Вплив цистанхе на зміни АТФази в мітохондріях печінки щурів із сепсисом

Контакт: Одрі Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Електронна пошта:audrey.hu@wecistanche.com

Wang Zhiqiang Yin Gang

Анотація: Мета:Вивчити змінуАТФ-азна активність мітохондрій печінки при сепсисіі ефект відЦистанхена ньому.Методи:40 щурів SD були випадковим чином розділені на групу фіктивної операції, 12-групу контролю, 12-групу годинного адміністрування, 16-групу контрольної групи та 16-групу годинного адміністрування. Theсепсисмодель була відтворена за допомогою лігування та перфорації сліпої кишки (C LP) і порівняна. Групова виживаність, середній артеріальний тиск (САТ), печінкамітохондріальний АТФазазміни діяльності.Результати:Після того, як щури відтворили модель сепсису,АТФазадіяльність печінкимітохондріїзнизився, а 24-годинна виживаність значно зменшилася. TheАТФазаактивності мітохондрій печінки після введенняЦистанхезначно покращився порівняно з контрольною групою (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">Висновок:Зниження мітохондрійАТФ-азна активність при сепсисі, перевантаження клітин кальцієм, а також набряк і некроз є прямими причинами смертісептичні щури. Цистанхе посилює активність АТФазиє важливим механізмом для лікуваннясепсис.

Ключові слова: Цистанхе, цистанхе сепсис мітохондрії фермент АТФ

сепсисє клінічно критичним захворюванням. Незважаючи на оновлення антибіотиків за останні 30 років, рівень смертності від сепсису значно не знизився і все ще становить 50 відсотків [1]. Одне тільки західне антибактеріальне лікування «знищення зла» не покращує прогнозсепсис.У патогенезі ТКМ сепсис належить до «праведності недоліків і зла», лікування має базуватися на принципі «зміцнення організму» та «усунення зла». Традиційна китайська медицина продемонструвала великий потенціал у лікуванні сепсису.сепсисускладнене поліорганною недостатністю є основною причиною високого рівня смертності, а пошкодження клітинної структури є мікроскопічною патологічною основою поліорганної недостатності [2]. Цистанхе є традиційним китайським тонізуючим засобом, сучасні фармакологічні дослідження показали цеЦистанхемає ефект опору мембранному перекисному ефіру та захисту функції клітин [3]. Функціямітохондріальна енергіяМетаболізм є однією з основних функцій клітин, а діяльністьАТФазає важливим показником для вимірювання функціїмітохондріальна енергіяметаболізм. У цьому експерименті ми спостерігали зміниАТФазаактивності клітин печінки всептичні щуриі зв'язок між ефектамиЦистанхена ньому та смертності щурів і мав на меті забезпечити теоретичну основу та ефективне дослідження для клінічного «зміцнюючого» лікуваннясепсис.

Цистанхе

1. Матеріали та методи

1.1 Реактиви

Цистанхебув придбаний у Сіньцзяні (ідентифікований професором Тан Дефу з Медичної школи Університету трьох ущелин). 200 г висушеної цистанки брали і двічі відварювали дистильованою водою. Фільтрат упарюють і концентрують до концентрації 1 г/мл. Пентобарбітал натрію (001104), Китайська національна фармацевтична група Shanghai ChemicalРеагенткомпанія;АТФазний реагент(20030108), Nanjing Jiancheng Bioengineering Research Institute.

1.2 Експериментальна модель тварин і групування

40 самців щурів SD (придбаних у Experimental Animal Center of Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology) були випадковим чином розділені на 5 груп: група фіктивної операції (n=8), 12-годинний контроль група (n=8), 12-годинна адміністративна група (n=8), 16-годинна контрольна група (n=8), 16-годинна група адміністрування (n=8). Групі фіктивної операції та контрольній групі вводили звичайний фізіологічний розчин через зонд, а групі введення застосовували 1 г/мл цистанче двічі на день протягом 15 днів. Theмодель сепсисубуло відтворено шляхом перев’язки сліпої кишки та перфорації [4]. Перед операцією тварини вільно пили воду і голодували 12 годин.

