Протипухлинна та протизапальна дія олігосахаридів з екстракту Cistanche Deserticola на травми спинного мозку

Контакт: Одрі Ху Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Електронна пошта:audrey.hu@wecistanche.com

Хун Чжан та ін

Анотація

У цьому дослідженні фармакологічні ефекти олігосахаридів зЦистанхеdeserticolaекстрактназапалення, окислювальний стрес і апоптоз у самців щурів-альбіносів з ушкодженням спинного мозку були досліджені. Перекисне окислення ліпідів, GSH, каталаза, супероксиддисмутаза, ацетилхолінестераза, GPx, ROS та азотна кислота були значно змінені у щурів із пошкодженням спинного мозку. Рівні експресії мРНК IL-6, TNF-, циклооксигенази-2, iNOS, p53, каспази-3, Bax і pro-NGF були знижені на N20 відсотків після додавання екстракту. Рівні білкової експресії каспази-3 та про-NGF також були знижені на N20 відсотків. Кількість p53-позитивних клітин становила 1, 79, 54, 33 і 19 у групах GI–GV відповідно, а відповідна кількість каспазо-3-позитивних клітин становила 2, 87, 51, 23 і 14. Виходячи з отриманих результатів, застосування олігосахаридів зЦистанхеdeserticolaекстракт був ефективним протизапалення, окислювальний стрес і апоптоз у самців щурів-альбіносів із травмою спинного мозку.

Ключові слова:Cistanche deserticola, Запалення, Окислювальний стрес, АпоптозЩурів

1. Введення

Травма спинного мозку включає пошкодження спинного мозку, що призводить до функціональних змін із втратою чутливості, м’язів і вегетативної функції [1]. Крім того, апоптоз може індукуватися в олігодендроцитах і нейронах, що призводить до дисфункції спинного мозку внаслідок демієлінізації та дегенерації аксонів [2,3]. Пошкодження спинного мозку викликає значний окислювальний стрес ізапаленняпісля початку апоптозу в олігодендроцитах і нейронах [2,4]. Активні форми кисню (АФК) і прозапальні цитокіни вивільняються під час нейродегенерації, а мікроглія життєво важлива під час нейродегенеративних і запальних процесів [5–7]. Інтерлейкіни (ІЛ) є важливими цитокінами, які беруть участь у різних імунологічних процесах [8]. Yune та ін. [9] повідомили, що профактор росту нервів (pro-NGF), який виділяється з мікроглії, призводить до апоптотичної загибелі клітин. Таким чином, нові та потужні терапевтичні засоби проти окисного стресу тазапаленняпотрібні.

РослинаЦистанхеdeserticolaшироко відомий як пустельна заразиха і є голопаразитичним представником родини Orobanchaceae [10].Цистанхе deserticolaне має хлорофілу і отримує воду та поживні речовини паразитичним шляхом із саксаулу білого (Haloxylon persicum) і саксаулу чорного (Haloxylon ammodendron). TheЦистанхеdeserticolaБагаторічна рослина, відоме як Rou Cong Rong, може виростати до 160 см у розмірах і має жовті квіти. Він широко поширений у Китаї та Монголії [11] і в традиційній китайській медицині є чудовим ресурсом для лікування кількох захворювань. Він також служить основним трав’яним засобом для активізації Ян і тонізації нирок [11]. Ку та ін. [12] повідомили, що глікозидиЦистанхеdeserticolaдіють як ефективні речовини в центральній нервовій системі (ЦНС). Кілька дослідників повідомили про антиапоптотичні, протизапальні та антиоксидантні властивостіЦистанхеdeserticola[13,14]. Отримані з їжі антиоксиданти та протизапальні молекули можуть служити хіміопрофілактичними речовинами проти хронічних захворювань [15]. Враховуючи вищезазначені терапевтичні переваги, терапевтична ефективність олігосахаридів зЦистанхеdeserticolaекстракт протизапалення, окислювальний стрес і апоптоз досліджували в цьому дослідженні з використанням моделі самця щура-альбіноса з травмою спинного мозку.

