Анотація

Передумови/Цілі:Олігосахариди гіалуронану (ГА) беруть участь у кількох біологічних процесах, насамперед у ремоделюванні колагену та загоєнні ран. Ремоделювання колагену сповільнюється під час старіння шкіри та викликає зморшки. Це дослідження мало на меті оцінити вплив 2-kDa олігосахаридів НА (HA2k) на зморшки шляхом проникнення через роговий шар шкіри та сприяння ремоделюванню колагену.

Глікозид цистанхи може також підвищувати активність СОД у тканинах серця та печінки та значно знижувати вміст ліпофусцину та МДА в кожній тканині, ефективно поглинаючи різні реактивні кисневі радикали (OH-, H₂O₂ тощо) та захищаючи від пошкодження ДНК, спричиненого ОН-радикалами. Фенілетаноїдні глікозиди Cistanche мають сильну здатність поглинати вільні радикали, вищу відновну здатність, ніж вітамін С, покращують активність СОД у суспензії сперми, знижують вміст МДА та мають певний захисний ефект на функцію мембрани сперми. Полісахариди цистанхе можуть підвищувати активність SOD і GSH-Px в еритроцитах і легеневих тканинах експериментально старіючих мишей, викликаних D-галактозою, а також знижувати вміст MDA і колагену в легенях і плазмі і підвищувати вміст еластину, мають хороша очищувальна дія на DPPH, подовжує час гіпоксії у старіючих мишей, покращує активність СОД у сироватці та затримує фізіологічну дегенерацію легенів у експериментально старіючих мишей. Експерименти показали, що цистанша має хорошу антиоксидантну здатність до клітинної морфологічної дегенерації. і має потенціал бути лікарським засобом для запобігання та лікування хвороб старіння шкіри. У той же час ехінакозид у Cistanche має значну здатність поглинати вільні радикали DPPH і має здатність поглинати активні форми кисню та запобігати індукованій вільними радикалами деградації колагену, а також має хороший ефект відновлення при пошкодженні аніонів вільних радикалів тиміну.

Натисніть, щоб переглянути продукти з антиоксидантами

【Для отримання додаткової інформації: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Методи:Для оцінки проникнення міченого флуоресцеїном HA2k використовували 3D-модель шкіри та вирізану шкіру людини. Вплив HA2k на метаболізм колагену оцінювали шляхом вимірювання рівня білка проколагену 1 типу (COL1A1) і матриксної металопротеїнази-1 (MMP-1) у 3D-моделі шкіри. 0.1-відсотковий розчин HA2k і контрольний носій наносили на передпліччя людини протягом 8 тижнів для оцінки щільності дермального колагену. Щоб оцінити вплив HA2k на глибину мімічних зморшок, було проведено рандомізоване контрольоване дослідження з використанням 0.1% лосьйону HA2k і лосьйону для транспортування протягом 8 тижнів.

Результати:Флуоресцентна мікроскопія підтвердила, що HA2k проникає через роговий шар. Як COL1A1, так і MMP-1 було посилено за допомогою програми HA2k у культурі 3D-моделі шкіри. Через 4 тижні щільність колагену була вищою для передпліччя, обробленого HA2k, ніж для передпліччя, обробленого носієм. Максимальна глибина зморшок в області носогубних складок і гусячих лапок була значно меншою в групі лосьйону HA2k, ніж у контрольній групі.

Висновок:HA2k проникав у роговий шар шкіри, активував синтез і деградацію колагену одночасно, а також зменшив зморшки.