1.3 Визначення середнього артеріального тиску

Яремну вену вставляли за допомогою голки на голові, гепарин використовували для антикоагуляції, ліву загальну сонну артерію канюлювали до дуги аорти, а саморобний катетер під’єднували до біологічного багатоканального інструменту, а середнійартеріальний тиск(КАРТА). Експериментуйте після стабілізації MAP.

1.4 Визначення активності АТФ-ази мітохондрій

Візьміть 6 г печінки щура та швидко помістіть її в середовище 0 ступеня розділення [250 ммоль сахарози, 2 ммоль етоксиетилпіперазину 2-етилсульфокислоти, 0,1 ммоль етилендіамінтетраоцтової кислоти, рН7,4], відкрити його та змити домішки, відокремити суспензію середовища (1: 10), гомогенізувати тефлоновим електричним гомогенізатором (1200 об/хв), центрифугувати при 2000 об/хв протягом 10 хвилин, зберегти супернатант, центрифугувати при 10000 об. /хв протягом 15 хвилин, видаліть супернатант, візьміть осад і суспендуйте його в 2 мл середовища для розділення, щоб отриматимітохондріальна суспензія. Весь процес здійснюється при 0 до 4 градусів. Для вимірювання використовували метод визначення фосфору [5].АТФ-азна активність(набір було придбано в Нанкінському інституті біологічної інженерії Цзяньчен).

1.5 Статистична обробка

Усі експериментальні дані виражені як середнє ± стандартне відхилення (X±S), і програмне забезпечення SPSS виконує односторонній аналіз дисперсії та кореляційний аналіз.

Екстракт цистанхи

2. результати

2.1 Вплив Cistanche на середній артеріальний тиск і 24-годинну смертність щурів

Артеріальний тиск контрольної групи значно знизився через 12 годин після перев’язки сліпої кишки та перфорації, а через 16 годин став більш помітним. Порівняно з групою фіктивної операції була значна різниця. Артеріальний тискЛікування цистанхоюгрупа була покращена. Рівень смертності в контрольній групі був значно вищим, ніж у групі фіктивної операції, а рівень смертності в групі адміністрування був значно нижчим, ніж у відповідній контрольній групі.

2.2 Вплив Cistanche на активність АТФ-ази мітохондрій

Діяльність внатрій-калієва АТФ-аза, кальцієва АТФ-аза, магнієва АТФ-аза та кальцієво-магнієва АТФ-азау групі адміністрування були значно вищими, ніж у відповідній контрольній групі, досягаючи рівня групи фіктивної операції, що вірогідно позитивно корелювало зі зниженнямсмертність щурів (r=0.834) ).

Цистанхе

3. Обговорення

Na плюс -K плюс -АТФаза, також відомий як натрій-калієвий насос, відіграє важливу фізіологічну роль у підтримці фізіологічної діяльності клітини, температури тіла та нормального метаболізму, а також регулює баланс іонів усередині та поза клітиною.При сепсисі, є серйозна дисфункція натрієвого насоса у внутрішній мітохондріальній мембрані, що спричиняємітохондріальнийнабряк. TheNa плюс -K плюс -АТФфермент пошкоджений, дисбаланс омітохондріальнийконцентрація іонів збільшується, активність ферментів енергетичного обміну пригнічується, енергозабезпечення клітин виснажується, і викликається цитотоксичний набряк. При цьому підвищується проникність мембрани, що в кінцевому підсумку призводить до загибелі клітини. В експерименті ми виявили, що мітохондріальнаNa плюс -K плюс -АТФазаактивність септичних гепатоцитів була значно знижена (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na плюс -K плюс -АТФазадіяльністьмітохондрії печінкизначно збільшився (П<0.05), and="" the="" mortality="" of="">септичні щурибуло значно скорочено. Експериментальні результати показують, що зменшенняNa плюс -K плюс -АТФ-азна активністьістотно позитивно корелює з розвиткомсепсис у щурів. ГальмуванняNa плюс -K плюс -АТФ-азна активність, набряк клітин і смерть, що призводить до поліорганної недостатності, може бути швидким розвитком сепсису. Один із важливих механізмів. В останні роки було багато повідомлень проNa плюс -K плюс -АТФазаі багатьох захворювань, які привертають увагу клінічних і фундаментальних працівників. Велике значення має вивчення закону зміни активностіNa плюс -K плюс -АТФазата його регулювання [6]. Мало що відомо про конкретний механізмNa плюс -K плюс -АТФазау розвитку та результатахсепсис,і необхідні подальші дослідження.