2. Матеріали та методи

2.1. Матеріали

Праймери фактора некрозу пухлини-альфа (TNF-), IL-6, циклооксигенази, індуцибельної синтази оксиду азоту (iNOS), p53, Bax, каспази-3, BCL-2, pro-NGF і гліцеральдегід 3-фосфатдегідрогеназу (GAPDH) придбали у Thermo Fisher Scientific (Пекін, Китай). Первинні антитіла до каспази-3 (AV00021), p53 (P5813-100UL), моноклональних антитіл до козячого/овечого IgG–пероксидази (A9452) і антимишачого IgG флуоресцеїн ізотіоціанат (FITC; F{{15} }ML) були придбані у компанії Sigma-Aldrich China, Inc. (Шанхай, КНР).

2.2. Щури

Самці щурів лінії Wistar albino (180–220 г) були придбані у тваринництві Західно-Китайської лікарні Сичуанського університету, Китай. Щурів забезпечували їжею та водою ad libitum. 12-год. світло: 12-год. темний цикл підтримували в поліпропіленових клітках для щурів при відносній вологості. Усі експерименти з щурами були схвалені етичним комітетом WestChina Hospital Сичуаньського університету, Китай. Було дотримано всіх відповідних міжнародних, національних та інституційних інструкцій щодо догляду та використання тварин.

2.3. Індукція ураження спинного мозку

Травма спинного мозку була спричинена поздовжнім хірургічним розрізом після впливу галотану (1,5 відсотка). Всю хірургічну процедуру проводили при кімнатній температурі. Розріз робили від нижніх до середніх грудних хребців на спині тварини. На відкриту поверхню Th12 на 30 хвилин помістили вагу 20–25 г, щоб викликати травму. Після зняття ваги з поверхні Th12 шкіру та м’язи зшивали, і в нижніх кінцівках індукували тимчасовий відтворюваний параліч [16,17]. Щурів утримували протягом 24 сотень у відповідних умовах і під ветеринарним контролем.

2.4. Приготування екстракту Cistanche deserticola та кількісний аналіз

РослинаЦистанхеdeserticola(1 кг) збирали з провінції Ганьсу, Китай, сушили на повітрі та подрібнювали в порошок за допомогою електричної м’ясорубки. Порошок екстрагували етанолом (70 відсотків) протягом 60 хвилин, фільтрували та концентрували при зниженому тиску. Концентрат висушували у порошок під вакуумом [18]. Кількісний аналізЦистанхеdeserticolaекстракту проводили за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ), як описано раніше [11].

2.5. Лікування

Експериментальні групи були такими: І група (ГІ) — нормальні контрольні щури; група II (GII), щури з травмою спинного мозку (удавані контрольні групи); і групи III–V (GIII–V), щури з травмою спинного мозку, які отримували 100, 200 або 400 мг/кг олігосахаридів зЦистанхеdeserticolaекстракт відповідно. Кожна група містила по шість щурів іЦистанхеdeserticolaекстракт перорально вводили щурам протягом 6 тижнів поспіль.

2.6. Збір крові

Наприкінці лікування кров (5–6 мл) відбирали шприцом на 5 мл з голкою 23G1 через серцеву пункцію і щурів анестезували кетаміну гідрохлоридом (100 мг/кг маси тіла) та ксилазином (10 мг/кг тіла). вага) і принесений у жертву шляхом обезголовлення.

2.7. Приготування тканинного гомогенату

Наприкінці лікування щурів анестезували гідрохлоридом кетаміну (100 мг/кг маси тіла) і ксилазином (10 мг/кг маси тіла) і умертвляли шляхом декапітації. Зразки спинного мозку (12 мм) були зібрані з прооперованої області. Тканини спинного мозку нарізали на дрібні шматочки та гомогенізували в трис-HCl буфері (pH 7,4, 50 мМ) при 6000 об/хв протягом 5 хв. Гомогенат центрифугували і супернатант збирали для подальших експериментів. Усі препарати гомогенату та супернатанту проводили при 4 градусі.

2.8. Біомаркери окисного стресу

Перекисне окислення ліпідів визначали відповідно до вмісту малонового діальдегіду (MDA) шляхом вимірювання реактивних форм тіобарбітурової кислоти (TBARS). Кінцевий продукт вимірювали при 534 нм [19]. АФК визначали за допомогою дихлорфлюоресцеїнового аналізу [20]. Відновлений вміст глутатіону (GSH) визначали шляхом вимірювання кінцевого продукту при 405 нм [21]. Активність ферментів супероксиддисмутази (SOD), глутатіонпероксидази (Gpx), каталази та ацетилхолінестерази (AChE) вимірювали за допомогою спектрофотометрії [19].