КЛЮЧОВІ СЛОВА

проти старіння, культура клітин, ремоделювання колагену, дослідження на людях, гіалуронан

1|ВСТУП

Позаклітинний матрикс (ECM) — це склад макромолекул, включаючи білки та глікозаміноглікани, який забезпечує механічну підтримку навколишніх клітин. У дермальній тканині ECM впливає на фізичні властивості шкіри. Наприклад, колаген, основний компонент дермального ECM, сприяє цілісності, еластичності та гладкості шкіри.1 Фізіологічно колаген шкіри підтримується шляхом деградації старого колагену та повторного синтезу нового колагену в процесі, який називається колагеном. ремоделювання.2 Однак цикл ремоделювання колагену може сповільнюватися під час старіння шкіри, що призводить до появи зморшок, в’ялості та зниження еластичності.3 Ці проблеми суттєво пов’язані з тим, що уявний вік людини перевищує фактичний. Таким чином, ремоделювання колагену є перспективною мішенню для боротьби зі старінням. Підхід, який потенційно націлений на ECM, може бути кращим для вирішення цих проблем, оскільки поверхневі підходи не впливають на ECM. Мікронідлінг - це спосіб, який націлює ECM на сприяння ремоделюванню колагену шкіри; однак це відносно інвазивний метод.

Гіалуронан (ГК), полісахарид біологічного походження, також є компонентом ECM. ГК вперше виявили в склоподібному тілі ока, а пізніше в синовіальній рідині, пуповині та шкірі. Молекулярна маса ГК різниться залежно від типу тканини та її біологічного стану, коливаючись від 1 кДа до 3000 кДа.4 ГК у шкірі зазвичай існує у стані з високою молекулярною масою, і завдяки своїй високій в’язкопружності та водо- здатність утримувати, ГК виконує функції амортизації, мастила та зволожувача. Тому високомолекулярна ГК використовується в косметиці для підтримки вмісту води в роговому шарі. Оскільки макромолекули мають дуже обмежену проникність через шкіру, були спроби покращити проникність ГК шляхом розкладання ГК на невеликі фрагменти, які, як було підтверджено, проникають через роговий шар5.

На додаток до фізичної функції, біологічна функція ГК була нещодавно темою дослідження. Було опубліковано кілька важливих звітів про біологічну функцію ГК як компонента ніші стовбурових клітин6 і надзвичайне довголіття голих землекопів. При обговоренні її біологічних функцій необхідно враховувати молекулярну масу ГК. ГК у шкірі зазвичай існує у стані з високою молекулярною масою і, як повідомляється, підтримує стабільність тканини. На відміну від цього, низькомолекулярна ГК активує декілька біологічних процесів.7 У попередніх звітах тетрасахарид ГК посилював синтез ГК і колагену типу I у спільно культивованих кератиноцитах і фібробластах,8 індукував маркери диференціювання в кератиноцитах9 та зменшував пошкодження в миші, опромінені ультрафіолетом А.5 Зокрема, олігосахариди нижче 10 кДа в основному сприяють процесам загоєння ран, таким як синтез ECM,9 ангіогенез, клітинна міграція та проліферація. Загоєння ран і ремоделювання колагену тісно пов’язані, і 12-мер (тобто приблизно 2 кДа) ГК посилює регуляцію колагену типу I та матриксної металопротеїнази 1 (ММР-1) одночасно в культивованих фібробластах, але ефект на людей ще належить з'ясувати.

Було кілька повідомлень про косметичні засоби з ГК, які показали ефект проти зморшок. Крем для шкіри з 50-kDa HA зменшив глибину зморшок у жінок віком 30–60 років у рандомізованому порівняльному дослідженні.10 Відкрите дослідження показало, що мікронізований HA крем наносили місцево на 35 –65-річних суб’єктів, що призвело до покращення результатів опитування щодо глибини зморшок.11 У цих дослідженнях було запропоновано механізм дії високої проникності низькомолекулярної ГК, хоча й було Немає даних про шкіру людини. Крім того, вплив фрагментів НА на щільність колагену у людей ще належить з’ясувати.

