Полісахариди Cistanche Deserticola послаблюють діабетичну нефропатію у мишей, впливаючи на кишкову флору та інгібуючи сигнальний шлях рецептора 4/ядерний фактор-κB ⅱ

2.5 Вплив CDP на патологію товстої кишки у мишей C57BL/6J

Cistanche Deserticola Extract порошок з високоякісної сировини

Клацніть, щоб отримати більше деталей

Як показано на малюнку 2, фарбування H&E виявило, що структура тканин товстої кишки нормальних мишей була нормальною, крипти були акуратно і щільно розташовані, кількість була великою, а епітеліальні клітини не мали очевидного дегенерації та проливання. Навпаки, миші ДН виявили очевидне проливання епітеліальних клітин товстої кишки, інфільтрацію запальних клітин, пошкодження клітин крипт, зникнення кишкової залозистої структури та підвищення проникності. Після 4 тижнів втручання CDPS вищезазначені патологічні умови відновлювались до різного ступеня.

Результати фарбування AB-PAS показали, що порівняно з контрольною групою кількість не витрачених келихів у товстій кишці мишей модельної групи була значно зменшена, а секреція кислотного білка слизу значно збільшувалася; Найбільша кількість нементованих келихів у товстій кишці контрольної групи; Порівняно з модельною групою, секреція білка кислотного слизу кишечки в групі CDPS-H була зменшена.

Рис. 2 Вплив CDP на гістопатологічні зміни колонічних мишей DN, досліджених за допомогою фарбування H&E та AB-PAS

2.6 Вплив CDP на кишкову флору мишей C57BL/6J

Вплив CDP на біохімічні показники та патологічні результати мишей ДН були всебічно проаналізовані, а вміст товстої кишки мишей у групі CDPS-H з найкращою загальною ефективністю був обраний для досліджень флори кишечника.

2.6.1 Діаграма розподілу варіанту амплікону (ASV), як показано на малюнку 3, порівняно з контрольною групою, відносна чисельність видів флори кишечника у модельних групових мишей зменшилася, а відносна достатність покращилася після лікування CDPS.

Цистанш

2.6.2 Аналіз різноманітності альфа, як показано в таблиці 6, порівняно з контрольною групою, індекс CHAO1 кишкової флори мишей модельної групи зменшився. Після втручання CDPS індекс CHAO1 збільшився, але статистичної значущості не було, що свідчить про те, що CDP можуть змінити структуру флори кишечника за рахунок збільшення загальної кількості видів. Індекс покриття близький до 1, що вказує на те, що результати послідовності в основному можуть відображати справжню ситуацію вибірки. Не було статистично значущої різниці в Шенноні, Сімпсоні, Покриттям та Пілоу _ e індексу серед груп, що свідчить про те, що багатство видів та різноманітність екологічних спільнот у кожній групі були хорошими, а охоплення колонії було послідовним і рівномірно розподіленим.

Рис. 3 Діаграма Венна розподілу ASV

Таблиця 6 Індекси альфа-диверсита кишкової мікробіоти у мишей у групах управління, моделі та CDPS (n=6)

2.6.3 Аналіз різноманітності бета

Як показано на малюнку 4, за допомогою аналізу бета-різноманітності, аналіз основних компонентів (PCA) може відрізнити три групи зразків у тривимірному просторі, що свідчить про те, що у флорі кишечника цих трьох груп зразків існують значні відмінності. Група моделей та контрольна група розділені вздовж осі PC2, а група CDPS-H-між модельною групою та контрольною групою, близькою до контрольної групи.

Рис. 4 Бета -різноманітність кишкової флори у мишей у групах управління, моделі та CDPS (n=6)

2.6.4 Вплив CDP на кишкову флору мишей C57BL/6J

2.6.4.1 Рівень філору

Як показано на рисунку 5, порівняно з контрольною групою, відносна кількість твердих часів у модельній групі значно зросла, відносна чисельність бактероїдоти та веррукомікробії значно зменшилась, а відносне співвідношення достатку (B/f) бактероїдів до твердих захворювань. Порівняно з модельною групою, CDP значно збільшили відносну чисельність бактероїдів та веррукомікробії, зменшили відносну кількість твердих і збільшили значення B/F, що було ближче до значення B/F контрольної групи.

Фіг.

2.6.4.2 Рівень роду

Гістограма складання чисельності видів у топ-30 рівнів родів (рис. 6) показує, що у флорі кишечника мишей у групі модель та групі CDPS-H та групи CDPS-H та групі CDPS-H. Існує 16 різних бактеріальних родів між модельною групою та контрольною групою; Існує 8 різних бактеріальних родів між групою CDPS-H та модельною групою; 5 бактеріальних родів у зоні перекриття можуть бути бактеріальними родами, що CDP можуть покращити діабетичну нефропатію (мал. 7). Як видно з таблиці 7, на рівні роду у кишкової флори миші, порівняно з контрольною групою, відносна чисельність Allobaculum у модельній групі була значно зменшена, а відносна чисельність рожебурію, romboutsia, ruminococcus _ гурків _} та rf39 (p p (p p (p p (p p -p39 (p p -p (p p.<0.05) was increased. ; Compared with the Model group, the relative abundance of Roseburia, Romboutsia, Ruminococcus_torques_group and RF39 (P＜0.05) decreased in the CDPs-H group; the relative abundance of Allobaculum increased (P＜0.05).

Фіг.

Рис. 7 Венна Діаграма кишкової флори на рівні роду (n=6)

Таблиця 7 Вплив CDPS на відносну кількість диференціальних мікробних родів кишечника між контрольними, моделлю та групами CDPS (n=6)

2.6.4.3 Вплив CDPS на вираз колонічного Zo -1 та окклюдіну

Як показано на малюнку 8 та таблиці 8, порівняно з контрольною групою, відносні рівні експресії ZO -1 та білки окклюдіну в тканині товстої кишки мишей у модельній групі були значно зменшені (p <0. 01); Порівняно з модельною групою, втручання CDPS у кожній дозі могло б відносні рівні експресії ZO -1 та білків окклюдіну в тканині товстої кишки були значно збільшені (P<0.01).

Рис.

Таблиця 8 Відносні рівні експресії ZO -1 та окклюдіну в тканині товстої кишки мишей з кожної групи (n=3)

Cistanche сировина

2.7 Вплив CDP на ниркову експресію білка TLR4/NF-κB сигнального шляху білка

Як показано на малюнку 9 та таблиці 9, порівняно з контрольною групою, відносна експресія білка TLR4 у тканині нирок мишей у модельній групі та співвідношення P-NF-κBP65/NF-κB P65 та PI κBα/I κBα значно збільшувались. Високий (с<0.01); compared with the Model group, the relative expression of TLR4 protein and p-NF-κBp65/NF-κB p65 and p-I κBα/I κBα in the kidney tissue of mice in the CDPs-M and CDPs-H groups The ratios were significantly reduced (P＜0.01, P＜0.05).

Фіг.

Таблиця 9 Відносні рівні експресії TLR4/NF-κB, пов’язаних із сигнальним шляхом, пов'язаних білками в нирковій тканині мишей з кожної групи (n=3)