Вегетативна дисфункція та інвалідність при синдромі хронічної втоми

Анотація:

Передумови: міалгічний енцефаломієліт/Синдром хронічної втоми(ME/CFS) єпридбане комплексне захворювання з пацієнтами, які страждають від основних симптоміввтомаі після фізичних навантаженьнездужання (PEM), когнітивні порушення, біль і автономна дисфункція. ME/CFS єспровокована інфекцією у більшості пацієнтів. Початкові докази потенційної ролі природногорегуляторні аутоантитіла (AAB) до бета-адренергічних (AdR) і мускаринових ацетилхолінових рецепторів (MAChR) у пацієнтів з МЕ/СХУ отримано з кількох досліджень.

Методи: тут ми проаналізували кореляціїтяжкості симптомів з рівнями AAB до вазорегуляторних AdR, AChR та ендотеліну -1 типу Aі B (ETA/B) і рецептор ангіотензину II типу 1 (AT1) у берлінській когорті пацієнтів з ME/CFS(n = 116) методом ІФА. Оцінювали тяжкість захворювання, симптоми та вегетативну дисфункціюанкети.

Результати: ми виявили, що рівні більшості AAB значно корелюють з ключовими симптомамизвтомаі біль у м’язах у пацієнтів з інфекцією. Вираженість когнітивнихпорушення корелює з AT1-R- і ETA-R-AAB, а тяжкість шлунково-кишкових симптомів зalpha1/2-AdR-AAB. Навпаки, у пацієнтів із МЕ/СХУ, не спричиненою інфекцією, спостерігалося меншета інші кореляції.

Висновок: кореляція специфічних AAB проти G-білкових рецепторів(GPCR) із симптомами надають докази ролі цих AAB або відповідних рецепторних шляхів упатомеханізм захворювання.

Ключові слова:адренорецептори; аутоантитіла; міалгічний енцефаломієліт;синдром хронічної втоми; аутоімунітет; вазорегуляція; G-білковий рецептор,цистанче