2.9. Запальні маркери

Рівні TNF- та IL-6 в сироватці визначали для всіх груп [22]. Вміст нітриту вимірювали як індекс рівня оксиду азоту (NO) і виражали в мМ [23,24]. Рівні експресії мРНК TNF-, IL-6, iNOS, циклооксигенази-2 і GAPDH визначали відповідно до Moon et al. [25]. Праймери, використані в цьому дослідженні, наведені в таблиці 1.

2.10. Біомаркери апоптозу

Рівні експресії мРНК каспази-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF і GAPDH визначали відповідно до Moon et al. [25]. Рівні експресії білка каспази-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF і GAPDH були визначені відповідно до Lobos et al. [26]. Фарбування TUNEL каспази -3 і p53 проводили в нейронних зрізах [25]. Праймери, використані для RT-PCR, наведені в таблиці 1.

2.11. Статистичний аналіз

Значення представлені як середні зі стандартною помилкою середнього (SEM). Контроль іЦистанхеdeserticolaГрупи, які отримували екстракт, порівнювали за допомогою непарного t-критерію Стьюдента. Односторонній дисперсійний аналіз (ANOVA) використовувався для множинних порівнянь. Вважалося, що P-значення ˂0.05 вказують на статистичну значущість.

3. Результати

У цьому дослідженні терапевтична ефективність олігосахаридів зЦистанхе deserticolaекстракт протизапалення, окислювальнийстресБуло досліджено апоптоз у самців щурів-альбіносів із пошкодженням спинного мозку. Наявність олігосахаридів (78,68 відсотка), актеозиду (9,29 відсотка), ехінакозиду (6,34 відсотка) та 8-епілоганової кислоти (5,75 відсотка) спостерігалася вЦистанхе deserticolaвитяг (рис. 1). Вміст MDA, виміряний як кінцевий продукт перекисного окислення ліпідів, становив 22,58 нмоль/г у нормальних контрольних щурів (GI) і різко збільшився на 179,5 відсотка у фіктивних контрольних щурів (GII). Лікування щурів олігосахаридами зЦистанхеdeserticolaекстракт значно знизив вміст MDA на 50,1 відсотка в групі GV (табл. 2, P b 0,05). Вміст GSH становив 85,31 мг/г у групі GI і різко знизився на 61,1 відсотка в групі GII. Лікування сЦистанхеdeserticolaекстракт у щурів із травмою спинного мозку значно підвищив вміст GSH на 121,6 відсотка в групі GV (таблиця 2, P b0.05).

Активність СОД становила 6,2 Од/мг у групі ШКТ і була суттєво знижена на 51,1% у групі ГІІ. Щури з травмою спинного мозку, додані олігосахаридами зЦистанхеdeserticolaекстракт продемонстрував значно підвищену активність СОД на 91,4 відсотка в групі GV (таблиця 2, P b0.05). Активність каталази становила 12,8 Од/г у групі ШКТ і була суттєво знижена на 59,3 відсотка в групі ШКТ. Щури з травмою спинного мозку, додані олігосахаридами зЦистанхе deserticolaекстракти продемонстрували значно підвищену активність каталази на 106,1 відсотка в групі GV (таблиця 2, P b 0.05). Активність GPx становила 0,87 (мг/білок) у групі GI і була знижена на 55,2 відсотка в групі GII. Активність GPx була підвищена на 100 відсотків у групі GV (табл. 2, P b 0,05). Активність AChE становила 9,3 (мкмоль/хв/мг білка) у групі GI і була знижена на 54,8 відсотка в групі GII. Щури з травмою спинного мозку, додані олігосахаридами зЦистанхеdeserticolaекстракт продемонстрував значно підвищену активність AChE на 26,2, 57,1 і 107,1 відсотка в групах GIII, GIV і GV відповідно (таблиця 2, P b 0,05).