Ми припустили, що олігосахариди ГК проникають крізь роговий шар, сприяють ремоделюванню колагену та зменшують зморшки як ефект проти старіння. Це дослідження мало на меті оцінити вплив 2-kDa HA (HA2k) на ремоделювання колагену та стан шкіри за допомогою досліджень in vitro та in vivo. Спочатку оцінювали проникнення HA2k у відновлену модель шкіри та вирізану шкіру людини. Згодом вплив на ремоделювання колагену оцінювали in vitro та на людях. Нарешті, рандомізоване напівстороннє порівняння лосьйону для шкіри, що містить HA2k, і контрольного лосьйону було проведено серед 21 суб’єкта для оцінки впливу на зморшки шкіри.

2|МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ

Це дослідження було проведено Гельсінкською декларацією та схвалено Комітетом з медичної етики Kewpie Corp. та DERMAPRO Ltd. Institutional Review Board із номерами схвалення 17–4 та 1-220 777-AN-02-DICN18228 відповідно . Це дослідження проводилося за добровільною згодою піддослідних.

2.1|Реактиви

HAbooster™, косметичний реагент HA2k, був отриманий від Kewpie Corp. (Японія).

2.2|Проникнення HA2k через шкіру в тривимірному культивованому епідермісі людини та вирізаній шкірі людини

Відповідно до попереднього звіту проникнення HA2k оцінювали за допомогою дифузійної кювети типу Франца.12 Зразки міченої флуоресцеїном (Fl-) HA готували при<1.25 mg/ml HA in water and dimethyl sulfoxide mixed at a ratio of 2:1 (v:v). Next, 50 mg/ml each of 5-amino fluorescein, cyclohexyl isocyanide, and acetaldehyde was added to bind fluorescein to HA. After 5 h of reaction at room temperature in the dark, the sample was purified by gel filtration chromatography using a PD Midi Trap G-10 (GE Healthcare,) with an exclusion lower limit of 700 M r. The obtained FL-HA solution was lyophilized and used in the following experiments. For evaluation with reconstituted skin by cell culture, a 3D skin model EPI-606X (Mat Tek,), which was confirmed to retain barrier function, was fixed in a Franz-type diffusion cell. The three-dimensional (3D) skin model was precultured for 16–18 h at 37°C, 5% CO2 in the medium provided by the supplier. After the equilibration process, the medium was changed for testing. A 1% solution of Fl-HA samples of 2 or 8 kDa was applied to the upper compartment and then incubated for 5 h. After washing four times with phosphate-buffered saline, the specimen was embedded in OCT compound (Sakura Finetek,) and frozen by using dry ice/acetone for the preparation of the tissue section. For evaluation on human skin, dermatomed abdominal skin from a 34-year-old Caucasian woman (Biopredic International, France) was fixed in a Franz-type diffusion cell. A 0.1% Fl-HA solution (molecular weight, 2 or 1000 kDa) was applied to the human skin. After incubation at 32°C for 24 h, the tissue was subjected to cryosection preparation as described above. The tissue slides were observed under a fluorescent microscope.

2.3|Оцінка метаболізму колагену в 3D-моделі шкіри та вирізаній шкірі людини

Для оцінки впливу HA2k на метаболізм колагену використовували 3D-модель шкіри.13 Коротше кажучи, модель повної товщини (EFT-412, Mat Tek), що включає кератиноцити та фібробласти, культивували в 8 мкг/мл HA2k- містить середовище. Через 48 годин збирали кондиціоноване середовище та вимірювали імуноферментним аналізом (ELISA) рівні проколагену 1 типу (COL1A1) і MMP-1. Тканина оброблена на імуногістологічне дослідження. Колаген у тканинах оцінювали за допомогою імуногістохімічного фарбування COL1A1 на слайдах тканини фіксованих формаліном зрізів, залитих парафіном. Зрізи обробляли протеїназою К протягом 10 хвилин при 37 градусах для отримання антигену. Після блокування моноклональні антитіла проти COL1A1 (Abcam) інкубували при 4 градусах протягом ночі. Потім слайди інкубували з Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Rabbit IgG (Abcam) при кімнатній температурі протягом 2 годин. Ядро забарвлювали пропідій йодидом. Зрізи спостерігали під флуоресцентним мікроскопом.