Для отримання додаткової інформації:wallence.suen@wecistanche.com

1. Введення

Міалгічний енцефаломієліт/синдром хронічної втоми (МЕ/СХВ) є набутимкомплексне захворювання з основними симптомами втоми, нездужання після навантаження (PEM), когнітивнихдисфункція та біль [1]. Орієнтовна поширеність становить до 0.86 відсотків з піками впідлітковий та середній вік [2,3]. ME/CFS у більшості викликається інфекцієюпацієнтів [4]. Хоча патогенез досі невідомий, є багато доказівімунна та вегетативна дисрегуляція [5]. З’являється все більше доказів того, що судинна дисфункція та гіпоперфузія відіграють рольважлива роль у ME/CFS. Зменшення надходження кисню в м’язи під час фізичних вправ булопоказано в кількох дослідженнях у пацієнтів з ME/CFS [6,7]. Відповідно до цього змінюється метаболізмпри ME/CFS вказують на гіпоксію та ішемію [8]. Кілька досліджень показали зниженняцеребральний кровотік при ортостатичній провокації [9,10]. Таким чином, гіпоперфузія, яка єпосилюється під час навантаження, може спричинити розумову втому та втому скелетних м’язів, які є характерними ознакамиME/CFS [11]. Для регуляції кровотоку використовуються G-білкові рецептори (GPCR) для вазоактивнихгормони, такі як катехоламіни, ацетилхолін, ангіотензин II і ендотелін 1, відіграютьважлива роль [12]. Регуляторні аутоантитіла (AAB), націлені на GPCR, беруть участь упатогенез багатьох захворювань. Анти-GPCR AAB зв’язуються з відповідними рецепторами,що може призвести як до агоністичних, так і до антагоністичних ефектів [13]. Серед перших ААБ доОписані GPCR стосуються бета1-адренергічного рецептора (AdR) при дилатаційній кардіоміопатіїі до рецепторів ангіотензину II типу 1 (AT1-R), опосередковуючи вазоконстрикцію як фактори ризикувідторгнення ниркового трансплантата [14,15]. AAB проти GPCR було виявлено у багатьох ревматичниххвороби також [16]. Цей AAB належить до регуляторної мережі, яка нерегульованабагато хвороб [17]. Є докази, що AdR і мускаринові ацетилхолінові рецептори (M-AChR)-AABвідіграють певну роль і в ME/CFS. Танака та ін. були першими, хто описав підвищений M-AChR-AAB уME/CFS та їх зв’язок із м’язовою слабкістю та нейрокогнітивними порушеннями [18]. У попередньому дослідженні ми виявили підвищений AAB проти бета2-AdR, а також M3/M4-AChRу підгрупі пацієнтів з ME/CFS [19]. Бинке та ін. змогли перевірити ці висновкивиявлення підвищених AAB проти beta1/2-AdR і M3/M4-AChR у сироватці, але не вцереброспінальна рідина пацієнтів з ME/CFS [20]. Рівні Beta1/2-AdR-AAB у крові корелюютьзі структурними змінами в мозку, пов’язаними з модуляцією болю [21]. Нещодавно ми знайшлиагоністичний бета2-AdR-AAB у здорових осіб контрольної групи та пацієнтів із МЕ/СХУ, стимулюючиbeta2-AdR на імунних клітинах і репортерних клітинних лініях. Важливо, щоб ця агоністична функція булаослаблений у ME/CFS [22]. При проведенні імуноадсорбції для видалення ААБ зкровообігу ми спостерігали короткочасне клінічне поліпшення у більшості пацієнтів [23,24]. дляПацієнти з ME/CFS, які отримували ритуксимаб, ми задокументували стійке зниження попереднього лікуванняпідвищені рівні бета2-AdR-AAB у тих, хто клінічно відповів на лікування ритуксимабом [19]. Метою цього дослідження було дослідити кореляції між рівнями зв’язування AAB звазорегуляторний GPCR і тяжкість клінічних симптомів при ME/CFS. Як відповідає AABчасто активуються інфекціями, ми розрізняли пацієнтів із та безінфекція спровокувала початок ME/CFS. У недавньому дослідженні ми виявили підвищену поширеністьаутоімунні асоційовані однонуклеотидні варіанти в CTLA4 та PTPN22 у ME/CFSлише пацієнти з початком інфекційного захворювання [25]. Зв’язування катехоламінів з альфа1/2-AdRна клітини гладких м’язів судин викликають звуження судин, тоді як вони опосередковують розширення судинчерез бета2-AdR. Зв’язування ангіотензину II з AT1-R і ендотеліном-1 з ендотеліном-1 типуРецептори А і В (ETA/BR) активують важливі судинозвужувальні шляхи. Ціліганди збільшуються при фізичному навантаженні [12]. Активовані протеазою рецептори (PAR) відіграють aроль у судинній регуляції під час запалення. Показано активацію PAR-1 тромбіномвикликати звуження судин [26,27]. PAR-2, що активується трипсином, може опосередковувати запаленняадгезія клітин до ендотелію [28]. Ацетилхолін може опосередковувати вазодилатацію через M3-AChR залежне вивільнення оксиду азоту [29]. Експресію M4-AChR описано вмікросудинна система мозку [30]. Ми очікували, що якщо вазорегулятивні рівні AAB зіграють aроль у патомеханізмі ME/CFS, вони повинні корелювати з тяжкістю ключсимптоми та інвалідність.

2. Матеріали та методи

2.1. Пацієнти

Всього в амбулаторії виявлено імунодефіцити у 116 пацієнтів.в Інституті медичної імунології при Харитé Universitätsmedizin Berlin міжЖовтень 2016 р. та травень 2017 р. Діагноз ME/CFS у всіх пацієнтів базувався на даних 2003 р.Канадські критерії консенсусу та виключення інших медичних або неврологічних захворювань, якіможе спричинити втому за результатами комплексної клінічної та лабораторної оцінки [1]. Всі хворіотримав серцево-легеневе обстеження перед направленням. При підозрі на ревматизм,шлунково-кишкові або неврологічні захворювання, пацієнти були направлені до спеціалістів допоставлено діагноз ME/CFS. Дослідження схвалено Комітетом з етикиблагодійністьé Universitätsmedizin Berlin (EA4/090/10) відповідно до Декларації 1964 рокуГельсінкі та його пізніші поправки. Усі пацієнти дали інформовану згоду.