ROS вимірювали та виражали у відносних одиницях флуоресценції (RFU): внутрішньоклітинна ROS становила 44,23 у групі GI, яка була збільшена на 349 відсотків у групі GII. Доповнення олігосахаридами зЦистанхеdeserticolaекстракти значно знизили внутрішньоклітинні рівні ROS на 61,9 відсотка в групі GV (рис. 2A, P b 0.05). Вміст нітриту вимірювали як показник рівня NO і виражали в мМ. Рівень NO становив 3,7 (мМ) у групі GI, який був підвищений на 349 відсотків у групі GII. Доповнення олігосахаридами зЦистанхеdeserticolaекстракт значно знизив рівні NO на 63,6 відсотка в групі GV (рис. 2B, P b 0.05).

Рівні IL-6 і TNF- вимірювали та виражали як пг/мг білка. Рівні IL-6 і TNF- були суттєво збільшені, на 912,7 і 695,4 відсотка, відповідно, у групі GII. Однак добавки з олігосахаридами зЦистанхеdeserticolaекстракт значно знизив рівень IL{{0}} і TNF- на N60 відсотків у групі GI порівняно з групою GII (рис. 3, P b 0.{{16 }}5). Експресія мРНК маркерів запалення, таких як IL-6, TNF-, циклооксигеназа-2 та iNOS, була кількісно визначена та виражена як кратні зміни. Рівні експресії мРНК IL 6, TNF-, циклооксигенази-2 та iNOS були підвищені на 0.72-, 0.81-,0.54- , і 0.67-fold у групі GII відповідно. Доповнення сЦистанхеdeserticolaекстракт зменшив рівні експресії мРНК IL{{0}}, TNF-, циклооксигенази-2 та iNOS на N20 відсотків у групі GV порівняно з групою GII (рис. 4, P b 0,05).

Також визначали експресію мРНК апоптотичних маркерів каспази{{0}}, p53,bcl-2, bax і pro-NGF. Рівні експресії мРНК р53, каспази-3, bax і про-NGF були збільшені на 0.97-,1.{{10}}, 1.{ {12}} і 0.76-раз у групі GII відповідно, а рівень експресії мРНК bcl-2 знизився в 0.67-раз . Обробка екстрактом значно знизила рівні експресії мРНК p53, caspase-3, bax і pro-NGF на N30 відсотків, тоді як рівень експресії мРНК bcl-2 збільшився на 178 відсотків (рис. 5, P b 0,05). За даними вестерн-блотаналізу, рівні білків каспази-3 та про-NGF були значно збільшені, у 0.95-разів і 0.68-разів у групі GII відповідно. Додавання олігосахаридів відЦистанхеdeserticolaекстракт значно знизив рівні експресії білка каспази{{0}} і про-NGF на N20 відсотків у групі GI порівняно з групою GII (рис. 6, P b 0,05). Для визначення кількості p53- і каспаза-3-позитивних клітин використовували аналіз фарбування TUNEL. Кількість p53-позитивних клітин становила 1, 79, 54, 33 і 19 у групах GI–GV відповідно. Кількість каспазо-3-позитивних клітин становила 2, 87, 51, 23 і 14 у групах GI–GV відповідно (рис. 7–8, P b 0,05).

4. Обговорення

У цьому дослідженні терапевтична ефективність олігосахаридів зЦистанхеdeserticolaекстракт протизапалення, окислювальний стрес і апоптоз у самців щурів-альбіносів із травмою спинного мозку. Liuet al. [27] повідомили, що добавки з антиоксидантом можуть бути ефективними проти кількох нейродегенеративних захворювань. Повідомлялося про наявність ехінакозиду (фенілетаноїд глікозиду).Цистанхеdeserticolaекстракт [10], і кілька дослідників продемонстрували протизапальні та антиноцицептивні властивостіЦистанхе deserticola[28,29]. У цьому дослідженні було виявлено, що олігосахариди, актеозид, ехінакозид і 8-епілоганова кислота є основними складовими екстракту Cistanche deserticola.

У нейрональних клітинах SH-SY5Y після лікування ехінакозидом спостерігали покращені TNF дефекти поведінки та апоптоз [30,31]. Nan та ін. [32] повідомили про зниження рівнів TNF-, T-tau та IL-1 у пацієнтів із хворобою Альцгеймера та покращення відновлення атрофії гіпокампу та когнітивних здібностей після прийому добавок Cistanche herba. Терапевтичний ефект відЦистанхеdeserticolaекстракт назапалення, окисного стресу та апоптозу раніше не повідомлялося. Це перший звіт про фармакологічні ефектиЦистанхеdeserticolaекстракт у моделі травми спинного мозку.