2.4|Оцінка щільності колагену шкіри, вологості та томографія у людей

HA2k місцево наносили на шкіру людини, щоб оцінити його функцію як активного інгредієнта. Вісім учасників (дві жінки та шість чоловіків; вік 26–39 років) добровільно взяли участь у дослідженні. Їхні передпліччя розділили на дві зони розміром 2 см × 2 см для зразків, які потрібно наносити двічі на день. 0.1 відсоток розчину HA2k і контроль транспортного засобу застосовувалися окремо до двох областей. Через 0, 4 і 8 тижнів оцінювали рівень колагену, вологість шкіри та шорсткість шкіри. Суб’єкти акліматизувалися в контрольованій атмосфері при 23 градусах ± 1 градус і відносній вологості 55 відсотків ± 2 відсотки протягом 20 хвилин. Цей період акліматизації супроводжувався вимірюванням.

2.5|Оцінка балів колагену

Ультразвук використовувався для вимірювання щільності колагену шкіри (DermaLab, Cortex Technology, Данія).14 Зонд був застосований до лосьйону HA2k і контрольних місць транспортного засобу для вимірювання балів колагену. Загалом було виміряно п’ять точок, що складаються з чотирьох кутів і центру кожної ділянки, і розраховано середнє значення.

2.6|Оцінка вологості шкіри

Вологість шкіри вимірювали за допомогою імпедансного методу (SKICON, Yayoi).15 Зонд приклали до місця оцінки для вимірювання вологості шкіри. Загалом було виміряно п’ять точок у чотирьох кутах і в центрі. Розраховано середнє значення.

2.7|Оцінка шорсткості шкіри

Шорсткість шкіри вимірювалася за допомогою візуального аналізу (VisioScan, Courage plus Khazaka Electronic, Німеччина).16 Зображення були отримані в чотирьох кутах і проаналізовані за допомогою програмного забезпечення. Розраховано середнє значення.

2.8|Оцінка зморшок, провисання та еластичності шкіри у людей

Враховуючи, що дермальний колаген, як повідомляється, пов’язаний із зморшкуватістю, в’ялістю та еластичністю шкіри, було оцінено застосування HA2K у косметичних продуктах. Двадцять один суб’єкт був зареєстрований відповідно до наступних критеріїв: здорові жінки з легкими та помірними зморшками за візуальною та фотографічною оцінкою від 1 до 3 ступеня зморшок відповідно до вказівок Японського косметичного наукового товариства щодо класифікації зморшок, носогубні складки, жодна з них не вагітна. не годуюча, не має чутливості та гіперчутливості шкіри. Протягом цього періоду тестування суб’єкти не використовували жодних косметичних засобів, косметичних засобів або процедур по догляду за шкірою, окрім досліджуваного продукту. Зразки продуктів, надані у вигляді лосьйону, наносили двічі на день (вранці та ввечері). Рецептури лосьйонів наведені в таблиці 1. Після миття обличчя наносили лосьйони, а потім призначений молочний лосьйон і крем, якщо необхідно. На одну сторону наносили лосьйон HA2k, а на іншу – контрольний продукт. Суб’єкти були обстежені за допомогою системи аналізу 3D-зображень для оцінки «гусячих лапок», носогубної складки, в’ялості шкіри та еластичності на початковому рівні (0 тижнів), через 4 тижні та 8 тижнів після лікування. Усі вимірювання проводилися за заданої відносної температури (20–24 градуси) і вологості (45–55 відсотків).

2.9|Вимірювання параметрів зморшок

Параметри зморшок гусячих лапок і носогубної складки оцінювали за допомогою візуального аналізу (PRIMOS® Premium and Lite, GFMesstechnik).17 Зображення аналізували в тій самій області на початковому рівні, через 4 і 8 тижнів після лікування за допомогою програмного забезпечення (Primos 5.8 E вер.).