2.2. Визначення рівня аутоантитіл і лабораторних даних крові

Компанія CellTrend GmbH, Luckenwalde, Німеччина, проаналізувала рівні AAB у сироватці крові протиальфа1-, альфа2-, бета1-, бета2-, бета3-AdR, M3- і M4-AChR ; AT1-R, ETA-R і ETB-R;PAR1/2. Зразки цільної крові від кожного суб'єкта залишали згортатися при кімнатній температуріа потім центрифугували при 2000× g протягом 15 хв в охолодженій центрифузі. Сироватка булаочищений і зберігається при−35 ◦C. AAB вимірювали в зразках сироватки за допомогою сендвічаНабір для ELISA (CellTrend GmbH, Luckenwalde, Німеччина). Мікротитраційна 96-лунка з полістиролупластини були покриті повнорозмірними рецепторними білками. Для збереження конформаціїепітопів рецептора до кожного буфера додавали 1 мМ хлориду кальцію. дублікатзразки розведення сироватки 1:100 інкубували при 4°С◦C протягом 2 год. Після миття ступенів, тарілокінкубували протягом 60 хв із 1:20, 000 розведенням міченої пероксидазою хрону козианти-людські IgG, що використовуються для виявлення. Щоб отримати стандартну криву, пластини булиінкубували з тестовою сироваткою від пацієнта з GPCR AAB-позитивним індексом. ІФА буливалідовано відповідно до «Керівництва для промисловості: валідація біоаналітичного методу» FDA.Визначали концентрацію сироваткових субкласів IgG, IgA, IgM, IgE та IgGблагодійністьé діагностична лабораторія Labor Berlin GmbH.

2.3. Опитувальники для оцінки симптомів

Наявність і тяжкість симптомів у пацієнтів з ME/CFS оцінювали на основіпро Канадські критерії консенсусу 2003 року [1,31]. Основні симптоми втоми, біль у м'язах,імунні симптоми (середнє значення з 3 симптомів болю в лімфатичних вузлах, болю в горлі та грипусимптоми) та когнітивні порушення (середнє значення з 3 симптомів порушення пам’яті,здатність до концентрації та розумова втома) оцінювалися від 1 (без симптомів) до10 (найважчі симптоми) пацієнтами. Симптоми вегетативної дисфункції булиоцінюється за шкалою Composite Autonomic Symptom Score 31 (COMPASS 31) [32]. На додачу,Інвалідність оцінювали за шкалою Белла, зосереджуючись на рівні обмеження щодняфункціонування [33] і втоми за допомогою оцінки втоми Чалдера [34]. Щоденні фізичні навантаженняжиття були оцінені за допомогою Короткого опитування здоров’я 36 (SF-36) [35]. 

2.4. Статистичний аналіз

Статистичний аналіз даних проводили за допомогою IBM SPSS Statistics 22.0 (Нью-Йорк, Нью-Йорк,США), GraphPad Prism 6.0 (Сан-Дієго, Каліфорнія, США) і R 4.0 (R Foundation for StatisticalОбчислення, Відень, Австрія.Всі данібули представлені як медіана та інтерквартильний діапазон (IQR), середнє значення та стандартне відхилення(SD) або частота (n) і відсоток, де це необхідно. Порівняння кількісніпараметрів між двома групами проводили за допомогою непараметричного методу Манна-Уітнітест. Категоріальні параметри порівнювали між підгрупами із застосуванням Пірсонаχ2-тест. Кореляційний аналіз проводили з використанням непараметричного коефіцієнта Спірмена.Завдяки багаторазовому тестуванню було застосовано поправку Бенджаміні-Хохберга (BH), спрямовану наконтролювати рівень помилкових відкриттів 5 відсотків. Скоригованоp-значення < 0.05 вважаються такими, що надаютьдокази статистично значущого результату.

Натисніть тут, щоб купити Cistanche

3. Результати

3.1. Когортні характеристики

Ми проаналізували когорту з 116 пацієнтів з ME/CFS на кореляцію рівнів AAB звираженість симптомів. Характеристики пацієнтів наведені в табл1. Середній вік становив43 роки(IQR: 31–50) і попередньої середньої тривалості захворювання на момент аналізустановив чотири роки (IQR: 2–9). Загалом 83 із 116 пацієнтів (72 відсотки) були жінками, а 86 (74 відсотки)повідомили про початок захворювання, спричинений інфекцією. Пацієнти з інфекційним початкомбули молодшими з середньою різницею в десять років (p = 0.005) і повідомили про коротшу хворобутривалість (p = 0.022). Не було відмінностей у тяжкості симптомів, шкалі інвалідності Белла,SF-36 фізичні функції та COMPASS 31-оцінені вегетативні дисфункції (табл.1) ні вРівні AAB (табл2) між цими групами.