Кілька дослідників повідомили, що лікування актеозидом значно зменшило окислювальний стрес і кишечникзапаленняу мишей, спричинених запальним захворюванням кишечника [33]. Нам та ін. [34] повідомили про протизапальну активність ізоактеозиду з Abeliophyllum distichum у мастоцитах людини. Протизапальні фенілпропаноїдні глікозиди з листя Clerodendron trichotomum були виявлені на моделі мишей [35]. Чжоу та ін. [36] повідомили про протизапальну активність олігосахаридів у клітинах макрофагів RAW 264.7. Повідомлялося про олігосахаридні мономери для інгібуваннязапаленняу LPS-стимульованих макрофагах через пригнічення шляхів MAPK і NF-κB [37].

Фанесток та ін. [38] повідомили, що про-NGF є переважною формою в мозку і підвищується у пацієнтів з хворобою Альцгеймера. Кілька розщеплених білків, на додаток до про-NGF, активують антиапоптозні клітинні відповіді [39]. Співвідношення між зрілим NGF- і pro-NGF відіграє вирішальну роль у збалансуванні рівня виживаності та смертності клітин [40]. Ке Чжан та ін. [18] повідомили про зменшення утворення пухлин і подовження тривалості життя мишей, які отримували добавкуЦистанхеdeserticolaекстракт. Нейропротекторні ефектиЦистанхеdeserticolaекстракту про травму, спричинену нейротоксинами, повідомлялося раніше [41]. Сюань і Лю та ін. [42] повідомили про покращення імунної функції, пам’яті, навчання та антиоксидантної дії у мишей, які отримували добавкуЦистанхеdeserticolaекстракт. Додавання екстракту Cistanche deserticola знижувало MDA та підвищені рівні GPx і SOD у моделі щурів з ішемією та реперфузією. Крім того, спостерігалося зниження регуляції каспази -3 із супутнім збільшенням співвідношення bax/BCL-2 [43], що узгоджується з нашими висновками, які демонструють знижені рівні окислювальних, запальних і апоптотичних маркерів у спинномозковому травма пуповини щурів, доповненаЦистанхеdeserticolaекстракт.

5. Висновок

Загалом, кількісний аналіз виявив наявність олігосахаридів, актеозиду, ехінакозиду та 8-епілоганової кислоти вЦистанхеdeserticolaекстракт.Запалення, маркери окисного стресу та апоптозу були значно знижені у щурів із травмою спинного мозку, які отримували олігосахариди з екстракту Cistanche deserticola.

Обмеження дослідження

Це дослідження, хоча і виявляє протипухлинну та протизапальну дію,Цистанхеdeserticolaекстракт має деякі обмеження. Ми не оцінювали гострий ефектЦистанхеdeserticolaекстракт на пухлину ізапаленняпри травмі спинного мозку.

Фінансування

Це дослідження підтримано Національним фондом природничих наук Китаю (гранти № 31370984, 81501879, 31870961, GZ1219), Департаментом науки і технологій провінції Сичуань (№ 2015HH004), науково-дослідним проектом Комісії з охорони здоров’я та планування сім’ї провінції Сичуань (№ 100097).

Конкуруючі інтереси

Усі автори заявляють, що не мають конкуруючих інтересів.

Внески авторів

Хун Чжан, Чжоу Сян, Сінь Дуань і Хуан Лі Цзян провели експерименти та написали рукопис. І Мін Сін, Чен Чжу та Цян Сонг збирали огляди літератури, проводили аналіз вихідних даних та інтерпретацію даних. Цінь Жун Юй переглянув інтелектуальний зміст рукопису.

З: ' Протипухлинна іанти-запальнийефекти олігосахаридів відЦистанхеdeserticolaвитяг про травму спинного мозку' поХун Чжан та ін

---H. Zhang та ін. / Міжнародний журнал біологічних макромолекул 124 (2019) 360–367

Список літератури

[1] MO Krucoff, S. Rahimpour, MW Slutzky, VR Edgerton, DA Turner, Посилення відновлення нервової системи за допомогою нейробіології, навчання нейронного інтерфейсу та нейрореабілітації, Front. Неврологія. 10 (2016) 584.
[2] TY Yune, JY Lee, MH Jiang, DW Kim, SY Choi, TH Oh, Системне введення злитого білка PEP-1-SOD1 покращує функціональне відновлення шляхом інгібування загибелі нейрональних клітин після травми спинного мозку, Free Radic. Biol. Мед. 45 (2008) 1190–1200.