2.10|Вимірювання еластичності шкіри

Еластичність шкіри вимірювали методом відсмоктування (Cutometer® MPA580, Courage plus Khazaka electronic,) відповідно до попереднього звіту.18 Коротше кажучи, шкіру втягували в отвір зонда під тиском 450 бар протягом 2 секунд. Згодом негативний тиск вимкнули на 2 с, і шкірі дозволили повернутися до початкової форми. Виконували три повторення в одному циклі вимірювання. Еластичність шкіри на щоках аналізували за параметрами R2 на початковому етапі, через 4 і 8 тижнів після лікування.

2.11|Вимірювання провисання шкіри

Провисання шкіри на щоці оцінювали за допомогою методу топографії Муару (F-ray®, Beyoung),19 який є тривимірним морфометричним методом, у якому контурні карти створюються з інтерференційних смуг, що перекриваються, створених, коли об’єкт освітлюється когерентне світло. Було взято муаровий візерунок на щоці, і кут, створений малюванням двох ліній на кінці носа, був проаналізований за допомогою програмного забезпечення (Image-Pro Plus®, MediaCybernetics,) на початковому рівні, через 4 і 8 тижнів після лікування.

2.12|Статистичний аналіз

Статистичний аналіз проводили за допомогою програмного забезпечення SPSS® (IBM). Для оцінки впливу HA2k на ремоделювання колагену in vitro було проведено U-тест Манна-Уітні. Вплив HA2k на колаген у людей аналізували за допомогою парного t-тесту. У дослідженнях на людях, які оцінювали вплив HA2k на зморшки, в’ялість і еластичність шкіри, для перевірки нормальності використовувався тест Шапіро–Вілкса або ексцес і перекіс. Статистичний аналіз параметричних змінних проводили за допомогою повторних вимірювань ANOVA. Якщо значення було непараметричним, усі спочатку порівнювалися за допомогою критерію знакового рангу Вілкоксона з поправкою Бонферроні. Статистичний аналіз для порівняння між сайтами проводили за допомогою повторних вимірювань ANOVA або ANCOVA з використанням значення варіації від базової лінії до 4 і 8 тижнів після лікування. P-значення<0.05 was considered to be indicative of statistical significance. Change from baseline (%)   was defined as follows: (Baseline − After treatment)/Baseline × 100.

3|РЕЗУЛЬТАТИ

3.1|Проникнення через шкіру HA2k

У 3D-моделі шкіри HA2k, мічений флуоресцеїном, проходив через роговий шар (рис. 1), тоді як HA 8-kDa ні. У шкірі людини HA2k, мічений флуоресцеїном, проник у дерму. 1000- кДа ГК не проходила через роговий шар. Ці результати вказують на те, що порівняно з ГК з більшою молекулярною масою, ГК2k має високу дермальну проникність.

3.2|Вплив HA2k на метаболізм колагену

У 3D-моделі шкіри вміст білка як COL1A1, так і MMP-1 у кондиціонованому середовищі підвищувався шляхом додавання HA2k (рис. 2). Тому припускали, що HA2k одночасно сприяє виробленню COL1A1 і MMP-1.

3.3|Вплив HA2k на вміст колагену та стан шкіри у людей

У дослідженнях на людях показники шкірного колагену були вищими через 4 тижні на місці, де було застосовано 0,1% розчину HA2k, ніж на місці, де було нанесено контрольний розчин (рис. 3). Крім того, стан вмісту води в шкірі та шорсткість шкіри були кращими через 8 тижнів на місці, обробленому розчином HA2k, ніж на місці, обробленому контрольним розчином. Тому було висловлено припущення, що HA2k сприяє виробленню колагену в шкірі людини та покращує її стан.