Стабільність внутрішньоклітинного кальцію і магнію є необхідною матеріальною основою для підтримки внутрішньоклітинної реакції вивільнення та передачі інформації [7]. В експерименті зменшенняСа2 плюс -АТФазна активністьу контрольній групі безпосередньо впливає на активність кальцієвого насоса, а зниження активності кальцієвого насоса послаблює рольмітохондріальнийкальцієвий насос для виведення Ca2 плюс з клітини, а Ca2 плюс перевантаження всерединумітохондрії. Перевантаження кальцієм у мітохондріях є важливою причиноюмітохондріальнийпорушення окисного фосфорилювання, структурні пошкодження та некроз клітин [8, 9]. Перевантаження Ca2 плюс знижує потенціал мітохондріальної мембрани та вміст АТФ у тканинах [10], і утилізація енергії клітинами тканини порушується. Ca2 plus може активувати фосфоліпазу в мітохондріях, спричинити пошкодженнямітохондріальна мембрана, руйнують нормальну функцію синтезу АТФ у мітохондріях і перешкоджають виробленню мітохондріальною енергії [11]. Розладимітохондріальний метаболізм кальціюможе безпосередньо впливатиДихальна функція мітохондрій, викликаючимітохондріальний кисеньпорушення поглинання та окиснення протонів у ланцюзі транспортування електронів [12]. У той же час збільшення Са2 плюс може посилити пошкодження мітохондрій пероксидним окисненням складного ефіру [13]. Все це прямо чи опосередковано призводить до порушення енергозабезпечення клітин і загибелі тканин і органів і прискорює розвиток патологічних змін при сепсисі. В експерименті ми також виявили, що діяльність вM g2 плюс -АТФаза і Ca2 плюс -M g2 плюс -АТФаза у септичних щурівтакож значно зменшилися.Mg2 плюс -АТФаза і Ca2 плюс -M g2 плюс -АТФазає важливими речовинами для підтримки внутрішньоклітинного балансу кальцію та магнію. Віднер повідомив, що зниження внутрішньоклітинних іонів магнію є індукуючим фактором необоротного пошкодження клітин, а співвідношення Mg 2 плюс /Ca2 плюс є важливим показником, що відображає необоротне пошкодження клітин [14]. TheMg2 плюс -АТФаза і Ca2 плюс -M g2 плюс -АТФазадіяльності вЦистанхе-групі, якій вводили, було посилено, Т-фаза є сульфгідрилазою, іЦистанхемає антимембранний ефект перекисного ефіру, що може бути наслідком посиленняАТФазадіяльність Cistanche Основи хімії та основи фармакології [15].

При сепсисі, мітохондріальнийпорушення енергетичного обміну, зниженняАктивність ферменту АТФ, мітохондріальний набряк, внутрішньоклітинне перевантаження кальцієм і порушення кальцієво-магнієвого балансу є прямими причинами загибелі клітин сепсису та поліорганної недостатності.Цистанхеантагонізує перекисне окислення мембранного ефіру, посилює активність АТФ-ази, підтримує внутрішньоклітинний гомеостаз кальцію та магнію та захищає нормальну роботу клітинних функцій.Цистанхеє важливим механізмом зниження смертностісептичні щури. Це свідчить про гарні перспективиЦистанхе при лікуванні сепсису