[3] SM Lee, TY Yune, SJ Kim, DW Park, YK Lee, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocycline зменшує загибель клітин і покращує функціональне відновлення після травматичного пошкодження спинного мозку у щурів, J. Neurotrauma 20 (2003) 1017–1027.

[4] F. Bao, D. Liu, Пероксинітрит, що утворюється в спинному мозку щурів, викликає загибель нейронів і неврологічний дефіцит, Neuroscience 115 (2002) 839–849.

[5] L. Qin, Y. Liu, T. Wang, SJ Wei, ML Block, B. Wilson, B. Liu, JS Hong, НАДФН-оксидаза опосередковує індуковану ліпополісахаридом нейротоксичність і прозапальну експресію генів в активованій мікроглії, J. Biol . Chem. 279 (2004) 1415–1421.
[6] ML Block, JS Hong, Microglia andзапалення-опосередкована нейродегенерація: кілька тригерів із загальним механізмом, Prog. нейробіол. 76 (2005) 77–98.
[7] KJ Min, HK Pyo, MS Yang, KA Ji, I. Jou, EH Joe, Гангліозиди активують мікроглію через протеїнкіназу C і NADPH оксидазу, Glia 48 (2004) 197–206.
[8] Дж. Хусейн, М. Ель-Банна, Т. А. Разік, М. Е. Ель-Наггар, Біосумісні нанокристали оксиду цинку, стабілізовані за допомогою гідроксиетилцелюлози для пом’якшення діабетичних ускладнень, Int. J. Biol. Macromol. 107 (Pt A) (2018) 748–754.
[9] TY Yune, JY Lee, GY Jung, SJ Kim, MH Jiang, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Міноциклін полегшує загибель олігодендроцитів шляхом пригнічення виробництва фактора росту пронервів у мікроглії після травми спинного мозку, J. Neurosci. 27 (2007) 7751–7761.
[10] GQ Sheng, JR Zhang, XP Pu, J. Ma, CL Li, Захисний ефект вербаскозиду на нейротоксичність, спричинену іонами 1-метил-4-фенілпіридинію, у клітинах PC12, Eur. J.Pharmacol. 451 (2002) 119–124.
[11] Y. Jiang, PF Tu, Аналіз хімічних складових у видах Cistanche, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970–1979.
[12] К.А. Ку, С.Г. Сунг, Дж.Х. Парк, С.Х. Кім, К.Й. Лі, Ю.К. Кім, Нейропротекторна активність фенілетаноїдних глікозидів з Callicarpa dichotoma in vitro, Planta Med. 71 (2005) 778–780.
[13] Q. Dong, J. Yao, JN Fang, K. Ding, Структурна характеристика та імунологічна активність двох екстрагованих холодною водою полісахаридів зЦистанхеdeserticolaYC Ma, Carbohydr. рез. 342 (2007) 1343–1349.
[14] LW Lin, HT Lin, FH Tsai, WH Wang, CR Wu, Антиноцицептивна та протизапальна активність, викликанаЦистанхеdeserticolaу гризунів, J. Ethnopharmacol. 83 (2002) 177–182.
[15] J. Hussein, M. El-Bana, E. Refaat, ME El-Naggar, Синтез наноемульсії на основі карвакролу для лікування нейродегенеративних розладів при експериментальному діабеті, J. Funct. Продукти харчування 37 (2017) 441–448.
[16] M. Sakanaka, P. Zhu, B. Zhang, TC Wen, F. Cao, YJ Ma, K. Samukawa, N. Mitsuda, J. Tanaka, M. Kuramoto, H. Uno, R. Hata, внутрішньовенне інфузія дигідрогінзенозиду Rb1 запобігає компресійному пошкодженню спинного мозку та ішемічному пошкодженню головного мозку шляхом підвищення регуляції VEGF і Bcl-xL, J. Neurotrauma 24 (2007) 1037–1054.
[17] S. Naruo, K. Okajima, Y. Taoka, M. Uchiba, T. Nakamura, H. Okabe, K. Takagi, Простагландин E1 зменшує пошкодження спинного мозку, спричинене компресійною травмою, у щурів, головним чином, шляхом пригнічення активації нейтрофілів, J Нейротравма 20 (2) (2003) 221–228.
