Визначення загального вмісту сапонінів у Boschniakia Rossica та Herba Cistanches методом спектрофотометрії Ⅰ

Анотація:

Мета Цей кількісний метод встановлено загальної кількості сапонінів у Boschniakia rossica таHerba cistanchesі зміствизначається загальна кількість сапонінів. Методи В якості контрольної речовини було обрано салідрозид, кольорову реакцію використовували з ваніліном і хлорною кислотою. Потім спектрофотометрично визначали вміст загальних сапонінів у Boschniakia rossica та Herba cistanches при 523 нм. Ｒрезультати. Крива салідрозиду була лінійною в діапазоні 0. 05133 - 0． 2567 мг·мл－ 1 з кореляцією 0． 9992, а рівняння лінійної регресії було Y=1. 611X + 0． 0573． Для Boschniakia rossica середнє виділення салідрозиду становило 99. 68% з ＲSD 1． 68% (n=6); а для відстаней Herba середнє відновлення салідрозиду становило 101. 18% з ＲSD 0． 94% (n=6). Висновок Метод точний, простий і надійний. Тому його можна використовувати для визначення загального вмісту сапонінів у Boschniakia rossica та Herba cistanches．

Ключові слова:Бошнякия російська;Трави цистанші; Загальні сапоніни; рішучість; спектрофотометрія; Салідрозид

СКІЛЬКИ ЧАСУ ДІЄ CISTANCHE?

Cistanche deserticola Y． C. Ma і Bosehniakia rossica Fedtseh et Flerov — паразитичні лікарські рослини, що належать до родини Orobanchiaceae. Cistanche deserticola — рослина-паразит, що живе на коренях Haloxylon ammodendron, дерева пустелі. В основному його виробляють у Сіньцзяні та Лізі Альша, Внутрішня Монголія. Відомий як «женьшень пустелі» через низьку врожайність і високу лікувальну цінність. Grasshopper [1] виробляється на північному сході моєї країни [2]. Згідно з фольклором, вона має ефект безсмертя, тому її називають північно-східною «травою вічного віку». Застосовується при імпотенції внаслідок ниркової недостатності, холодних болях у попереку і колінах, сухості кишечника, запорах. Він може живити та зміцнювати організм, затримувати старіння та є справжнім лікарським ресурсом на північному сході [3]. Обидва мають схожі ефекти, і обидва мають ефекти тонізування нирок, посилення ян, зволоження кишечника та проносне [4]. Відповідно до записів про Cistanche deserticola в «Компендіумі медичної матерії» Лі Шичжень часів династії Мін: «Ця речовина є тонізуючою, але не різкою, тому її називають заспокійливою. Її рідко можна отримати з Конґронга, тому вона наповнена Cistanche deserticola». Таким чином, цистанхе пустельний колись використовувався як альтернативний лікарський матеріал для цистанхе пустерної. Сучасні дослідження показали, що і Cistanche deserticola, і Estuary deserticola мають такі фармакологічні ефекти, як омолодження [5, 6], зниження втоми [7, 8], покращення імунної функції [9, 10] і покращення пам’яті [{{ 12}}].

Вміст загальних глікозидів у підосичнику та цистанки пустерної має значення для поглибленого вивчення. Обидва містять сапоніни, фітонциди, цукри, амінокислоти та інші компоненти. Вчені повідомили про порівняльні дослідження компонентів летких олій, цукрів, амінокислот та інших компонентів цих двох компонентів [4, 14, 15], але визначення загального вмісту глікозидів у цих двох повідомлень у літературі не було. . Основними компонентами Cistanche deserticola є фенілпропаноїдні глікозиди (серії глюкозидів A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K) [16], а Cistanche deserticola — фенілетаноїдні глікозиди (ряд Cistanche deserticola). )[17,18], сапоніни обох подібні, і вони мають подібний компонент, салідрозид. Ми вважаємо, що глікозиди є важливими активними інгредієнтами обох, і ми досліджуємо використання спектрофотометрії для визначення загального вмісту глікозидів. , створити теоретичну базу для подальшого розвитку та використання ресурсів Echinacea deserticola та Cistanche deserticola.

1 Матеріали та інструменти

1. 1 Матеріал і реактиви: Амарант лікарський, зібраний з околиць гори Чанбай, визначений як рослина родини Оробанових

Висушену цілу рослину Orobanche coerulescens, промийте зразок і злийте воду

Відокремте, помістіть у камеру для сушіння при постійній температурі при 40 градусах, висушіть до постійної ваги, подрібніть, пропустіть через сито 40 меш і підготуйте

[19]; Cistanche deserticola, Hohhot Enhe Trading Co., Ltd., внесена до списку

Cistanche deserticola Y． В'ялене м'ясо C. Ma

Стебла, промиті, висушені на повітрі, висушені до постійної ваги, подрібнені, пропущені через 40-сітчасте сито, відкладені; червоний

Еталонна речовина крассузид (надається Китайським інститутом фармацевтичних і біологічних продуктів, номер партії 110818

- 200404, для визначення вмісту); всі використані експериментальні реактиви вітчизняного виробництва.

1. 2 УФ-видимий спектрофотометр Instruments 752N (Shanghai Jingke); Ту-1901 пара

Променевий ультрафіолетовий спектрофотометр (Beijing Puxi General Co., Ltd.); електронні аналітичні ваги

AL104 1/100,000 (Mettler-Toledo Instrument Shanghai Co., Ltd.); FW-80

Високошвидкісна універсальна дробарка (Shandong Hualu Electric Heating Instrument Co., Ltd.).