3.2. Кореляція AAB із загальним IgG і віком

Як ми вже спостерігали в попередньому дослідженні [19] більшість рівнів AAB показали aпозитивна кореляція із загальним IgG та підкласами IgG, переважно з IgG1 та IgG3(Таблиця S1). Оскільки GPCR AAB належать до регуляторної мережі AAB, їх рівень можезалежать від загального рівня IgG. Крім того, ми спостерігали зворотну кореляцію з віком для деякихAAB (таблиця S1), а також між віком і загальним IgG (уся когорта: r =−0.2526; p = 0.007, n = 114). Тому ми розрахували співвідношення AAB/IgG, щоб виправити вплив віку (табл2 і таблицю S2).

3.3. Кореляція AAB з балами клінічних симптомів

Рівні різних AAB корелювали з тяжкістю симптомів (таблиця S3).Далі миспостерігається позитивна кореляція альфа1/2-AdR, M4-AChR та ETA-R із захворюваннямтривалість (Таблиця S2). Зведення до мінімуму впливу віку за допомогою співвідношення AAB/IgG для кореляціїаналізи призвели, як правило, до вищих оцінок кореляції (r) і більшої кількості кореляцій досягнуто aрівень значущості (Таблиця S4). Проаналізовано когорти пацієнтів за типом захворюванняпочаток. Оскільки 74 відсотки пацієнтів повідомили про початок інфекції, ця група була набагато більшою, ніжгрупа неінфекційного початку. Кореляції тяжкості симптомів із співвідношенням AAB/IgGстратифіковані відповідно до початку захворювання, показані як значення коефіцієнта кореляції Спірменана малюнку1, і кореляції клінічних симптомів з абсолютними рівнями AAB показані вМалюнок S1. Найбільше кореляцій виявлено у пацієнтів із початком лише інфекції,у той час як менша кількість та інші кореляції були виявлені в тих, хто почався не з-за інфекції(Таблиці S3 і S4)

Фігура 1.Кореляції між тяжкістю симптомів і співвідношенням AAB/IgG. Кореляційний аналіз співвідношень AAB/IgG стяжкість (A) втома, біль у м’язах, показники когнітивних та імунних симптомів, фізичне функціонування (SF-36) і Bellоцінка інвалідності та (B) із субдоменами COMPASS 31. Коефіцієнти кореляції Спірмена (r) показані для пацієнтів зпочаток, спричинений інфекцією (чорні смуги), і пацієнти без початку, спричиненого інфекцією (сірі смуги). Значні кореляції попередніхдо ЧН-корекції позначені зірочками (*p < 0.05,="" **="">p < 0.01),="" correlations="" that="" remained="" signifificant="" after="" bh-correction="">позначені чорно-білими смужками.У пацієнтів з інфекційним початком (n = 86), вираженість втоми позитивно корелювалаз більшістю співвідношень AAB/IgG, у тому числі проти альфа1/2-AdR, beta1/2/3-AdR,M3/4-AChR, AT1-R, ETA-R і ETB-R, але не PAR-1/2 (Малюнок1A, чорні смуги). музвираженість болю показала подібну кореляцію до втоми, за винятком бета3-AdR-AAB/IgG.