[18] K. Zhang, X. Ma, W. He, H. Li, S. Han, Y. Jiang, H. Wu, L. Han, T. Ohno, N. Uotsu, K. Yamaguchi, Z. Ma , П. Ту, Витяги зЦистанхеdeserticolaможе протидіяти імуностарінню та подовжувати тривалість життя мишей, схильних до прискореного старіння 8 (SAM-P8), Evid. На основі доповнення. Альтернативний. Мед. 2014 (2014), 601383.
[19] T. Kaddour, K. Omar, AT Oussama, H. Nouria, B. Iméne, A. Abdelkader, Алюмінійіндукована гостра нейротоксичність у щурів: лікування водним екстрактом Arthrophytum (Hammada scoparia), J. Acute Dis. 5 (6) (2016) 470–482.
[20] Т.В. Арутюнян, А.Ф. Користова, Л.Н. Кублік, М.Х. Левітман, В.В. Шапошнікова, Ю.Н. Користов Таксіфолін і фукоїдан усувають радіаційне підвищення продукції активних форм кисню в аорті щурів // Бюл. Exp. Biol. Мед. 160 (2016) 635–638.
[21] M. Erden Inal, A. Akgün, A. Kahraman, Вплив екзогенного глутатіону на знижений рівень глутатіону, активність глутатіонпероксидази та глутатіонредуктази щурів різного віку та статі після Γ-опромінення всього тіла, J. ​​Am. . Старіння доц. 26 (2003) 55–58.
[22] J. Tavakkol Afshari, N. Ghomian, A. Shameli, MT Shakeri, MA Fahmidehkar, E. Mahler, R. Khoshnavaz, M. Emadzadeh, Determination of Interleukin-6 and Tumor Necrosis Factor-альфа концентрації в Ірансько-хорасанські пацієнти з прееклампсією, BMC Вагітність Пологи 5 (2005) 14.
[23] D. Medhat, J. Hussein, ME El-Naggar, MF Attia, M. Anwar, YA Latif, HF Booles, S. Morsy, AR Farrag, WKB Khalil, Z. El-Khayat, Effect of Au-dextran NPS як протипухлинний засіб проти EAC та солідної пухлини у мишей шляхом біохімічних оцінок та гістопатологічних досліджень, Biomed. Фармакотер. 91 (2017) 1006–1016.
[24] TI Shaheen, MI El-Naggar, JS Hussein, M. El-Bana, E. Emara, Z. El-Khayat, MMG Fouda, H. Ebaid, A. Hebeish, Антидіабетична оцінка; Дослідження in vivo золота та срібно-золотих наночастинок ядра-оболонки на діабетичних щурах, індукованих стрептозотоцином, Biomed. Фармакотер. 83 (2016) 865–875.
[25] Ю.Дж. Мун, Дж.Й. Лі, М.С. О, Ю.К. Пак, К.С. Парк, Т.Х. О, Т.Ю. Юн, Інгібіціязапаленняі окислювальний стрес завдяки екстракту кореня ангеліки даурської зменшує апоптозну загибель клітин і покращує функціональне відновлення після травми спинного мозку, J. Neurosci. рез. 90 (1) (2012) 243–256.
[26] E. Lobos, C. Gebhardt, A. Kluge, K. Spanel-Borowski, Експресія ізоформ фактора росту нервів (NGF) у матці щурів під час вагітності: накопичення попередника proNGF, Endocrinology 146 (4) (2005) 1922–1929 роки.
[27] Дж. Лю, Е. Хед, А. М. Гаріб, В. Юань, Р. Т. Інгерсолл, Т. М. Хаген, Ч. В. Котман, Б. Н. Еймс, Втрата пам’яті у старих щурів пов’язана з мітохондріальним розпадом мозку та окисленням РНК/ДНК: часткова реверсія годування ацетил-L-карнітином та/або R-_-ліпоєвою кислотою, Proc. Natl. акад. Sci. США 99 (2002) 2356–2361.
[28] ZD Nan, KW Zeng, SP Shi, MB Zhao, Y. Jiang, PF Tu, Фенілетаноїдні глікозиди з протизапальною дією зі стебелЦистанхеdeserticolaкультивується в пустелі Тарім, Fitoterapia 89 (2013) 167–174.
[29] XM Wu, XM Gao, KWK Tsim, PF Tu, арабіногалактан, виділений із стебелЦистанхеdeserticolaіндукує проліферацію культивованих лімфоцитів, Int. J. Biol. Macromol. 37 (2005) 278–282.
[30] M. Deng, JY Zhao, PF Tu, Y. Jiang, ZB Li, YH Wang, Echinacoside рятує нейрональні клітини SHSY5Y від TNF-альфа-індукованого апоптозу, Eur. J. Pharmacol. 505 (2004) 11–18.
[31] X. Geng, X. Tian, ​​P. Tu, X. Pu, Нейропротекторні ефекти ехінакозиду в мишачій MPTP моделі хвороби Паркінсона, Eur. J. Pharmacol. 564 (2007) 66–74.