2 методи

2. 1 Приготування розчину порівняння

Використовуйте аналітичні ваги для точного зважування салідрозиду 15. 40мг, розчиніть у метанолі, перенесіть у 25-мірну колбу та доведіть об’єм до позначки. Підготуйте до вмісту 0.0% салідрозиду на мл. Розчин 616 мг використовується як розчин порівняння і герметично зберігається в холодильнику для подальшого використання.

2. 2 Приготування досліджуваного розчину

Використовуйте аналітичні ваги для точного зважування лікарських порошків підосичника та цистанки пустерної. 2. 0g, помістіть його в круглодонну колбу, додайте 40 мл 90% етанолу, нагрійте та екстракціюйте зі зворотним холодильником Grasshopper один раз, нагрійте та кип’ятіть із зворотним холодильником Cistanche deserticola двічі, час кожної екстракції становить 1,5 години, після відсмоктування, об’єднайте фільтрат, сконцентруйте насухо на водяній бані, додайте 25 мл води для розчинення, екстрагуйте 3 рази петролейним ефіром, по 25 мл кожного разу, видаліть рідину петролейного ефіру у верхньому шарі, а потім продовжуйте екстрагувати 3 рази з водонасиченим н-бутанолом. 25 мл кожного разу, з’єднайте три екстракти н-бутанолу, випаріть рідкий н-бутанол на водяній бані у витяжній шафі, розведіть його метанолом у мірній колбі на 10 мл, добре перемішайте, потім точно відміряйте 1 мл розчину та розбавте його метанолу до об'єму 25 мл. пляшку, добре перемішайте та використовуйте його як тестовий розчин для подальшого використання.

2. 3. Вибір довжини хвилі вимірювання

1. Помістіть 25 мл розчину порівняння та досліджуваного розчину в градуйовані пробірки з пробками, випаріть розчинник метанол у водяній бані з постійною температурою при 60 градусів і додайте 0. 2 мл 5% розчину ваніліну з крижаною оцтовою кислотою і 0,8 мл розчину хлорної кислоти реагували на водяній бані при 60° протягом 15 хв. Вийміть пробірку й негайно охолодіть її крижаною водою протягом 5 хв. Додайте 5 мл крижаної оцтової кислоти та добре струсіть [20]. Таким же чином готують розчин порівняння з використанням метанолу. Розчин після прояву кольору піддавали скануванню за довжиною хвилі, і максимальна довжина хвилі поглинання 523 нм після кольорової реакції салідрозиду була обрана між 400 і 800 нм як довжина хвилі вимірювання загальних глікозидів Escherichia coli та Cistanche deserticola. Шаблони сканування контрольної речовини та досліджуваної речовини показані на малюнку 1.

2. 4. Дослідження лінійної залежності: піпеткою точно намалюйте еталонний розчин 0. 5,1. 0,

1. 5,2． 0,2． 5 мл поміщали в закупорені пробірки, пронумеровані цифрами від 1 до 5, і кольорову реакцію проводили відповідно до кроків у «2.3». Пустий експеримент проводили з метанолом у паралельних умовах, і абсорбцію вимірювали на довжині хвилі 523 нм. Оптична щільність A (Y ) – по осі ординат, концентрація мг·мл-1

(X) — абсциса, виконується лінійна регресія, а рівняння регресії — Y {{0}}. 611X +0. 0573 (r=0. 9992), результат показує, що масова концентрація салідрозиду дорівнює 0. Лінійна залежність хороша в діапазоні 05133-0.2567 мг·мл-1. Результати показано на малюнку 2.

2. 5 Тест на стабільність

Точно відміряйте відповідну кількість досліджуваного розчину Grasshopper і Cistanche deserticola, виявіть колір відповідно до методу, описаного в пункті 2.3, і рівномірно виміряйте значення абсорбції 6 разів протягом 30 хвилин. Це показує, що протягом 30 хвилин після прояву забарвлення Grasshopper і Cistanche deserticola будуть. Стабільність досліджуваного розчину є відносно хорошою. Результати наведені в таблиці 1.

2. 6 Випробування на точність

Точно відміряйте відповідну кількість розчину порівняння, виявіть колір відповідно до методу, описаного в пункті «2.3» вище, і виміряйте абсорбцію 6 разів безперервно. Результати наведено в таблиці 2. Результати показують, що точність цього експериментального приладу хороша.

Рисунок 1. Тонкошарові сканувальні шаблони еталонної речовини салідрозиду (A), тестового розчину коника (B) і тестового розчину Cistanche deserticola (C)

2. 7. Тест на повторюваність.

Точно зважте 6 порцій порошку підосичника та цистанка десертного, кожна порція містить 2, 0 г, після нагрівання та екстрагування із зворотним холодильником із застосуванням оптимального процесу екстракції, який був визначений, виконайте кроки під «2, 3» та виміряйте поглинання на довжині хвилі 523 нм. Результати вимірювань наведені в таблиці 3 і таблиці 4.

2. 8. Тест на швидкість відновлення вибірки.

Точно зважте 6 зразків коника та цистанчі пустирної з відомим масовим відсотком загальних глікозидів. Кожен зразок становить 12 мг. Акуратно додайте 2 мл розчину порівняння салідрозиду. Виконайте «2. 2». Витягніть зразок під пунктом, визначте загальний вміст глікозидів після прояву забарвлення згідно з пунктом «2.3» та обчисліть швидкість відновлення зразка. Результати наведено в таблиці 5 і таблиці 6.