Фізична функція SF-36 показала модель кореляції, подібну довтомаі м'язибіль зі значними негативними кореляціями (через нижчі показники, що вказують на більш серйознийпорушення) з альфа2-AdR-, beta1/2-AdR- і M4-ACh-AAB/IgG. На противагу цьомутяжкість когнітивних симптомів позитивно корелювала з AT1-R- і ETA-R-AAB/IgGтільки. Тяжкість оцінки інвалідності за шкалою Белла показала аналогічну негативну кореляцію зAT1-R- і ETA-R-, а також з alpha1/2-AdR-AAB/IgG. Для оцінки імунітету лише anвиявлено зворотну кореляцію з PAR1. Оцінка втоми Чалдера не корелювала зAAB/IgG (не показано). Графіки розсіювання для значущих кореляцій показані на малюнках S2–S5.Жодної з цих значущих кореляцій втоми та болю в м’язах не виявленопацієнтів без інфекційного початку (рис1A, сірі смужки). Кореляції міжбільшість показників фізичної функції AAB/IgG і SF-36 були навіть протилежними показникам пацієнтівз інфекційним початком. Однак оцінки кореляції (r) між AT1-RAAB/IgG і когнітивні симптоми, а також між AT1-R- і ETA-R-AAB/IgG іОцінка Белла була подібною до оцінки пацієнтів із початком захворювання, спричиненим інфекцією. Як ця підгрупабула набагато меншою (n = 30), це може пояснити відсутність значущості. Крім того, ми знайшли aзначуща негативна кореляція ETB-R-AAB/IgG і балу за Беллом лише в цій групі.Цікаві закономірності кореляції також були виявлені для AAB/IgG і трьох доменівортостатичної, шлунково-кишкової та пупіломоторної функцій, оцінених за допомогою COMPASS 31questionnaire (Figure 1Б). У пацієнтів з початком, спровокованим інфекцією, шлунково-кишковий трактсимптоми позитивно корелювали з альфа1/2-AdR- та зінично-руховими симптомамиіз співвідношеннями альфа1-, бета2/3-AdR- і M4-AChR-AAB/IgG. Навпаки, незараженнягрупа з тригерним початком показала сильні кореляції альфа1/2-AdR- і бета1/2/3-AdRAAB/IgG з ортостатичними симптомами та зворотна кореляція PAR2-AAB/IgG зсекретомоторні симптоми, які відсутні в іншій підгрупі. Ми не спостерігалибудь-яка з цих кореляцій із загальним IgG (не показано). Пацієнти без інфекціїпочаток захворювання мав значно більшу тривалість до цих аналізів (табл1). Як миспостерігається вищі співвідношення альфа1/2-AdR, M4-AChR і ETA-R-AAB/IgGпри більшій тривалості захворювання (таблиця S2) це може вплинути на кореляціїalpha1/2-AdR/IgG з ортостатичними симптомами.У пацієнтів із початком захворювання, викликаним інфекцією, більшість співвідношення AAB/IgG корелює звтома, м’язовий біль і когнітивні симптоми, а також шкала Белла з ETA-R-AAB/IgG,залишався значущим після корекції ЧН (табл3 і малюнок1). Крім того, асоціаціязінично-рухових симптомів з M4-AChR-AAB/IgG залишалися значними. Після ЧДкорекція, жодна з кореляцій не спостерігалася у пацієнтів без початку, викликаного інфекцієюзалишався значним.

4. Обговорення

Існує все більше доказів ролі судинної дисфункції в ME/CFSасоціації з ключовими симптомами [11]. У цьому дослідженні ми знайшли кілька чудових кореляційції вазорегуляторного ААВ з клінічними симптомами при МЕ/СХУ. Залежність міжвиміряний біологічний градієнт AAB і тяжкість симптомів вказують на причинний зв’язокпатомеханічний зв'язок.Завдяки кореляції природного регуляторного ААВ із загальним IgG [19] і залежність відРівень IgG залежно від віку [36], співвідношення AAB/IgG використовувалися в наших аналізах для корекціївплив віку. Використання співвідношень AAB/IgG замість абсолютних виявлених рівнів AABсильніші та більші кореляції тощоp-цінності досягли рівня значущості.Відповідно до нашої гіпотези про роль вазоактивних AAB у ME/CFS ми виявили, щорівні альфа1/2- і бета1/2/3-AdR-, M3/4-AChR- і AT1-R-, ETA/BR-AAB/IgGвсі співвідношення суттєво корелюють із тяжкістю втоми та, за виняткомбета3-AdR-AAB/IgG із болем у м’язах. Той самий AAB alpha2-AdR-, beta1/2-AdR- таM4-AChR- (але не AT1-R-, ETA/BR-) корелює з фізичною функцією SF-36. Танаката ін. вже описані рівні M-AChR-AAB (без даних про підтип M) уME/CFS асоціюється з м’язовою слабкістю [18]. Бинке та ін. не міг показатиасоціація AAB проти beta1/2-AdR і M3/M4-AChR з різними пов’язаними зі здоров’яманкети, але їхня когорта була досить невеликою, а ключові симптоми, включаючи втому,м'язовий біль, когнітивні та автономні симптоми окремо не оцінювали [20]. мивиявили підвищений AAB проти beta2-AdR, а також M3 і M4-AChR у пацієнтів з ME/CFSу нашому попередньому дослідженні [19]. 