[32] L. Nan, W. Jianping, M. Jun, G. Zhiqiang, J. Chao, Y. Lie, F. Xiaojie, Нейропротекторні ефекти терапії цистанхами травою на пацієнтів із помірною хворобою Альцгеймера, Evid. На основі доповнення. Альтернативний. Мед. (2015) 103985.

[33] M. Hausmann, F. Obermeier, DH Paper, K. Balan, N. Dunger, K. Menzel, K. Rogler, In vivo лікування рослинним фенілетаноїдом актеозидом покращує роботу кишечниказапаленняпри коліті, спричиненому декстрансульфатом натрію, Clin. Exp. Immunol. 148 (2) (2007) 373–381.

[34] SY Nam, HY Kim, MS Yoou, AH Kim, BJ Park, HJ Jeong, HM Kim, Протизапальні ефекти ізоактеозиду з Abeliophyllum distichum, Immunopharmacol. Імунотоксикол. 37 (3) (2015) 258–264.
[35] KH Kim, S. Kim, MY Jung, IH Ham, WK Whang, Протизапальні фенілпропаноїдні глікозиди з листя Clerodendron trichotomum, Arch. фарм. рез. 32 (1) (2009) 7–13.
[36] R. Zhou, X. Shi, Y. Gao, N. Cai, Z. Jiang, X. Xu, Протизапальна активність гулуронатних олігосахаридів, отриманих шляхом окисної деградації з альгінату в клітинах мишачого макрофага RAW 264.7, активованих ліпополісахаридом, Дж. Агрік. Харчова хім. 14;63 (1) (2015) 160–168.
[37] W. Wang, P. Liu, C. Hao, L. Wu, W. Wan, X. Mao, Неоагароолігосахаридні мономери інгібуютьзапаленняв LPS-стимульованих макрофагах через пригнічення шляхів MAPK і NF-κB, Sci. Доповідь 7 (7) (2017), 44252.
[38] M. Fahnestock, B. Michalski, B. Xu, MD Coughlin, Фактор росту пронервів-попередників є переважною формою фактора росту нервів у мозку, і його кількість збільшується при хворобі Альцгеймера, Mol. Стільниковий. Неврологія. 18 (2001) 210–220.
[39] Р. Лі, П. Кермані, К. К. Тенг, Б. Л. Хемпстед, Регуляція виживання клітин секретованими пронейротрофінами, Science 294 (2001) 1945–1948.
[40] MV Chao, M. Bothwell, Нейротрофіни: розщеплювати чи не розщеплювати, Neuron 33 (2002) 9–12.
[41] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, Гепатопротекторна активність фенілетаноїдів зЦистанхеdeserticola, Planta Med. 64 (2) (1998) 120–125.
[42] GD Xuan, CQ Liu, Дослідження впливу фенілетаноїдних глікозидів (PEG) наЦистанхеdeserticolaпро попередження старіння у старих мишей, індукованого D-галактозою, J. Chin. Мед. Матер. 31 (9) (2008) 1385–1388.
[43] Q. Yu, X. Li, X. Cao, Кардіопротекторні ефекти екстракту, багатого фенілетаноїдними глікозидами зЦистанхеdeserticolaв індукованому ішемією-реперфузією інфаркті міокарда у щурів, Ann. Vasc. Surg. 34 (2016) 234–242.