитілами протягом ночі при 4 ◦C. Покрийте об’єктивну тканину вторинним антитілом, інкубуйте при кімнатній температурі протягом 50 хвилин у темному місці. Потім інкубувати з розчином DAPI при кімнатній температурі протягом 10 хв, зберігаючи в темному місці. Додайте реагент для гасіння спонтанної флуоресценції для інкубації протягом 5 хв. Мікроскопічне виявлення та збір зображень за допомогою флуоресцентної мікроскопії.
2.10. Експресії мРНК SIRT-1, PGC-1, PPAR- і CPT1A в тканині печінки були виявлені за допомогою RT-PCR
Використовували приблизно 100 мг тканини печінки, що зберігалася при -80 ◦C, з кожної групи. Тотальну РНК екстрагували за допомогою набору Trizol; метод ультрафіолетового (УФ) поглинання використовувався для визначення якості РНК, і ця РНК потім була зворотно транскрибована в кДНК. SYBR green qPCR проводили на системі виявлення ПЛР у реальному часі Bio-Rad CFX96 Touch (Bio-Rad Laboratories, Геркулес, Каліфорнія, США). Послідовності праймерів SIRT-1, PGC-1, PPAR- і CPT1A були розроблені за допомогою програмного забезпечення Primer Premier5.0 і синтезовані компанією Wuhan Seville Biotechnology Co., Ltd., з використанням гена економки GAPDH як внутрішнє посилання. Умови ампліфікації були такими: попередня денатурація при 95 ◦C, денатурація при 95 ◦C і відпал при 60 ◦C (30 с), загалом 40 циклів. Наприкінці реакції визначали специфічність ПЛР-ампліфікації за допомогою аналізу кривої розчинення, зчитували значення Ct і розраховували відносну експресію мРНК цільового гена методом 2-ΔΔCt. Послідовності праймерів наведені в таблиці 1.
2.11. Статистичні методи
Для обробки даних і статистичного аналізу використовувалося статистичне програмне забезпечення SPSS22.0, а для малювання – GraphPad Prism7.0. Нормально розподілені дані представлені як середнє ± стандартне відхилення (дисперсія x ± s). Попарне порівняння між групами проводили за допомогою однофакторного дисперсійного аналізу. Значущість відмінностей між групами визначали за допомогою тесту найменш значущих відмінностей (LSD) (однорідність дисперсій) або t-критерію Даннетта (неоднорідність) для множинних порівнянь. Якщо дані не відповідали нормальному розподілу, використовували медіану та квартильну різницю, а також непараметричний критерій (критерій Крускала-Уолліса). Значення AP<0.05 was="" considered="" statistically="">
Cistanche чоловічі перевагидлянирка
3. Результати
3.1. ECH покращує загальний стан здоров'я та LI db/db мишей
Протягом усього експерименту миші групи db/m були здоровими та активними та демонстрували блискучу шерсть. Миші групи db/db продемонстрували надмірне споживання води та корму, ожиріння, млявість та сутулість, а також грубе темне волосся. У порівнянні з мишами групи db/db миші групи db/db плюс ECH продемонстрували покращені умови в усіх дослідженнях. Крім того, їхня маса тіла та індекс печінки були нижчими, ніж у модельної групи мишей з діабетом (P < 0.05)="" (таблиця="">
Таблиця 1. Кількісні ПЛР-праймери RT-флуоресценції.
Таблиця 2 Маса тіла, волога маса печінки та печінковий індекс у мишей кожної групи.
3.2. ECH знижує рівень глюкози в крові натще та резистентність до інсуліну, а також підвищує толерантність до глюкози та чутливість до інсуліну у db/db мишей
У ході експерименту, порівняно з групою db/m, рівень глюкози в крові натще в групі db/db значно збільшився (P< 0.01)="" (fig.="" 1a).="" in="" contrast,="" blood="" glucose="" decreased,="" and="" glucose="" tolerance="" and="" insulin="" sensitivity="" improved="" in="" the="" db/db="" +="" ech="" group="" (p="">< 0.01)="" (fig.="" 1b,="">
3.3. ECH покращує структурні порушення печінки та полегшує патологічні зміни, такі як накопичення ліпідів у db/db мишей
Фарбування HE показало, що розмір і морфологія гепатоцитів у групі db/m були нормальними, а структура печінкових часточок і синусоїдів була чіткою. Спостерігалася велика дегенерація гепатоцитів у групі db/db, збільшення об’єму гепатоцитів, зміна розміру ядра, фокальний клітинний некроз та запальна клітинна інфільтрація в портальній зоні. У групі db/db плюс ECH спостерігалося суттєве зниження кількості крапель ліпідів і запальних клітин, зменшення некротичного пошкодження клітин (рис. 2A). Мікроскопічний аналіз тканини печінки, забарвленої масляним червоним O, виявив акуратне розташування клітин без крапель ліпідів або патологічних змін у групі db/m. У групі db/db клітини мали безладне розташування, а в цитоплазмі була присутня велика кількість жирових частинок різного розміру. У порівнянні з групою db/db кількість крапель ліпідів у групі db/db плюс ECH була значно нижчою, що свідчить про можливий захисний ефект ECH на печінку (рис. 2B, C).