У цьому дослідженні тяжкість симптомів не визначали.У пацієнтів із синдромом постуральної тахікардії (POTS) одне дослідження повідомило про підвищеннярівні AAB проти альфа1-AdR і M4-AChR для кореляції з тяжкістю симптомів [37], тоді як інший продемонстрував підвищені рівні AAB проти бета1-AdR- і бета2-AdR докорелюють із тяжкістю симптомів [38]. Ми спостерігали чітку картину когнітивних порушень, яка була пов’язаназ ETA-R і AT1-R-AAB. Цікаво, ETA/BR-, AT1-R- і далі alpha1/2-AdRAAB/IgG також корелював із ступенем тяжкості інвалідності за шкалою Белла, враховуючи навантаження ввикликані симптоми та працездатність. ETA-R-, AT1-R- і alpha1/2-AdR усі активуються сильносудинозвужувальні шляхи, стимульовані фізичним навантаженням [12]. Покращені рівні AT1-RAAB є добре встановленим фактором ризику відторгнення ниркового трансплантата [14]. При гіпертонії,описано підвищення AT1-R-AAB і альфа1-AdR-AAB, що свідчить про агоністичнийвплив на їх рецептори [39]. Крім того, AT1-R-AAB були пов’язані зі старінням судині жорсткість артерій [40,41]. Роль ETA-R-AAB була описана в аутоімунних захворюванняхлегенева артеріальна гіпертензія як при системному червоному вовчаку, так і при системній склерозіроза [42,43]. Наша концепція вищих ETA-R і AT1-R AAB/IgG для кореляції з когнітивнимипорушення внаслідок вазоконстрикції відповідає нещодавнім дослідженням van Campen та ін.,показує як церебральну гіпоперфузію, так і зниження когнітивної функції при ME/CFS післяортостатичний стрес [9,10]. Були виявлені цікаві закономірності кореляції для співвідношення AAB/IgG і шлунково-кишкового трактуа також зінично-моторну функцію в групі з початком захворювання, викликаним інфекцією. Гастроінсимптоми з боку яєчок корелюють з альфа1/2-AdR-ABB/IgG. Цей висновок узгоджується здослідження, яке показало, що колоректальну моторику опосередковує альфа1-AdR [44]. Пупіломоторнийсимптоми, пов’язані з альфа1-AdR-, beta2/3-AdR- і M4-AChR-ABB/IgG. Після ЧДкорекція, асоціація зінично-рухових симптомів з M4-AChR-ABB/IgG залишиласязначний. Експресію M4-AChR описано в мікросудинній системі мозку таендотелій рогівки [30,45]. 

Примітно, що ми не виявили значущої кореляції AAB/IgG проти AdR, AChR таAT1-R/ET-R із втомою, болем у м’язах і AdR- та AChR-ABB/IgG із SF-36 фіз.у пацієнтів без початку захворювання, викликаного інфекцією. Проте подібніоцінки кореляції співвідношень AAB/IgG з AT1-R/ETA-R і alpha1/2-AdR із cogі оцінка Белла були знайдені, які не були значущими, ймовірно пов’язаними з потрійнимменша кількість хворих у цій групі. Тільки у пацієнтів з неінфекційним початком захворюваннязначні кореляції симптомів ортостатичної непереносимості з усіма AdR-AAB/IgGбули помічені. Крім того, зворотна кореляція PAR2-AAB/IgG із секретомоторними симптомамибув знайдений. Показано, що PAR2, активований трипсином, опосередковує секрецію слини [46]. GPCR AAB відрізняються від класичних аутоантитіл, які часто активують, комплементуютьі може опосередковувати запалення та руйнування [47]. Відсутність цитотоксичної дії або комплементунаразі повідомлялося про активацію GPCR AAB. GPCR AAB специфічно зв'язуютьсядо відповідних рецепторів, що може мати функціональні наслідки. Обидва стимулюютьбули описані агоністичні та інгібуючі антагоністичні ефекти [13,15,48]. враховуючиагоністична функція, кілька асоціацій AAB із симптомами, які ми виявилиправдоподібний. Підвищені рівні агоністичного AT1-R/ETA-R AAB можуть добре пояснити зв’язокз більшою когнітивною дисфункцією через їх вплив на описане звуження судинпри деяких інших захворюваннях [49]. Подібним чином можна пояснити посилення активності PAR2менше секретомоторних симптомів і посилення активності альфа1-AdR більше шлунково-кишкового трактусимптоми [44]. Можлива зворотна кореляція імунної оцінки з PAR1-AAB/IgGпояснюється нижчими рівнями PAR1-AAB, що призводить до меншого звуження судин [26,27]. Theасоціації підвищених рівнів як альфа-, так і бета-AdR-AAB з більш сильною втомоюі біль у м’язах при постінфекційному ME/CFS може вказувати на надмірну вазоконстрикторну діюальфа-AdR-AAB або порушення функції судинорозширювальної бета2-AdR-AAB. Раніше мивиявлено порушення агоністичної функції бета2-AdR-AAB в імунній та репортерній клітинній лініїаналізи у пацієнтів з ME/CFS з вищими рівнями AAB [22]. AAB проти beta1-AdR булипоказано, що порушує як бета1-AdR-, так і бета3-AdR-опосередковану вазорелаксацію у щурів [50]. Дисфункція AdR може відігравати особливу роль при навантаженні з посиленим вивільненнямадреналіну та норадреналіну, що призводить до посилення вазоконстрикції та гіпоперфузіїз наступною втомою та болем у м’язах. Можливі аутоімунні механізмипостінфекційний ME/CFS [25]. Оскільки всі ці AAB є природними регуляторами, дисфункція AABможе розвинутися під час інфікування шляхом активації сторонніх спостерігачів і результатом соматичної гіпермутаціїпри AAB із сильнішим або зміненим зв’язуванням антигену з GPCR або при поширенні епітопу.