3.4|Вплив HA2k на зморшки, провисання та еластичність шкіри у людей

У тесті на людях максимальна глибина гусячих лапок і носогубних зморшок була нижчою через 4 тижні та 8 тижнів на боці, обробленому 0.1% лосьйоном HA2k, ніж на боці, обробленому контрольним лосьйоном (рис. 4). . Через 4 тижні в’ялість шкіри зменшилася на стороні, яка отримувала лосьйон HA2k, ніж на початковому рівні. Еластичність шкіри покращилася через 4 і 8 тижнів на стороні, обробленій лосьйоном HA2k, тоді як вона покращилася лише через 8 тижнів на стороні, обробленій контрольним лосьйоном. Ці результати свідчать про те, що лосьйон HA2k зменшив зморшки, в’ялість і еластичність шкіри.

4|ОБГОВОРЕННЯ

Повідомлялося, що носогубна складка є одним із найсильніших факторів, які впливають на різницю між фактичним і уявним віком людини. Ін'єкція філера - поширений спосіб поліпшення носогубної складки; однак ефект і безпека залежать від техніки лікарів. Повідомлялося про деякі серйозні побічні ефекти ін’єкцій, спричинені оклюзією судин, що призвело до некрозу шкіри та сліпоти.20 HA2k є безпечнішим і менш інвазивним варіантом покращення носогубної складки. Крім того, у цьому дослідженні HA2k був протестований як складений лосьйон і мав бути більш практичним активним косметичним інгредієнтом (ACI).

Носогубна складка виникає внаслідок старіння дерми, і її важко виправити, підійшовши лише до верхнього шару епідермісу. Щоб доставити ACI в більш глибокі шари, такі як епідерміс і дерма, необхідно проникнути через роговий шар. Раніше,<300-kDa HAs have been shown to permeate through the stratum corneum of excised human skin.21 It is, therefore, reasonable that HA2k permeates through the stratum corneum. Interestingly,   a 1200-kDa HA has been reported to permeate through the stratum corneum of excised skin when polyion complex particles were constructed with a specific polycation.22 It is suggested that higher transdermal absorption of HA2k would be achieved by optimizing the formulation.

Деякі звіти стверджують, що ACI активізують синтез колагену. Раніше ми повідомляли про такі ACI, включаючи тетрасахариди HA, 8 пептиди сої та пептиди колагену. HA2k є унікальним, оскільки він регулює синтез і деградацію колагену одночасно. У майбутніх дослідженнях необхідно з’ясувати механізм підвищення регуляції COL1A1 і MMP-1.

Повідомлялося, що низькомолекулярна ГК індукує запалення шкіри23; однак механізм дії залишається спірним. Інше дослідження з використанням відновленого епідермісу показало, що низькомолекулярна ГК викликає запалення.24 У нашому дослідженні на людях не спостерігалося жодних побічних ефектів, включаючи симптоми запалення. Низькомолекулярні можуть індукувати запальний сигнал тільки in vitro, без дерми. У більш складних умовах, таких як шкіра людини, між різними клітинами тканин виникають перехресні перешкоди, і сигналізація запалення скасовується. Слід зазначити, що нещодавнє дослідження показало, що ендогенна фрагментація ГК індукує запальні реакції, тоді як екзогенні низькомолекулярні ГК (2800– 60 000 Да) ні.25

Концентрація HA2k, використана в цьому дослідженні на людях, становила 0,1 відсотка, але її оптимальну дозу ще потрібно з’ясувати. HA2k можна використовувати ширше, якщо нижчі дози ефективні. Крім того, у поєднанні з ГК з вищою молекулярною вагою можна було б розробити більш ефективну косметику для боротьби зі старінням, оскільки більші ГК є кращими зволожувачами.4 ГК-2k все ще є відносно економічно ефективним матеріалом для зменшення зморшок, оскільки його не вводять внутрішньовенно. лікар.