Рис. 1. ECH покращує толерантність до глюкози та послаблює інсулінорезистентність мишей db/db.
3.4. ECH покращує ліпідний обмін і функцію печінки у db/db мишей
Порівняно з групою db/m рівень ліпідів крові TC, TG і LDL значно підвищився, а HDL значно знизився в групі db/db (P < {{0}}.{{4}="" }1).="" однак="" рівні="" ох,="" тг="" і="" лпнщ="" були="" знижені,="" а="" рівень="" лпвщ="" підвищився="" в="" групі="" db/db="" плюс="" ech="" порівняно="" з="" групою="" db/db="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0.01)="" (рис.="" 3a).="" порівняно="" з="" групою="" db/m,="" рівні="" alt="" і="" ast="" були="" значно="" підвищені="" в="" групі="" db/db="" (p=""><0,05, p=""><0,01). рівні="" аст="" і="" алт="" були="" значно="" нижчими="" в="" групі="" db/db="" плюс="" ech,="" ніж="" у="" групі="" db/db="" (p=""><0,05, p=""><0,01) (рис.="" 3b,="">
Рис. 2. ЕХГ послаблює структурні порушення печінкової тканини та накопичення ліпідів у мишей з НАЖХП.
3.5. Вплив ECH на активацію шляху AMPK/SIRT1 у різних групах мишей
Відповідно до результатів вестерн-блоту, порівняно з групою db/m, рівні білка p-AMPK/AMPK, SIRT1, PGC-1, PPAR- і CPT1A у тканині печінки були значно нижчими в групі db/db ( P < 0.01).="" однак="" рівні="" білка="" були="" значно="" вищими="" в="" групі="" db/db="" плюс="" ech,="" ніж="" у="" групі="" db/db="" (p=""><0,01) (рис.="" 4a,="" b).="" крім="" того,="" імунофлуоресцентне="" фарбування="" показало,="" що="" експресія="" p-ampk="" і="" sirt1="" явно="" була="" виявлена="" в="" тканині="" печінки="" мишей,="" які="" отримували="" ech,="" ніж="" у="" групі="" db/db="" (рис.="">
3.6. Вплив ехінакозиду на експресію мРНК шляху SIRT1 у печінці різних груп мишей
Згідно з результатами RT-PCR, рівні SIRT1, PGC-1, PPAR- і CPT1A значно знизилися в групі db/db порівняно з групою db/m. Однак ці рівні значно зросли в групі db/db плюс ECH порівняно з групою db/db (рис. 5).
Рис. 3. Сироватково-залежні індекси у мишей кожної групи.
4. Обговорення
Діабет є серйозною проблемою медицини у світі, і очікується, що до 2035 року кількість людей з діабетом зросте приблизно до 592 мільйонів [9]. Рівень поширеності діабету, переважно ЦД 2 типу, у Китаї демонструє тенденцію до значного зростання [10,11]. Існує складний взаємозв’язок між ЦД 2 типу та захворюваннями печінки, а НАЖХП, що характеризується надмірним відкладенням жиру в печінці, є найпоширенішим ураженням печінки, спричиненим ЦД 2 типу, і найчастішим хронічним захворюванням печінки у світі [12, 13]. Дослідження клінічного генетичного тестування свідчать про те, що ген, пов’язаний із цукровим діабетом 2 типу, пов’язаний із збільшенням ІМТ, гіперхолестеринемією та зниженням холестерину ЛПВЩ, що підвищує ризик НАЖХП [14]. НАЖХП тісно пов’язана з резистентністю до інсуліну та дисліпідемією, тому дуже поширена у пацієнтів із ЦД 2 типу та/або ожирінням. Хоча кілька метаболічних факторів пов’язані з розвитком НАЖХП, його патогенез залишається в основному неясним і складним [15]. Cistanche deserticola — багаторічна рослина-паразит, що росте на коренях піщаних рослин. Відповідно до Китайської фармакопеї, Cistanche deserticola використовується як традиційний засіб для лікування захворювань нирок і безпліддя [16,17]. В останні роки дослідження підтвердили, що Cistanche deserticola може суттєво пригнічувати підвищення рівня глюкози в крові натще та після прийому їжі у мишей з діабетом, покращувати резистентність до інсуліну та дисліпідемію, а також сприяти втраті ваги [18]. Як основний компонент Cistanche deserticola, очікується, що ECH сприятиме подальшому покращенню ураження печінки, пов’язаного з ЦД. Результати наших експериментів показали, що ожиріння та діабет можуть спричинити ураження печінки у мишей, що характеризується значним підвищенням рівнів АЛТ та АСТ у сироватці крові та типовими гістопатологічними змінами. ECH значно знизив LI та глюкозу в крові, знизив рівень TC, TG та LDL, підвищив рівень HDL та покращив чутливість до інсуліну. Патогістологічне дослідження виявило зменшення дегенерації стеатозу гепатоцитів і запальної клітинної інфільтрації у мишей, які отримували ECH, підтверджуючи, що агент може покращити пошкодження печінки у мишей із ожирінням і діабетом.