сщодо AdR, такий сценарій відповідатиме пацієнтам, які часто повідомляють, що anзараження в стресовій ситуації, ймовірно, супроводжується активацією, спричиненою стресомAdR, спровокувало початок хвороби.Найбільш невідповідними закономірностями, які ми спостерігали між підгрупами пацієнтів, єкореляції всіх AdR-AAB з ортостатичною дисфункцією при захворюваннях, не спричинених інфекцієюале з втомою, болем у м’язах і SF-36 у постінфекційному ME/CFS. Оскільки абсолютний AABрівні, а також співвідношення AAB/IgG не відрізнялися між двома підгрупами пацієнтів, цеозначає, що не лише рівень AAB, а радше функцію AAB аборецептори відрізняються в цих підгрупах пацієнтів. Щоб далі слідувати цій гіпотезі, ву пацієнтів із початком, не спричиненим інфекцією, функція відповіді AdR-AAB може не працюватибути зміненими, але кореляції тут можуть відображати адаптивну реакцію. Наприклад, пацієнтиіз захворюваннями сполучної тканини, такими як синдром Елерса-Данлоса (СЕД), є вищимиризик розвитку ME/CFS. Тут судинна система більш еластична, що призводить до зниження систолічногоі діастолічний артеріальний тиск, тахікардія і часто POTS. У хворих вегетативнадисфункція з проблемами шлунково-кишкового тракту, а також порушення функції сечового міхура. тамє доказом того, що пацієнти з EDS мають посилене звуження судин через адренергічнігіперреакція [51]. Спокусливо припустити, що у цих пацієнтів підвищенийAdR-AAB відображають цю компенсаторну гіперактивність адренергічної системи. В лініюзгідно з цією концепцією, у пацієнтів із POTS підвищені рівні AAB проти альфа1-AdR таM4-AChR корелює з тяжкістю симптомів [37]. Обмеження цього дослідження полягає в тому, що кілька кореляцій після цього більше не були очевиднимипоправка на багаторазове тестування через багато параметрів, проаналізованих у нашому дослідженні.