5|ВИСНОВОК

У цьому дослідженні ми досліджували вплив HA2k на зменшення шкірних зморшок шляхом місцевого нанесення на шкіру людини. Носогубна складка та гусячі лапки були значно покращені за допомогою 0.1% лосьйону HA2k. Першим кроком запропонованого механізму є проникнення HA2k через роговий шар, що ми підтвердили, виконавши експеримент проникнення в 3D-моделі шкіри та вирізаній шкірі людини. Другим етапом механізму є активація ремоделювання колагену за допомогою HA2k, яку ми продемонстрували, виконавши ELISA на COL1A1 і MMP-1 у 3D-моделі шкіри та за допомогою ультразвукового аналізу щільності колагену в пілотному дослідженні на людях предметів. У сукупності HA2k є перспективним інгредієнтом для косметики проти старіння.

АВТОРСЬКИЙ ВНЕСОК

YA та YT розробили дослідження. YA, HK і MK провели досліди. YA та SS проаналізували дані, а SS написав рукопис під наглядом TY. Усі автори прочитали та схвалили остаточний рукопис.

ПОДЯКА

Допомогу в написанні наукових робіт надала Crimson Interactive Pvt. ТОВ

КОНФЛІКТ ІНТЕРЕСІВ 

YT і MK заявляють, що не мають конкуруючих інтересів. YA, SS і HK є співробітниками Kewpie Corporation, постачальника HA.

ЗАЯВА ПРО НАЯВНІСТЬ ДАНИХ

Дані, які підтверджують висновки цього дослідження, доступні у відповідного автора за розумним запитом.

ЕТИЧНЕ СХВАЛЕННЯ

Це дослідження було проведено Гельсінкською декларацією та схвалено Комітетом з медичної етики Kewpie Corp. та DERMAPRO Ltd. Institutional Review Board із номерами схвалення 17-4 та 1-220777-AN-02-DICN18228 , відповідно

СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ

1. Арсені Л., Ломбарді А., Оріолі Д. Від структури до фенотипу: вплив змін колагену на здоров'я людини. Int J Mol Sci. 2018; 19: 1407.

2. Page-McCaw A, Ewald AJ, Werb Z. Матричні металопротеїнази та регуляція ремоделювання тканин. Nat Rev Mol Cell Biol. 2007; 8: 221-233.

3. Лі Д.Х., О Дж.Х., Чунг Дж.Х. Глікозаміноглікан і протеоглікан при старінні шкіри. J Dermatol Sci. 2016;83:174-181.

4. Фрейзер JR, Laurent TC, Laurent UB. Гіалуронан: його природа, розподіл, функції та оборот. J Intern Med. 1997; 242: 27-33.

5. Kage M, Tokudome Y, Hashimoto F. Проникнення тетрасахаридів гіалуронану через безволосу шкіру миші: дослідження in vitro та in vivo. Arch Dermatol Res. 2013;305:69-77. doi:10.1007/ s00403-012-1252-2

6. Gesteira TF, Sun M, Coulson-Thomas YM та ін. Багате гіалуронаном мікрооточення в ніші лімбальних стовбурових клітин регулює диференціювання лімбальних стовбурових клітин. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2017;58:4407-4421.

7. Kavasi RM, Berdiaki A, Spyridaki I та ін. Метаболізм ГК у гомеостазі шкіри та запальних захворюваннях. Food Chem Toxicol. 2017;101:128-138.

8. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Експресія мРНК гіалуронансинтази та колагену типу I тетрасахаридами гіалуронану в нормальних дермальних фібробластах людини. J Japanese Cosmet Sci Soc. 2013;37:1-5.

9. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Вплив тетрасахаридів гіалуронану на епідермальну диференціацію в нормальних епідермальних кератиноцитах людини. Int J Cosmet Sci. 2014;36:109- 115.

10. Pavicic T, Gauglitz GG, Lersch P та ін. Ефективність нових композицій гіалуронової кислоти різної молекулярної маси на основі крему для лікування зморшок. J Препарати Дерматол. 2011;10:990-1000.