AMPK є висококонсервативною протеїнкіназою, широко поширеною в організмах і називається рецептором енергетичного метаболізму. Він відіграє певну роль у полегшенні окисного стресу, запалення, проліферації та апоптозу [19]. Активація ферменту непрямими активаторами привертає наукову увагу до лікування діабету, ожиріння, раку та інших пов’язаних метаболічних розладів [20,21]. Він може регулювати метаболізм ліпідів за допомогою кількох підходів, таких як інгібування синтезу жирних кислот і тригліцеридів, інгібування синтезу холестерину та сприяння окисленню та розкладанню жирних кислот [22]. У печінці AMPK регулює ліпідний обмін шляхом фосфорилювання.
Коли внутрішньоклітинне співвідношення АМФ до АТФ збільшується, АМФК активується, збільшуючи р-АМФК/АМФК і посилюючи регуляцію експресії SIRT1 за рахунок збільшення клітинних рівнів NAD плюс [23,24]. Нещодавно було показано, що SIRT1, НАД-залежна деацетилаза, пов’язана з патофізіологією НАЖХП [25]. Фермент бере участь у різних клітинних фізіологічних процесах, таких як гомеостаз ліпідів і глюкози та чутливість до інсуліну, і є ключовим регулятором метаболізму [26]. Пацієнти з ожирінням, особливо з інсулінорезистентністю, діабетом і НАЖХП, мають нижчі рівні SIRT1 [27,28]. Прайс та ін. досліджували роль SIRT1 у профілактиці стеатозу печінки та виявили, що експресія SIRT1 знижена у пацієнтів з НАЖХП [29]. Інші дослідження показали, що гепатоцит-специфічний нокаут SIRT1 може зменшити окислення жирних кислот і викликати стеатоз і запалення в печінці, тоді як надмірна експресія SIRT1 може покращити метаболізм ліпідів через PGC-1 шлях [30]. SIRT1 регулює активність PGC-1, і обидва вони мають вирішальне значення для підтримки гомеостазу клітинної енергії. Таким чином, SIRT1 і низхідні фактори PGC-1 можуть бути основною мішенню ураження печінки. Коактиватор PGC – це білок, який може зв’язуватися з факторами транскрипції або ядерними рецепторами для підвищення транскрипційної активності [31]. Більшість факторів транскрипції потребують коактиваторів, особливо PPAR-, переважно в окислених тканинах, таких як печінка, міокард і скелетні м’язи. Він може активувати транскрипцію генів, що сприяє транспорту та окисленню жирних кислот, виробництву кетонів і глюконеогенезу [32,33]. CPT1A є ключовим ферментом, що обмежує швидкість окислення жирних кислот. Його експресія регулюється складними транскрипційними механізмами, що включають кілька факторів транскрипції та коактиваторів, включаючи SIRT1, PGC-1 і PPAR [34]. У цьому дослідженні ми виявили, що при високій концентрації глюкози в крові в групі db/db накопичення ліпідів у гепатоцитах збільшувалося зі зниженою регуляцією нижніх факторів експресії сигнального шляху AMPK/SIRT1; у групі, що отримувала ECH, експресії p AMPK/AMPK, SIRT1 і PGC-1 були значно збільшені, а експресії нижніх факторів PPAR і CPT1A були значно збільшені, що вказує на те, що сигнальна вісь AMPK/SIRT1 і її нижні фактори відіграють корисну роль у лікуванні діабетичного ураження печінки (рис. 6). Однак наведені тут дані базувалися на експериментах in vivo; таким чином, необхідні додаткові дослідження in vitro, щоб підтвердити вплив ECH на сигнальні шляхи AMPK/SIRT1 і ефекторні білки.
Загалом, ECH може регулювати метаболізм глюкози в крові та ліпідів, регулюючи експресію AMPK/SIRT1 та його низхідних факторів, таким чином покращуючи діабетичне ураження печінки.
ECH cistancheможерегулюють рівень глюкози в кровііліпідний обмін.