минадав як виправлені, так і невиправлені кореляції, щоб вирішити можливу проблемунепотрібне відхилення істинних висновків при коригуванні для багаторазового тестування [52]. Theґрунтується на інтерпретації результатів у когорті без початку, викликаного інфекцієюменша кількість пацієнтів і деякі несуттєві результати. Ми не збільшиликількість пацієнтів із неінфекційним спровокованим ME/CFS, оскільки ми не хотіли додаватигрупа пацієнтів, діагностована та проаналізована пізніше. Крім того, початок захворювання єза власними оцінками, і деякі пацієнти можуть бути неправильно класифіковані. Про тяжкість симптомів повідомляють саміі суб'єктивна міра, що веде до широкого поширення. Як і порушення снутакож є ключовим симптомом ME/CFS, і сон пов’язаний з парасимпатичною системою, aоцінка сну повинна бути оцінена в подальших дослідженнях. Далі ми не аналізували здоровихконтрольна когорта в цьому дослідженні. У попередніх і поточних неопублікованих дослідженнях ми постійновиявили, що підгрупа приблизно однієї третини пацієнтів з ME/CFS має вищий AABпроти бета2-AdR, а також M3/M4-AChR порівняно зі здоровими людьми [19,20]. Висновкиз нашого нещодавнього функціонального дослідження припускають, що агоністична функція бета2-AdR AABтакож може бути ослаблений у пацієнтів з МЕ/СХУ, незважаючи на нормальний рівень AAB [22]. На закінчення наше дослідження надає докази того, що AAB та/або рецепторні шляхиAdR, AChR, а також AT1-R і ET-R відіграють певну роль у ME/CFS через зв’язок ізвираженість симптомів. Таким чином, можна припустити, що різні симптоми ME/CFS, у тому числівтома, м'язовий біль, когнітивні порушення та вегетативна дисрегуляція, можуть бути опосередкованіабо посилюється цими AAB. Для розшифровки механізму потрібні подальші дослідженняі специфічність зв'язування цих GPCR-AAB, і їх вплив на судинну функцію вME/CFS, і як це можна перекласти на терапевтичні концепції. У разі дисфункціїAAB, терапії, націлені на AAB, такі як імуноадсорбція або ритуксимаб, будутьбути виправданими та показали свою ефективність у підгрупі пацієнтів з ME/CFS (переглянутов [5]). Подальше специфічне націлювання на дисфункціональний або регулятивний AAB може бути розроблено якстратегії лікування при ME/CFS.

5. Патенти

CellTrend GmbH володіє патентом на використання антитіл до бета-адренорецепторів удіагноз CFS.

Додаткові матеріали:Таблиця S1: Параклінічні кореляції AAB, Таблиця S2: Співвідношення AAB/IgG параклінічні кореляції, таблиця S3: клінічні кореляції AAB AdR-, AChR- та інших AAB; початокстратифікований, Таблиця S4: Клінічні кореляції AdR-, AChR- та іншого співвідношення AAB/IgG; початок стратифікований,Рисунок S1: Кореляції між тяжкістю симптомів і AAB, Рисунок S2: Кореляції з втомоюу пацієнтів із початком, спричиненим інфекцією, Рисунок S3: Кореляції з м’язовим болем, когнітивними таімунні симптоми у пацієнтів із початком, спричиненим інфекцією, Рисунок S4: Кореляції з балом Белла,фізичне функціонування та симптоми вегетативної дисфункції у пацієнтів з інфекцієюпочаток, малюнок S5: кореляції у пацієнтів без початку, викликаного інфекцією.

Авторські внески:Концептуалізація, методологія CS, MS, SL, HF та HH; перевірка,MS, HF, SB і FS; формальний аналіз, MS; розслідування, SB, CK, PG і HH; ресурси, CKта PG; курація даних, MS, SL і TL; написання — підготовка оригіналу, MS, HF та CS;написання — перегляд і редагування, SL, FS, SB, AP, CK, PG, TL, GR і HH; візуалізація, ВЧі MS; супервізія, КС; адміністрування проекту, CS; придбання фінансування, CS Усі автори маютьпрочитав і погодився з опублікованою версією рукопису.

Фінансування:Це дослідження було профінансовано Фондом Weidenhammer-Zöbele, MS отримала aстипендія від Lost Voices Foundation.

Заява інституційної ревізійної ради:Дослідження проводилося згідно з рекомендаціямиГельсінська декларація та схвалена Комітетом з етики Charité Університет медицини Берліна(код протоколу EA4/090/10, дата затвердження 11.12.2012).

Заява про інформовану згоду:Інформована згода була отримана від усіх учасниківнавчання.

Заява про доступність даних:Дані, представлені в цьому дослідженні, доступні за обґрунтованим запитомвід відповідного автора.

Подяки:Подяка за підтримку стаціонарного лікування та управління даними з боку Сільвії Тіль. Крім того, ми дякуємо всім пацієнтам, які з довірою здали свої зразки крові та погодилисявзяти участь у цьому дослідницькому проекті.

Конфлікт інтересів:HH, керуючий директор CellTrend GmbH, має патент на використання бета-версіїантитіла до адренорецепторів у діагностиці СХУ. Усі інші автори заявляють про відсутність конфлікту інтересів.Спонсори не брали участі в розробці дослідження; у зборі, аналізі чи інтерпретаціїдані; у написанні рукопису або в рішенні опублікувати результати.