11. Любарт Р., Ярів І., Фікслер Д., Ліповський А. Крем для обличчя з гіалуроновою кислотою для місцевого застосування з новою технологією мікронізованих молекул ефективно проникає в шкіру обличчя та покращує її якість: результати in vitro, ex-vivo та in-vivo (відкриті ) дослідження. J Clin Aesthet Dermatol. 2019;12:39-44.

12. Kano S, Todo H, Sugie K та ін. Використання реконструйованих культивованих моделей шкіри людини як альтернативної шкіри для досліджень проникнення хімічних сполук. Випробування альтернативних тварин 2010;15:61-70.

13. McDaniel DH, Hamzavi IH, Zeichner JA, et al. Повний захист плюс відновлення: нова концепція захисту від сонця та омолодження шкіри. J Препарати Дерматол. 2015;14:s3-s11.

14. Vitral GLN, Aguiar RAPL, de Souza IMF, Rego MAS, Guimarães RN, Reis ZSN. Товщина шкіри як потенційний маркер гестаційного віку при народженні, незважаючи на різні профілі росту плода: техніко-економічне обґрунтування. PLoS One. 2018;13:e0196542.

15. Кларис П., Клійсен Р., Тайманс Дж., Барель А.О. Вимірювання гідратації рогового шару: порівняння ємнісного методу (цифрова версія корнеометра CM 825) і імпедансного методу (Skicon-200EX). Skin Res Technol. 2012;18:316- 323.

16. Li X, Yuan C, Xing L, Humbert P. Топографічне різноманіття загальної мікрофлори шкіри та її зв’язок із типом середовища шкіри: обсерваційне дослідження в китайських жінок. Sci Rep. 2017; 7: 18046.

17. Roques C, Téot L, Frasson N, Meaume S. PRIMOS: оптична система, яка виконує тривимірні вимірювання поверхонь шкіри. J Догляд за ранами. 2003;12:362-364.

18. Matsunaga Y, Fujiwara S, Mori Y та ін. Розробка саморозчинних мікроголок з гіалуронової кислоти для лікування зморшок. Журнал IFSCC. 2012;15:73-78.

19. Борков Г., Еліас А.С. Підтяжка та освітлення шкіри обличчя після сну на наволочках, що містять оксид міді. Косметика. 2016; 3: 24.

20. Sito G, Manzoni V, Sommariva R. Судинні ускладнення після ін’єкції наповнювача обличчя: огляд літератури та мета-аналіз. J Clin Aesthet Dermatol. 2019;12:E65-E72.

21. Essendoubi M, Gobinet C, Reynaud R, Angiboust JF, Manfait M, Piot O. Проникнення гіалуронової кислоти різної молекулярної маси в шкіру людини за допомогою раманівської спектроскопії. Skin Res Technol. 2016;22:55-62.

22. Токудоме Ю., Комі Т., Омата А., Секіта М. Нова стратегія пасивної доставки гіалуронової кислоти з високою молекулярною масою наночастинок до шкіри, отриманої методом полііонного комплексу. Sci Rep. 2018; 8: 2336.

23. Jiang D, Liang J, Noble PW. Гіалуронан є імунним регулятором при захворюваннях людини. Physiol Rev. 2011; 91: 221-264.

24. Farwick M, Gauglitz G, Pavicic T та ін. Гіалуронова кислота 50 кДа посилює регуляцію деяких епідермальних генів, не змінюючи експресію TNF у відновленому епідермісі. Skin Pharmacol Physiol. 2011;24:210-217.

25. Takabe P, Kärnä R, Rauhala L, Tammi M, Tammi R, PasonenSeppänen S. Фрагментація гіалуронової оболонки меланоцитів посилює передачу сигналів рецептора TLR-4, індуковану ультрафіолетом В, і експресію прозапальних медіаторів IL6, IL8, CXCL1 і CXCL10 через активацію NF-kappaB. J Invest Dermatol. 2019;139:1993-2003.

【Для отримання додаткової інформації: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】